与人及小鼠信号素3A交联的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供对人信号素3A及小鼠信号素3A具有交联能力的抗体。本发明专利技术的抗体可用作在信号素3A表达高的成胶质母细胞瘤、胰腺癌、肝癌等多种癌症中抑制信号素3A的抗体治疗剂。认为信号素3A为糖尿病视网膜病、自身免疫性关节炎、神经病变性疼痛、骨质疏松症的治疗靶标，因此本发明专利技术的抗体或抗原结合片段不仅用作抗癌治疗剂，而且还可以用作多种相关疾病的治疗剂。本发明专利技术的抗体具有高抗信号素3A结合性及基于其的信号素3A功能抑制性，因此抑制来源于多种癌症的癌细胞的生长，通过对信号素3A的下游信号传递物质中ERK的磷酸化进行抑制来抑制癌细胞的迁移，从而对于癌症的预防及治疗非常有效。

Antibodies linked to human and mouse signal element 3A and their uses

The present invention provides an antibody with cross linking ability to human signal element 3A and mouse signal element 3A. The antibodies of the present invention can be used as an antibody therapy agent for suppressing signal hormone 3A in a variety of cancers with high expression of glioblastoma, pancreatic cancer, liver cancer, and other cancers with high expression of signal 3A. It is considered that the signal element 3A is a therapeutic target for diabetic retinopathy, autoimmune arthritis, neurodegenerative pain, and osteoporosis, so the antibody or antigen binding fragment of this invention is not only used as an anticancer agent, but also can be used as a therapeutic agent for various related diseases. The antibody of the present invention has high anti signalling 3A binding and based on its signalling 3A function inhibition, so it inhibits the growth of cancer cells derived from various cancers and inhibits the migration of cancer cells by inhibiting the phosphorylation of ERK in the downstream signal transduction substance of the signalling 3A to prevent and treat cancer. It is often effective.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与人及小鼠信号素3A交联的抗体及其用途
本专利申请要求于2015年10月27日向韩国专利局提出的韩国专利申请第10-2015-0149272号以及于2016年9月26日向韩国专利局提出的韩国专利申请第10-2016-0123233号的优先权,上述专利申请的全部内容在此引入本说明书作为参考。本专利技术涉及与人及小鼠信号素3A交联的抗体及其用途。
技术介绍
信号素3A为由免疫球蛋白样(Ig-like，immunoglobulin-like)C2型结构域、PSI结构域、Sema结构域组成的分泌性蛋白，公知为与NRP1和PLXNA1结合并诱导相关信号传递。并且，据报道，在信号素3A高的特异性癌症中的癌细胞生长速度高，而且因癌细胞的迁移增加而促进癌细胞转移，患者预后也不好。目前，对于作为抗癌靶，并没有有关抑制信号素3A的抗癌剂，因此通过中和信号素3A来抑制相关信号传递的抗信号素3A抗体会成为新的抗癌治疗对策。抑制信号素3A的抗体在信号素3A表达高的成胶质母细胞瘤、胰腺癌、肝癌等癌症中可作为治疗剂而使用于抗癌治疗方法中。并且，信号素3A为对参与癌症生长的肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-AssociatedMacrophage，AM)的迁移起重要作用的因子，可期待与信号素3A有关的抗体在多种癌症中的抗肿瘤效果。认为信号素3A为糖尿病视网膜病、自身免疫性关节炎、神经病变性疼痛、骨质疏松症的治疗靶标，因此信号素3A不仅用作抗癌治疗剂，而且还可以用作多种相关疾病的治疗剂。在整个本说明书中参考多篇论文及专利文献并示出其引用。被引用的论文及专利文献的全部公开内容引入本说明书作为参考，从而更加明确地说明本专利技术所属
的水准及本专利技术的内容。
技术实现思路
技术问题本专利技术人为开发与作为参与癌细胞生长的因子的信号素3A结合且可预防及治疗癌症的抗体而作出努力，结果开发了呈现与人信号素3A及小鼠信号素3A交联的能力和抑制癌细胞生长及迁移的能力而具有优秀的预防及治疗癌症的效果的新型抗体，由此完成本专利技术。本专利技术的目的在于，提供与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段。本专利技术的再一目的在于，提供对与人信号素3A有关的抗体的重链可变区进行编码的核酸分子。本专利技术的另一目的在于，提供对与人信号素3A有关的抗体的轻链可变区进行编码的核酸分子。本专利技术的还有一目的在于，提供包含上述核酸分子的重组载体(recombinantvector)。本专利技术的又一目的在于，提供利用上述重组载体转化而成的宿主细胞。本专利技术的又一目的在于，提供用于预防或治疗癌症的药剂学组合物。本专利技术的其他目的及优点通过下述专利技术的详细说明及专利技术要求范围会更加明确。解决问题的方案根据本专利技术的一实施方式，本专利技术提供与人信号素3A有关的抗体(克隆名A08)或其抗原结合片段，包括：(a)包括重链互补决定区(CDR，complementaritydeterminingregion)氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:1的CDRH1、SEQIDNO:2的CDRH2及SEQIDNO:3的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:4的CDRL1、SEQIDNO:5的CDRL2及SEQIDNO:6的CDRL3。根据本专利技术的再一实施方式，本专利技术提供与人信号素3A有关的抗体(克隆名C10)或其抗原结合片段，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:7的CDRH1、SEQIDNO:8的CDRH2及SEQIDNO:9的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:10的CDRL1、SEQIDNO:11的CDRL2及SEQIDNO:12的CDRL3。根据本专利技术的另一实施方式，本专利技术提供与人信号素3A有关的抗体(克隆名F11)或其抗原结合片段，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:13的CDRH1、SEQIDNO:14的CDRH2及SEQIDNO:15的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:16的CDRL1、SEQIDNO:17的CDRL2及SEQIDNO:18的CDRL3。本专利技术人为开发与作为参与癌细胞生长的因子的信号素3A结合且可预防及治疗癌症的抗体而作出努力，结果开发了呈现与人信号素3A及小鼠信号素3A交联的能力和抑制癌细胞生长及迁移的能力而具有优秀的预防及治疗癌症的效果的新型抗体。本专利技术的抗体对人信号素3A具有特异性结合能力。尤其，本专利技术的抗体对人信号素3A及小鼠信号素3A具有交联能力。在本说明书中，在提出与人信号素3A有关的抗体时所使用的术语“抗体(antibody)”为与人信号素3A有关的特异性抗体，与人信号素3A特异性结合，且不仅包括完全抗体形态的抗原结合片段，而且还包括抗体分子的抗原结合片段。完全抗体为具有两个全长的轻链及两个全长的重链的结构，各个轻链以二硫键与重链相连接。重链不变域具有伽马(γ)、缪(μ)、阿尔法(α)、德尔塔(δ)及伊普西龙(ε)类，并具有伽马1(γ1)、伽马2(γ2)、伽马3(γ3)、伽马4(γ4)、阿尔法1(α1)及阿尔法2(α2)子类。轻链的不变域具有卡帕(κ)及兰布达(λ)类(CellularandMolecularImmunology，Wonsiewicz，M.J.，Ed.，Chapter45，pp.41-50，W.B.SaundersCo.Philadelphia，PA(1991)；Nisonoff，A.，IntroductiontoMolecularImmunology，2ndEd.，Chapter4,pp.45-65，sinauerAssociates，Inc.，Sunderland，MA(1984))。在本说明书中，术语“抗原结合片段”是指具有抗原结合能力的片段，包括Fab、F(ab')、F(ab')2及Fv等。抗体片段中的Fab为具有轻链及重链的可变域和轻链的不变域及重链的第一个不变域(CH1)的结构，具有一个抗原结合部位。与Fab不同地，Fab'具有在重链CH1结构域的C-末端包含一个以上半胱氨酸残基的铰链区(hingeregion)，F(ab')2抗体在Fab'的铰链区的半胱氨酸残基形成二硫键的过程中生成。Fv为仅具有重链可变域及轻链可变域的最小的抗体片段，生成Fv片段的重组技术已在PCT国际公开专利申请WO88/10649、WO88/106630、WO88/07085、WO88/07086及WO88/09344中公开。双链Fv(two-chainFv)中的重链可变域与轻链可变域以非共价键相连接，单链Fv(single-chainFv，scFv)中的重链的可变域与轻链的可变域通过肽键以非共价键相连接，或者可通过直接连接在C-末端来形成如双链Fv等二聚体结构。这种抗体片段可利用蛋白水解酶来获得(例如，可利用木瓜蛋白酶对整个抗体进行限制性切割来获得Fab，利用胃蛋白酶进行切割来获得F(ab')2片段)，优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQ ID NO:1的CDRH1、SEQ ID NO:2的CDRH2及SEQ ID NO:3的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQ ID NO:4的CDRL1、SEQ ID NO:5的CDRL2及SEQ ID NO:6的CDRL3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.27 KR 10-2015-0149272;2016.09.26 KR 10-2011.一种与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:1的CDRH1、SEQIDNO:2的CDRH2及SEQIDNO:3的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:4的CDRL1、SEQIDNO:5的CDRL2及SEQIDNO:6的CDRL3。2.一种与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:7的CDRH1、SEQIDNO:8的CDRH2及SEQIDNO:9的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:10的CDRL1、SEQIDNO:11的CDRL2及SEQIDNO:12的CDRL3。3.一种与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：(a)包括重链互补决定区氨基酸序列的重链可变区，上述重链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:13的CDRH1、SEQIDNO:14的CDRH2及SEQIDNO:15的CDRH3；以及(b)包括轻链互补决定区氨基酸序列的轻链可变区，上述轻链互补决定区氨基酸序列为SEQIDNO:16的CDRL1、SEQIDNO:17的CDRL2及SEQIDNO:18的CDRL3。4.根据权利要求1所述的与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，上述重链可变区包括SEQIDNO:19的氨基酸序列。5.根据权利要求1所述的与人信号素3A有关的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，上述轻链可变区包括SEQIDNO:20的氨基酸序列。6.根据权利要求2所述的与人...

【专利技术属性】
技术研发人员：南都铉，申镛在，李在铉，
申请(专利权)人：社会福祉法人三星生命公益财团，朌展生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR