用于治疗病毒性感染的噻唑化物化合物制造技术

噻唑化物化合物，例如硝唑尼特和/或替唑尼特，可用于抵抗属于小核糖核酸病毒科或副粘病毒科的病毒。

Thiazole compounds for the treatment of viral infections

Thiazolium compounds, such as nitazonet and / or zonazet, can be used to resist viruses belonging to the ribonucleic acid family or the paramyxovirus family.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗病毒性感染的噻唑化物化合物优先权本申请要求2016年3月31日提交的美国临时申请号62/316,463的优先权，前述申请的内容全部合并入本文中。
本申请大体涉及噻唑化物（thiazolide）化合物，并且尤其涉及它们在治疗某些病毒性感染中的用途。概述一种治疗由属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）的病毒引起的或与其相关的疾病或病症的方法，包括向有需要的对象施用有效量的药物组合物，所述药物组合物包含硝唑尼特（nitazoxanide）或替唑尼特（tizoxanide）中的至少一种或其药学上可接受的盐，其中所述有效量是在所述对象中阻断所述病毒的F糖蛋白的成熟的量。一种治疗由属于微小核糖核酸病毒科（Picornaviridae）的病毒引起的或与其相关的疾病或病症的方法，包括向有需要的对象施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含硝唑尼特或替唑尼特中的至少一种或其药学上可接受的盐。附图说明图1是用硝唑尼特和安慰剂治疗的经呼吸道合胞病毒（RSV）感染的患者的Kaplan-Meier生存分析图。TTSALL表示症状缓解的时间（TimetoSymptomAlleviation）（小时）。该图显示用硝唑尼特治疗与症状持续时间中位数减少76小时有关。图2是感染有属于肠病毒属（包括肠病毒和鼻病毒）的病毒的患者的Kaplan-Meier生存分析图，所述病毒被确认为其疾病的唯一病因，并且用a）硝唑尼特；b）硝唑尼特和奥司他韦；c）奥司他韦和d）安慰剂进行治疗。图3是感染有属于肠病毒属（包括肠病毒和鼻病毒）的病毒的患者的Kaplan-Meier生存分析图，所述病毒被确认为其疾病的唯一病因，并且用a）硝唑尼特本身或硝唑尼特和奥司他韦的组合以及b）奥司他韦本身或安慰剂进行治疗。图4A-B示出了在受仙台病毒感染的AGMK细胞中硝唑尼特的抗病毒活性。尤其是，图4A示出了仙台病毒的抑制与硝唑尼特浓度的函数的图。图4B示出了对照组、不经治疗的仙台病毒和用硝唑尼特治疗的仙台病毒的图。图5示出了不同的感染复数和不同的细胞类型的仙台病毒（SeV）与硝唑尼特浓度的函数的抑制图。图5的数据表明，在经SeV感染的细胞中硝唑尼特的抗病毒活性不依赖于感染复数和细胞类型。图6示出了SDS-PAGE数据，证明硝唑尼特对SeV蛋白合成的影响。图7示出了SDS-PAGE和蛋白质印记数据，证明硝唑尼特对SeV-F蛋白合成的影响。图8示出了蛋白质印记数据，证明在经硝唑尼特（NTZ）处理的AGMK蛋白质提取物的不可溶部分中检测到SeV-F蛋白的不成熟形式。图9示出了蛋白质印记数据，证明在经硝唑尼特（NTZ）处理的AGMK蛋白质提取物的不可溶部分中检测到SeV-F蛋白的不成熟形式。图10示出了照片，其提供了硝唑尼特抑制亨得拉病毒（HeV）F糖蛋白转运至细胞表面的证据。图11A-C示出了在AGMK中通过硝唑尼特抑制SeV副流感病毒。A,B.NTZ在一步法（A）和多步法（B）病毒生长条件下抑制SeV复制。在病毒吸附期之后，立即用不同浓度的NTZ或载体处理感染了SeV的猴肾AGMK细胞。在感染后(p.i.)24（A）或48（B）小时通过血凝素滴定（右图）和空斑测定（左图）确定病毒产量(○)。病毒产量用HA单位(HAU)/ml或PFU/ml表示，代表一式四份样品的平均值±标准差。*=p<0.05;**=p<0.01。通过细胞增殖实验确定模拟感染的细胞的细胞活性(∆)。（C）在感染后24小时，NTZ(10µg/ml)在感染了SeV的AGMK细胞中的细胞保护作用。NTZ在对宿主细胞无毒的浓度下有效抑制SeV复制。实际上，在被感染的细胞中NTZ有细胞保护作用。事实上，SeV感染（3PFU/细胞）通常具有巨大的细胞病变效应，导致细胞形状和大小改变和粘附力丧失（图C，SeV）。NTZ处理(10µg/ml)，除了抑制病毒产生后代之外，也被发现可以保护AGMK细胞免受病毒诱导的损伤（图C，SeV+NTZ）。图11A-C中的信息与图4A-B中的信息类似。图12示出了数据，证明在人肺泡A549细胞中通过硝唑尼特抑制SeV副流感病毒。在病毒吸附期之后，立即用不同浓度的NTZ或载体处理在一步法（3PFU/细胞）和多步法（0.01PFU/细胞）病毒生长条件下感染了SeV的人肺泡II型样A549细胞。在感染后24（一步法）或48（多步法）小时通过血凝素滴定确定病毒产量。病毒产量表示为未经处理的对照的百分比，表示为一式四份样本的平均值±标准差。*=p<0.05;**=p<0.01。NTZ抗病毒活性不依赖于细胞类型。事实上，NTZ对人肺泡II型样A549细胞感染的SeV也是有效的。图12的数据与图5的数据类似。图13A-B显示了硝唑尼特对SeV蛋白质合成的影响。（A）在病毒吸附期之后，用10μg/mlNTZ、2.5μg/ml衣霉素（TM）或者载体（C）处理模拟感染（模拟）或SeV感染（SeV）的AGMK细胞，对来自这些细胞的经[35S]Met/Cys标记的蛋白进行放射自显影检测（长脉冲，18小时，感染后6小时开始）。示出了病毒蛋白。（B）对来自如在(A)中处理的模拟感染或SeV感染的细胞的经[35S]Met/Cys标记的蛋白，在感染后24小时进行放射自显影检测（短脉冲，1小时）。含有等量的放射性（右图，cpm）或等量的蛋白质（左图，ml）的样品进行SDS-PAGE和放射自显影。在长（A，18小时）和短（B，1小时）[35S]Met/Cys标记的脉冲之后在感染后24小时，在未经处理的细胞中发现主要SeV蛋白质大量合成；在经NTZ处理的细胞中未检测到SeV蛋白质合成的大的变化，除了分子量大约为65-70kDa的条带消失之外，这随后被鉴定为融合蛋白质前体F0（见图14）的成熟异构体。图13A-B的数据与图7中的数据相似。图14A-B示出了硝唑尼特对SeV融合蛋白的影响。（A）在用10μg/mlNTZ、2.5μg/ml衣霉素（TM）或载体（C）处理的被SeV感染的AGMK细胞中，在感染后不同的时间用SeV-F抗体通过蛋白质印记分析检测SeV-F蛋白的水平。示出了模拟感染的对照。相同样品中的α-微管蛋白的水平被示出为加样对照。（B）在病毒吸附期后用10μg/mlNTZ或载体(C)处理模拟感染（模拟）的或SeV感染的AGMK细胞，对来自这些细胞的[35S]-Met/Cys标记的蛋白进行放射自显影检测（在感染后不同的时间1小时脉冲）。示出了病毒NP和F蛋白。结果证实了在经NTZ处理的细胞中不存在SeV融合蛋白。在经TM处理的细胞中显示了相似的结果。图14A-B的数据与图8的数据相似。图15A-B示出了硝唑尼特导致SeV-F蛋白不溶化。在存在（+）或者缺失（-）蛋白酶体抑制剂硼替佐米（Btz,25nM）、或自噬抑制剂氯喹（CQ,20或40μM）的情况下，对用10μg/mlNTZ、2.5μg/ml衣霉素（TM）或载体（C）处理的模拟感染的或SeV感染的AGMK细胞中的SeV-F和β-肌动蛋白，进行蛋白免疫印迹分析。（A）示出了用缓冲液B提取的细胞裂解物的可溶部分（可溶的），或者用Laemmli样品缓冲液提取的来自平行样品的总细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗由属于副粘病毒科（Paramyxoviridae）的病毒引起的或与其相关的疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的对象施用有效量的药物组合物，所述药物组合物包含硝唑尼特或替唑尼特中的至少一种或其药学上可接受的盐，其中所述有效量是在所述对象中阻断所述病毒的融合（F）糖蛋白的成熟的量。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.31 US 62/316,4631.一种治疗由属于副粘病毒科（Paramyxoviridae）的病毒引起的或与其相关的疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的对象施用有效量的药物组合物，所述药物组合物包含硝唑尼特或替唑尼特中的至少一种或其药学上可接受的盐，其中所述有效量是在所述对象中阻断所述病毒的融合（F）糖蛋白的成熟的量。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒是属于呼吸道病毒属的病毒。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述病毒是仙台病毒。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒是属于肺炎病毒属的病毒。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述病毒是人呼吸道合胞病毒。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述施用缓解所述疾病或病症的至少一种症状，其中至少一种症状选自鼻炎、咳嗽、食欲下降、气喘、呼吸困难、发热、细支气管炎和肺炎。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒是属于亨尼帕病毒属的病毒。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述病毒是亨德拉病毒。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述对象是人。10.一种治疗由属于亨尼帕病毒属的病毒引起的或与其相关的疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的对象施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含硝唑尼特或替唑尼特中的至少一种或其药学上可接受的盐。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述病毒是亨德拉病毒。12.根据权利要求10所述的方法，其中所述治疗有效量是在所述对象中阻断所述病毒的融合（F）蛋白的成熟的量。13.根据权利要求10所述的方法，其中所述对象是人。14.一种治疗由属于小核糖核酸病毒科（Picornaviridae）的病...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉恩·弗朗索瓦·罗西尼奥尔，玛利亚·加布里埃尔·桑托罗，
申请(专利权)人：罗马克实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US