特异于人HLA呈递的EBV潜伏膜蛋白2A肽的T细胞受体样抗体药剂制造技术

技术编号:18462146 阅读:32 留言:0更新日期:2018-07-18 14:06
本文描述的是结合由HLA I类分子,特别是HLA‑A02呈递的艾普斯登-巴尔病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)肽的抗体、其片段和多特异性结合剂。本文还提供了使用所述物质或其组合物检测、预防和/或治疗处理以由HLA‑A02呈递的EBV‑LMP2肽的表达为特征的疾病,特别是伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌的方法。

T cell receptor like antibody specific for human HLA presenting latent membrane protein 2A peptide of EBV

This article describes the antibody, fragment and multi specific binding agent of the latent membrane protein 2 (LMP2) peptide of the Epstein Barr virus (EBV) virus (EBV) 2 (LMP2) peptide, which is presented by class I molecules, especially HLA A02. This article also provides a disease characterized by the use of the substance or its composition for the detection, prevention, and / or treatment of the expression of the EBV LMP2 peptide expressed by HLA A02, especially the methods of bone lymphoma, Hodgkin's lymphoma and nasopharyngeal carcinoma.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】特异于人HLA呈递的EBV潜伏膜蛋白2A肽的T细胞受体样抗体药剂相关申请的交叉引用本申请要求2015年6月9日提交的美国临时申请No.62/173,330的权益,该专利的内容由此全文以引用方式并入本文。政府支持由纪念斯隆·凯特琳小动物成像核心设施和分子细胞学核心设施(MemorialSloanKetteringSmall-AnimalImagingCoreFacilityandMolecularCytologyCoreFacility)提供的技术服务部分地由NIH癌症中心补助金P30CA008748支持。
技术介绍
基于T细胞的免疫疗法对于癌症治疗是高度有效的,如由使用嵌合抗原受体、双特异性抗体和检查点阻断抗体的最近报道所证明的。嵌合抗原受体和双特异性抗体都依赖于表面抗原的基于抗体的靶向。然而,基于T细胞受体(TCR)的方法部分地由于肿瘤特异性T细胞的克隆频率不足或克隆缺失而发展较慢,并且由于抗体文库和平台技术的快速推进而变得相形失色。不幸的是,临床批准的治疗性单克隆抗体识别细胞表面蛋白的结构。此外,基于抗体的可靶向抗原的数量是有限的。在美国国家癌症研究所(NCI)癌症抗原优先顺序列表的候选者之中,大多数存在于细胞质隔室中。靶向此类候选物的抗体药剂的开发仍然是一项挑战。
技术实现思路
本专利技术除了别的以外提供了在人MHC(例如,I类)分子的环境中结合艾普斯登-巴尔病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)肽的人抗体药剂(及其亲和力成熟版本)。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂在肽-MHCI类(例如,HLA-A02)结合口袋中表现出对EBV-LMP2肽的中心部分(例如,中心肽位置)的高特异性。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂在肽-MHCI类结合口袋中表现出对EBV-LMP2肽的末端部分(例如,末端肽位置)的高特异性。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂有效地对在表面上通过HLA-A02分子携带EBV-LMP2肽的靶细胞进行抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂克服了与对在MHC分子(例如,MHCI类分子)的结合口袋中呈递的肽的一个或多个中心部分具有特异性的抗体相关的次优亲和力。在一些实施方案中,本专利技术还提供了结合EBV-LMP2/HLA-A02复合物的人抗体药剂。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂结合EBV-LMP2/HLA-A02复合物中的EBV-LMP2肽中的中心部分(例如,位置5)。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂结合EBV-LMP2/HLA-A02复合物中EBV-LMP2肽的位置1(P1)、位置5(P5)、位置8(P8)和/或它们的组合。在一些实施方案中,所提供的抗体药剂结合EBV-LMP2/HLA-A02复合物中EBV-LMP2肽的位置1至5(P1至P5)、位置4至7(P4至P7)或位置4至8(P4至P8)。本专利技术还提供了多特异性结合剂,所述多特异性结合剂包括与特定靶标相互作用的结合部分。在许多实施方案中,这种结合部分是或包含抗体组分。在一些实施方案中,多特异性结合剂是双特异性结合剂(例如,双特异性抗体)。在一些实施方案中,本专利技术的多特异性结合剂包括在肽-MHC(例如MHCI类)结合口袋中对EBV-LMP2肽的中心和/或末端部分具有高特异性的抗体组分。在一些实施方案中,本专利技术的多特异性结合剂包含基于在肽-MHCI类结合口袋(例如,HLA-A02结合口袋)中对EBV-LMP2肽具有高特异性的抗体组分的第一结合部分和与免疫效应细胞(例如,T细胞)相互作用的第二结合部分。在一些实施方案中,所提供的多特异性结合剂在针对EBV+和肿瘤细胞系的细胞毒性测定中具有高效力。在一些实施方案中,所提供的多特异性结合剂克服了与TCR样单克隆抗体相关的低亲和力障碍。与缺乏本文所述组分的亲本结合剂相比,如此提供的药剂具有改善的功能特征。本专利技术还提供了产生、选择和/或鉴定在肽-MHC结合口袋(例如,MHCI类结合口袋)中结合EBV-LMP2肽的抗体药剂和/或多特异性结合剂的方法。在许多实施方案中,本专利技术的方法包括产生、选择和/或鉴定结合由人MHCI类分子(例如,HLA-A02分子)呈递的EBV-LMP2肽的中心和/或末端部分的抗体药剂和/或多特异性结合剂。在一些实施方案中,方法包括基于在由MHCI类分子呈递的肽的一个或多个中心和/或末端部分处具有非天然氨基酸取代的结合(或没有结合)肽来选择抗体药剂。在一些实施方案中,方法包括基于缺乏在中心和/或末端部分处具有非天然氨基酸取代并且进一步在由MHCI类分子呈递的肽的N末端和/或C末端处具有额外的天然侧接残基的结合肽来选择抗体药剂。在一些实施方案中,方法包括基于在肽的中心部分之外的一个或多个位置(例如,位置5)处结合肽来阴性选择抗体药剂。在一些实施方案中,肽的中心部分外的肽位置突变。在一些实施方案中,肽是九聚体肽或十聚体肽。在许多实施方案中,MHCI类分子是人HLA-A02分子。在一些实施方案中,本专利技术提供了结合EBV-LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,其中人抗体药剂与EBV-LMP2肽中的一个或多个位置处的氨基酸残基直接相互作用,该一个或多个位置选自由位置1、位置5、位置8以及它们的组合组成的组。在一些实施方案中,本专利技术提供了结合EBV-LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,其中人抗体药剂的KD为约2.0至约170nM。在一些实施方案中,EBV-LMP2肽具有是或包含CLGGLLTMV(SEQIDNO:1)的氨基酸序列。在一些实施方案中,人抗体药剂与EBV-LMP2肽中的一个或多个位置处的氨基酸残基直接相互作用,该一个或多个位置选自由位置1、2、3、4、5、6、7、8以及它们的组合组成的组。在一些实施方案中,人抗体药剂包含SEQIDNO:31的重链CDR1、SEQIDNO:33的CDR2和SEQIDNO:35的CDR3;并且其中人抗体药剂包含SEQIDNO:73的轻链CDR1、SEQIDNO:75的CDR2和SEQIDNO:77的CDR3。在一些实施方案中,人抗体药剂包含SEQIDNO:37的重链CDR1、SEQIDNO:39的CDR2和SEQIDNO:41的CDR3;并且其中人抗体药剂包含SEQIDNO:79的轻链CDR1、SEQIDNO:81的CDR2和SEQIDNO:83的CDR3。在一些实施方案中,人抗体药剂包含SEQIDNO:43的重链CDR1、SEQIDNO:45的CDR2和SEQIDNO:47的CDR3;并且其中人抗体药剂包含SEQIDNO:85的轻链CDR1、SEQIDNO:87的CDR2和SEQIDNO:89的CDR3。在一些实施方案中,人抗体药剂包含SEQIDNO:49的重链CDR1、SEQIDNO:51的CDR2和SEQIDNO:53的CDR3;并且其中人抗体药剂包含SEQIDNO:91的轻链CDR1、SEQIDNO:93的CDR2和SEQIDNO:95的CDR3。在一些实施方案中,人抗体药剂包含SEQIDNO:55的重链CDR1、SEQIDNO:57的CDR2和SEQIDNO:59的CDR3;并且其中人抗体药剂包含SEQIDNO:97的轻链CDR1、SEQIDNO:99的CDR2和SEQIDNO:101的CDR本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合EBV‑LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂与所述EBV‑LMP2肽中的一个或多个位置处的氨基酸残基直接相互作用,所述一个或多个位置选自由位置1、位置5、位置8以及它们的组合组成的组。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.09 US 62/173,3301.一种结合EBV-LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂与所述EBV-LMP2肽中的一个或多个位置处的氨基酸残基直接相互作用,所述一个或多个位置选自由位置1、位置5、位置8以及它们的组合组成的组。2.一种结合EBV-LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂的KD为约2.0至约170nM。3.根据权利要求1或2所述的人抗体药剂,其中所述EBV-LMP2肽具有是或包含CLGGLLTMV(SEQIDNO:1)的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂与所述EBV-LMP2肽中的一个或多个位置处的氨基酸残基直接相互作用,所述一个或多个位置选自由位置1、2、3、4、5、6、7、8以及它们的组合组成的组。5.根据权利要求1至4中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂包含(a)SEQIDNO:31的重链CDR1、SEQIDNO:33的CDR2和SEQIDNO:35的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:73的轻链CDR1、SEQIDNO:75的CDR2和SEQIDNO:77的CDR3;(b)SEQIDNO:37的重链CDR1、SEQIDNO:39的CDR2和SEQIDNO:41的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:79的轻链CDR1、SEQIDNO:81的CDR2和SEQIDNO:83的CDR3;(c)SEQIDNO:43的重链CDR1、SEQIDNO:45的CDR2和SEQIDNO:47的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:85的轻链CDR1、SEQIDNO:87的CDR2和SEQIDNO:89的CDR3;(d)SEQIDNO:49的重链CDR1、SEQIDNO:51的CDR2和SEQIDNO:53的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:91的轻链CDR1、SEQIDNO:93的CDR2和SEQIDNO:95的CDR3;(e)SEQIDNO:55的重链CDR1、SEQIDNO:57的CDR2和SEQIDNO:59的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:97的轻链CDR1、SEQIDNO:99的CDR2和SEQIDNO:101的CDR3;(f)SEQIDNO:61的重链CDR1、SEQIDNO:63的CDR2和SEQIDNO:65的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:103的轻链CDR1、SEQIDNO:105的CDR2和SEQIDNO:107的CDR3;或者(g)SEQIDNO:67的重链CDR1、SEQIDNO:69的CDR2和SEQIDNO:71的CDR3;并且其中所述人抗体药剂包含SEQIDNO:109的轻链CDR1、SEQIDNO:111的CDR2和SEQIDNO:113的CDR3。6.根据权利要求1至4中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂包含(a)具有与表3中出现的重链可变区序列至少95%同一的序列的重链可变区,以及(b)具有与表3中出现的轻链可变区序列至少95%同一的序列的轻链可变区。7.根据权利要求1至4中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂包含(a)SEQIDNO:3的轻链可变区和SEQIDNO:5的重链可变区;(b)SEQIDNO:7的轻链可变区和SEQIDNO:9的重链可变区;(c)SEQIDNO:11的轻链可变区和SEQIDNO:13的重链可变区;(d)SEQIDNO:15的轻链可变区和SEQIDNO:17的重链可变区;(e)SEQIDNO:19的轻链可变区和SEQIDNO:21的重链可变区;(f)SEQIDNO:23的轻链可变区和SEQIDNO:25的重链可变区;或者(g)SEQIDNO:27的轻链可变区和SEQIDNO:29的重链可变区。8.根据前述权利要求中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂是去岩藻糖基化和/或用末端甘露糖、N-乙酰葡萄糖或葡萄糖糖基化的人单克隆抗体。9.一种结合EBV-LMP2/HLA肽复合物的人抗体药剂,所述人抗体药剂包含增加对所述EBV-LMP2/HLA肽复合物的亲和力的一个或多个氨基酸取代,并且其中所述人抗体药剂的特征在于(a)比对参考肽/HLA复合物的亲和力高至少约1.6的KA,和/或(b)对参考肽/HLA复合物没有交叉反应性。10.根据权利要求9所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂包含在氨基酸位置48、52、55、66、95以及它们的组合中的任一者处包含一个或多个氨基酸取代的轻链可变区。11.根据权利要求10所述的人抗体药剂,其中所述一个或多个氨基酸取代是I48V/S52G、P55H、K66R或N95I。12.根据权利要求9至11中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂包含重链可变区,所述重链可变区在氨基酸位置5、10、26、51、78以及它们的组合中的任一者处包含一个或多个氨基酸取代。13.根据权利要求12所述的人抗体药剂,其中所述一个或多个氨基酸取代是V5E、E10D、G26E/I51V或V78A。14.根据前述权利要求中任一项所述的人抗体药剂,其中所述人抗体药剂是人单克隆抗体或其片段。15.根据权利要求14所述的人抗体药剂,其中所述人单克隆抗体是IgG1。16.根据权利要求14所述的人抗体药剂,其中所述人单克隆抗体是scFv。17.一种分...

【专利技术属性】
技术研发人员:乃功·V·张马希乌丁·艾哈迈德A·洛佩斯阿尔瓦伊特罗C·刘刘宏J·Y·向S·颜
申请(专利权)人:纪念斯隆凯特琳癌症中心优瑞科生物技术公司
类型:发明
国别省市:美国,US

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