PCR反应容器、PCR装置、PCR方法制造方法及图纸

PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

PCR reaction container, PCR device, PCR method

The PCR reaction vessel (10) comprises a substrate (14), a flow channel (12), formed on a substrate (14), a pair of first filters (28), and second filters (30), at both ends of the channel (12); a pair of first air connected ports (24), second air connecting ports (26), connected to the channel through a first filter and the filter, and a thermal cycle area (12e). The first filter (28) and the second filter (30) are formed in the flow channel (12); the bifurcation point (112c) is formed between the first filters (28) and the second filter (30) in the channel (12); the bifurcation channel (131) is connected to the bifurcation point (112c); and the sample inlet (133) is formed at the other end of the bifurcation channel (131).

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PCR反应容器、PCR装置、PCR方法
本专利技术涉及用于聚合酶链式反应(PCR：PolymeraseChainReaction)的PCR反应容器和使用了该PCR反应容器的PCR装置、PCR方法。
技术介绍
遗传基因检测已经不仅被广泛活用于各种医学领域中的检测、农作物或者病原性微生物的类别确定、食品安全性的评价，还被广泛活用于针对病原性病毒或者各种感染病的检测。已知有为高灵敏度地检测作为遗传基因的微量的DNA而分析使DNA的一部分扩增后获得的样品的方法。尤其是PCR法，它是用于有选择地、使从活体等提取出来的极微量的DNA的某一部分进行扩增的、众所瞩目的技术。PCR法是针对将含有DNA的活体样本和由引物或者酶等构成的PCR试剂混合而成的样品施以预定的热循环，以使其反复发生变性、退火和延伸这些反应，以有选择地使DNA的特定部分扩增的技术。在PCR法中，通常是将预定数量的对象样品放入PCR管或者形成有多个孔的微板(微孔板)等反应容器中来进行的，但近几年来，使用了具有形成在基板上的细微流道(微流道)的反应容器(也称作chip)来进行的方式也被实用化了。无论在哪一反应容器中，都因为各种的技术进步而能够在该反应容器内高速且高精度地施以预定的热循环。专利文献1中公开了一种反应容器，其形成有用于进行PCR的流道。在该反应容器中，重合的2张树脂基板之间形成有流道，并且留有用于通过树脂基板上所形成的贯通孔l来向流道中导入样品的样品导入口和用于排放样品的样品排放口。树脂基板背面的凹陷部位被配置有例如由珀尔帖元件等构成的温度调节部。在反应容器的样品导入口配置有喷嘴，通过由该喷嘴进行的空气的供给、吸引，能够使样品在流道中移动。[在先技术文献][专利文献]专利文献1：日本特开2009-232700号公报
技术实现思路
[专利技术要解决的问题]在PCR法中，在样品处理中必须要避免发生从外部至系统内的污染(contamination)。若污染包含了处理对象以外的活体标本等，则可能会使得该处理对象以外的活体标本所含有的DNA扩增。此时，就无法使用处理对象样品来准确地进行此后的分析了。因此，需要想办法以使得在将样品导入到反应容器后不会发生污染。但是，在专利文献1中所公开的专利技术中，例如若在喷嘴或者向喷嘴输送空气的泵上附着有处理对象以外的活体标本，则该处理对象以外的活体标本可能会从样品导入口侵入到反应容器内，从而导致污染。另外，从成本角度、环境角度来看，每次进行PCR处理时都更换喷嘴、泵的前端零件、配件等是不现实的。本专利技术是鉴于这样的状况而研发的，其目的在于提供一种能够合适地防止污染的PCR反应容器、使用了该PCR反应容器的PCR装置、PCR方法。[用于解决问题的手段]为解决上述问题，本专利技术实施方式之一的PCR反应容器具有：基板；流道，形成于基板；一对过滤器，设于流道的两端；一对空气连通口，通过过滤器而与流道相连通；热循环区域，形成于流道中的一对过滤器之间；分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；分岔流道，其一端连接于分岔点；以及样品导入口，形成于分岔流道的另一端。本专利技术的另一实施方式也是PCR反应容器。该PCR反应容器具有：基板；流道，形成于基板；一对过滤器，设于流道的两端；一对空气连通口，通过过滤器而与流道相连通；热循环区域，形成于流道中的一对过滤器之间；第1分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；第1分岔流道，其一端连接于第1分岔点；第1样品导入口，形成于第1分岔流道的另一端；第2分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；第2分岔流道，其一端连接于第2分岔点；以及第2样品导入口，形成于第2分岔流道的另一端。上述PCR反应容器还可以具有被形成在流道中的第1分岔点与第2分岔点之间的缓冲流道区域。可以将缓冲流道区域设定成与想要施以PCR处理的样品的量相应的预定体积。热循环区域可以包含蛇行流道。热循环区域也可以包括：分别包含蛇行流道的一对反应区域；以及用于连接一对反应区域的连接区域。还可以具有用于密封空气连通口和样品导入口的密封薄膜。密封薄膜可以被形成为可被针头穿孔。本专利技术的另一实施方式是PCR装置。该装置可以具有：上述PCR反应容器；温度调节部，用于调节热循环区域的温度；以及泵系统，为使样品在热循环区域内移动而介由空气连通口来控制流道内的压力。泵系统可以具有在停止时初级侧和次级侧的压力变得相等的类型的气泵。气泵可以具有喷嘴，该喷嘴在前端设有中空针头。PCR装置还可以具有用于检测从流道内的样品发出的荧光的荧光检测器。PCR装置还可以具有控制部，其根据荧光检测器检测到的值来控制泵系统。本专利技术的另一实施方式是PCR方法。该方法具有：准备PCR反应容器的步骤、介由样品导入口向PCR反应容器内导入样品的步骤、在具有泵的PCR装置设置PCR反应容器的步骤、将泵的喷嘴连接于空气连通口的步骤、以及通过由泵控制流道内的压力，以使得样品在热循环区域内移动的步骤，其中，PCR反应容器具有：基板；流道，形成于基板；一对过滤器，设于流道的两端，一对空气连通口，通过过滤器而与流道相连通；热循环区域，形成于流道中的一对过滤器之间；分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；分岔流道，其一端连接于分岔点；以及样品导入口，形成于分岔流道的另一端。在使样品发生移动的步骤中，分岔流道可以留有不供于PCR的样品。本专利技术的另一实施方式也是PCR方法。该PCR方法具有：准备PCR反应容器的步骤、介由第1样品导入口或者第2样品导入口向PCR反应容器内导入样品的步骤、在具有泵的PCR装置设置PCR反应容器的步骤、将泵的喷嘴连接于空气连通口的步骤、通过由泵控制流道内的压力，来使样品在热循环区域内移动的步骤，其中，上述PCR反应容器具有：基板；流道，形成于基板；一对过滤器，设于流道的两端；一对空气连通口，通过过滤器与流道相连通；热循环区域，形成于流道中的一对过滤器之间；第1分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；第1分岔流道，其一端连接于第1分岔点；第1样品导入口，形成于第1分岔流道的另一端；第2分岔点，形成于流道中的一对过滤器之间；第2分岔流道，其一端连接于第2分岔点；以及第2样品导入口，形成于第2分岔流道的另一端。PCR反应容器可以还具有被形成在流道中的第1分岔点与第2分岔点之间的缓冲流道区域，上述PCR方法可以还具有使用缓冲流道区域来分注样品的步骤。在使样品移动的步骤中，在第1分岔流道和第2分岔流道可以停留有不供于PCR的样品。[专利技术效果]根据本专利技术，能够提供一种能够合适地防止污染的PCR反应容器、使用了该PCR反应容器的PCR装置、PCR方法。附图说明图1的(a)、(b)是用于说明本专利技术的第1实施方式所涉及的PCR反应容器的图。图2是图1的(a)所示的PCR反应容器的A-A剖面图。图3是图1的(a)所示的PCR反应容器的B-B剖面图。图4是第1实施方式的PCR反应容器所具有的基板的俯视图。图5是用于说明第1实施方式所涉及的PCR反应容器的构造的示意图。图6是示意性地示出第1实施方式中，样品被导入PCR反应容器内时的情况的图。图7是示出第1实施方式中，又将第3密封薄膜粘贴回基板时的状态的图。图8是用于说明PCR装置的图，该PCR装置使用了第1实施方式所涉及的PCR反应容器。图9是用于说明第1实施方式本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PCR反应容器，其特征在于，包括：基板，流道，形成于上述基板，一对过滤器，设于上述流道的两端，一对空气连通口，通过上述过滤器而与上述流道相连通，热循环区域，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，分岔点，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，分岔流道，其一端连接于上述分岔点，以及样品导入口，形成于上述分岔流道的另一端。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.01 JP 2015-2351291.一种PCR反应容器，其特征在于，包括：基板，流道，形成于上述基板，一对过滤器，设于上述流道的两端，一对空气连通口，通过上述过滤器而与上述流道相连通，热循环区域，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，分岔点，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，分岔流道，其一端连接于上述分岔点，以及样品导入口，形成于上述分岔流道的另一端。2.一种PCR反应容器，其特征在于，包括：基板，流道，形成于上述基板，一对过滤器，设于上述流道的两端，一对空气连通口，通过上述过滤器而与上述流道相连通，热循环区域，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，第1分岔点，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，第1分岔流道，其一端连接于上述第1分岔点，第1样品导入口，形成于上述第1分岔流道的另一端，第2分岔点，形成于上述流道中的上述一对过滤器之间，第2分岔流道，其一端连接于上述第2分岔点，以及第2样品导入口，形成于上述第2分岔流道的另一端。3.如权利要求2所述的PCR反应容器，其特征在于，还包括被形成在上述流道中的上述第1分岔点与上述第2分岔点之间的缓冲流道区域。4.如权利要求3所述的PCR反应容器，其特征在于，上述缓冲流道区域被设定成与想要施以PCR处理的样品的量相应的预定体积。5.如权利要求1至4的任一项所述的PCR反应容器，其特征在于，上述热循环区域包含蛇行流道。6.如权利要求5所述的PCR反应容器，其特征在于，上述热循环区域包括：分别包含蛇行流道的多个反应区域，以及连接上述多个反应区域的连接区域。7.如权利要求1至6的任一项所述的PCR反应容器，其特征在于，还包括用于密封上述空气连通口和上述样品导入口的密封薄膜。8.如权利要求7所述的PCR反应容器，其特征在于，上述密封薄膜被形成为可被针头穿孔。9.一种PCR装置，其特征在于，包括：如权利要求1至8的任一项所述的PCR反应容器，温度调节部，用于调节上述热循环区域的温度，以及泵系统，为使样品在上述热循环区域内移动而介由上述空气连通口来控制上述流道内的压力。10.如权利要求9所述的PCR装置，其特征在于，上述泵系统包括在停止时初级侧和次级侧的压力变得相等的类型的气泵。11.如权利要求10所述的PCR装置，其特征在于，上述气泵包括喷嘴，该喷嘴在其前端设有中空的针头。12.如权利要求9至...

【专利技术属性】
技术研发人员：福泽隆，永井秀典，西泽尚文，
申请(专利权)人：日本板硝子株式会社，国立研究开发法人产业技术综合研究所，光技光电集团日本分公司，
类型：发明
国别省市：日本,JP