用于抑制谱系特异性抗原的组合物和方法技术

本文公开了施用靶向谱系特异性细胞表面抗原的药剂和缺乏所述谱系特异性细胞表面抗原的造血细胞群用于血液恶性肿瘤的免疫治疗的方法。

Compositions and methods for inhibiting pedigree specific antigens

In this paper, the use of targeted cell specific cell surface antigen and the lack of the hematopoietic cell group specific cell surface antigen for the immunotherapy of hematological malignancies.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于抑制谱系特异性抗原的组合物和方法相关申请的交叉引用本申请依据美国法典第119条(U.S.C.§119)要求于2015年10月16日提交的美国临时申请号62/242,685的权益，其全部内容通过引用并入本文。
技术介绍
尽管经过数十年的努力，但以通过抗体或通过T细胞(经由T细胞受体)的抗原识别能力为基本依据，对抗癌症的治愈性免疫疗法已经非常难以实现(Cousin-Frankel,Science(2013)342:1432)。基于抗体的免疫疗法已广泛用于在下述情况中对抗癌症：与正常细胞相比肿瘤细胞中靶抗原上调的情况(例如，在Her-2扩增的乳腺癌中的Her-2)，或肿瘤细胞表达可以被抗体或抗体-毒素缀合物(例如，抗CD20的利妥昔单抗(Rituximab))识别的抗原的情况(Baselga等，AnnalsOncology(2001)12:S35)。虽然使用基于抗体的免疫疗法的临床试验已显示在有限数量的癌症类型中(通常与标准化疗联合使用时)患者存活率提高，但这些效果常常伴随着显著的安全性和疗效问题(Cousin-FrankelCancer,Science(2013)342:1432)。针对癌症的有效T细胞疗法在临床上更难实现(Schmitt等，Hum.GeneTher.(2009)20(11):1240)。针对癌症的有效T细胞疗法依赖于针对癌细胞上的抗原具有高亲和力结合的T细胞。嵌合抗原受体T细胞(CART细胞)广泛用于以高亲和力和特异性识别细胞上的抗原并且不需要辅助识别分子，例如“呈递”肽的HLA抗原。CART细胞的T细胞受体与抗原结合重链和轻链“交换”，从而避免了对HLA辅助分子的需要。重组CART受体与信号传导结构域融合，导致CART受体与靶抗原结合后T细胞活化。CART细胞的临床应用已被限于靶向窄范围的细胞表面抗原，进一步支持了癌症治疗中对改进的新方法的需要。具体而言，对于诸如急性骨髓性白血病(AML)等疾病而言需要新的方法，其中无法接受高强度化疗(现行护理标准)的老年患者的预后仍然很差，中位存活期仅为5至10个月(Dohner等，NEJM(2015)373:1136)。本文描述了靶向肿瘤细胞上某些类别的谱系特异性细胞表面抗原的癌症免疫治疗的新方法。然后将CART细胞治疗与通过输注或再输注缺乏谱系特异性细胞表面抗原的修饰细胞群替换非肿瘤细胞相结合。通过保持对体内具有CART细胞的患者的监护来预防或减少肿瘤的复发。专利技术概述本公开至少部分基于以下发现：包含结合谱系特异性细胞表面抗原的抗原结合片段的药剂(例如免疫细胞表达靶向CD33的嵌合受体)选择性引起表达谱系特异性细胞表面抗原的细胞的细胞死亡，而缺乏所述抗原的细胞(例如，经基因工程改造的造血细胞)避开了引起细胞死亡的治疗。基于这样的发现，预计涉及靶向谱系特异性细胞表面抗原的药剂(例如靶向CD33的CAR-T细胞)和缺乏谱系特异性细胞表面抗原的造血细胞(例如，CD33)的组合的免疫疗法将为造血系统恶性肿瘤提供有效的治疗方法。本公开的一个方面提供了用于治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：(i)有效量的靶向谱系特异性细胞表面抗原的药剂，其中所述药剂包含结合谱系特异性细胞表面抗原的抗原结合片段；和(ii)缺乏谱系特异性细胞表面抗原的造血细胞群。在一些实施方案中，所述药剂可以是表达嵌合受体的免疫细胞(例如T细胞)，所述嵌合受体包含结合谱系特异性细胞表面抗原的抗原结合片段。在一些实施方案中，免疫细胞、造血细胞或两者是同种异体或自体的。在一些实施方案中，造血细胞是造血干细胞(例如，CD34+/CD33-HSC)。在一些实施方案中，造血干细胞可以从骨髓细胞或外周血单核细胞(PBMC)获得。在一些实施方案中，抗原结合片段结合为2型谱系特异性细胞表面抗原的谱系特异性细胞表面抗原(例如，CD33)。在一些实施方案中，抗原结合片段结合为1型谱系特异性细胞表面抗原的谱系特异性细胞表面抗原(例如，CD19)。在一些实施方案中，嵌合受体中的抗原结合片段是特异性结合谱系特异性细胞表面抗原的单链抗体片段(scFv)，所述抗原可以是人蛋白，例如人CD33或CD19。在一些实施方案中，scFv结合人CD33并且包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区具有与SEQIDNO:12中的那些相同的互补决定区(CDR)，所述轻链可变区具有与SEQIDNO:13中的那些相同的CDR。在一个实例中，scFv包含具有SEQIDNO:12的氨基酸序列的重链可变结构域和具有SEQIDNO:13的氨基酸序列的轻链可变结构域。嵌合受体还可包含(a)铰链结构域，(b)跨膜结构域，(c)至少一个共刺激结构域，(d)细胞质信号传导结构域，或(e)其组合。在一些实施方案中，所述嵌合受体包含至少一个共刺激信号传导结构域，其可以源自CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、PD-1、ICOS、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7-H3、GITR、HVEM或其组合的共刺激受体。在一些实施方案中，所述至少一个共刺激信号传导结构域是包含CD28的信号传导结构域和ICOS的信号传导结构域的混合共刺激结构域。在一个实例中，所述至少一个共刺激信号传导结构域来自CD28并且所述嵌合受体还包含来自4-1BB或ICOS的第二共刺激信号传导结构域。在一些实施方案中，嵌合受体包含来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域。在一些实施方案中，嵌合受体包含来自CD8α或CD28α的铰链结构域。在一些实施方案中，嵌合受体包含来自CD8、CD28或ICOS的跨膜结构域。在一些实施方案中，嵌合受体从N端至C端包含(i)与谱系特异性细胞表面抗原(例如，CD33或CD19)结合的scFv，来自CD8α的铰链结构域，来自CD8的跨膜结构域，来自4-1BB的共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域；(ii)与谱系特异性细胞表面抗原(例如，CD33或CD19)结合的scFv，来自CD8α的铰链结构域，来自CD28的跨膜结构域，来自CD28的共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域；或(iii)与谱系特异性细胞表面抗原(例如，CD33或CD19)结合的scFv，来自CD8α的铰链结构域，来自CD28的跨膜结构域，来自CD28的第一共刺激结构域，来自4-1BB的第二共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域。在本文描述的任何方法中，受试者可能患有霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’slymphoma)、非霍奇金淋巴瘤、白血病或多发性骨髓瘤。在一些实例中，所述受试者患有白血病，所述白血病为急性骨髓性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病或慢性淋巴母细胞性白血病。另一方面，本公开提供了包含编码如本文所描述的任何嵌合受体的核苷酸序列的核酸。嵌合受体可以包含结合CD33的抗原结合片段、跨膜结构域和细胞质信号传导结构域，例如来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域。抗原结合片段(例如，scFv片段)包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区具有与SEQIDNO:12中的那些相同的CDR，所述轻链可变区具有与SEQIDNO:13中的那些相同的CDR。在一些实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，其包括向有需要的受试者施用：(i)有效量的靶向谱系特异性细胞表面抗原的药剂，其中所述药剂包含结合所述谱系特异性细胞表面抗原的抗原结合片段；和(ii)缺乏所述谱系特异性细胞表面抗原的造血细胞群。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.16 US 62/242,6851.一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，其包括向有需要的受试者施用：(i)有效量的靶向谱系特异性细胞表面抗原的药剂，其中所述药剂包含结合所述谱系特异性细胞表面抗原的抗原结合片段；和(ii)缺乏所述谱系特异性细胞表面抗原的造血细胞群。2.如权利要求1所述的方法，其中所述药剂是表达嵌合受体的免疫细胞，所述嵌合受体包含结合所述谱系特异性细胞表面抗原的所述抗原结合片段。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述免疫细胞、所述造血细胞或两者是同种异体或自体的。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述造血细胞是造血干细胞。5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述谱系特异性细胞表面抗原是2型谱系特异性细胞表面抗原。6.如权利要求5所述的方法，其中所述2型谱系特异性细胞表面抗原为CD33。7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体中的所述抗原结合片段是特异性结合作为人蛋白的所述谱系特异性细胞表面抗原的单链抗体片段(scFv)。8.如权利要求7所述的方法，其中所述scFv与人CD33结合。9.如权利要求8所述的方法，其中所述scFv包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区具有与SEQIDNO:12中的那些相同的互补决定区(CDR)，所述轻链可变区具有与SEQIDNO:13中的那些相同的CDR。10.如权利要求9所述的方法，其中所述scFv包含具有SEQIDNO:12的氨基酸序列的重链可变结构域和具有SEQIDNO:13的氨基酸序列的轻链可变结构域。11.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述谱系特异性细胞表面抗原是1型谱系特异性细胞表面抗原。12.如权利要求11所述的方法，其中所述1型谱系特异性细胞表面抗原为CD19。13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞为T细胞。14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体还包含：(a)铰链结构域(b)跨膜结构域，(c)至少一个共刺激结构域，(d)细胞质信号传导结构域，或(e)其组合。15.如权利要求14所述的方法，其中所述嵌合受体包含至少一个共刺激信号传导结构域，其源自选自由CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、PD-1、ICOS、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7-H3、GITR、HVEM及其组合组成的组的共刺激受体。16.如权利要求15所述的方法，其中所述至少一个共刺激信号传导结构域源自4-1BB、CD28或ICOS。17.如权利要求16所述的方法，其中所述至少一个共刺激信号传导结构域包含CD28的信号传导结构域和ICOS的信号传导结构域。18.如权利要求16或权利要求17所述的方法，其中所述至少一个共刺激信号传导结构域来自CD28并且所述嵌合受体还包含来自4-1BB或ICOS的第二共刺激信号传导结构域。19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体包含来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域。20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体包含来自CD8α或CD28α的铰链结构域。21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体包含来自CD8、CD28或ICOS的跨膜结构域。22.如权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述嵌合受体从N端至C端包含：(i)与所述谱系特异性细胞表面抗原结合的scFv、来自CD8α的铰链结构域、来自CD8的跨膜结构域、来自4-1BB的共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域；(ii)与所述谱系特异性细胞表面抗原结合的scFv、来自CD8α的铰链结构域、来自CD28的跨膜结构域、来自CD28的共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域；或(iii)与所述谱系特异性细胞表面抗原结合的scFv、来自CD8α的铰链结构域、来自CD28的跨膜结构域、来自CD28的第一共刺激结构域、来自4-1BB的第二共刺激结构域和来自CD3ζ的细胞质信号传导结构域。23.如权利要求4-22中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞为CD34+/CD33-。24.如权利要求23所述的方法，其中所述造血干细胞来自骨髓细胞或外周血单核细胞(PBMC)。25.如权利要求1-24中任一项所述的方法，其中所述受试者患有霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、白血病或多发性骨髓瘤。26.如权利要求25所述的方法，其中所述受试者患有白血病，所述白血病为急性骨髓性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病或慢性淋巴母细胞性白血病。27.一种包含编码嵌合受体的核苷酸序列的核酸，其中所述嵌合受体包含结合CD33的抗原结合片段、跨膜结构域和细胞质信号传导结构域，其中所述抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区具有与SEQIDNO:12中的那些相同的CDR，所述轻链可变区具有与SEQIDNO:13中的那些相同的CDR。28.如权利要求27所述的核酸，其中所述嵌合受体还包含至少一个共刺激结构域。29.如权利要求28所述的核酸，其中所述至少一个共刺激信号传导结构域源自选自由CD2...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·穆克吉，F·波拉特，A·马哈茂德阿里，
申请(专利权)人：纽约市哥伦比亚大学理事会，
类型：发明
国别省市：美国,US