用于消除对治疗剂的免疫应答的改进的方法和化合物技术

技术编号:18462131 阅读:26 留言:0更新日期:2018-07-18 14:06
本发明专利技术描述了多肽的多组分试剂盒,包含:a)肽,该肽包含:a1)MHC II类T细胞表位或CD1d‑限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]‑X(2)‑C[SEQ ID NO:7]或C‑X(2)‑[CST][SEQ ID NO:8]氧化还原酶基序序列;和b)多肽,该多肽包含:b1)治疗性蛋白质和b2)在a1)中定义的表位,其中表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。治疗性蛋白质与肽组合用于预防针对治疗性蛋白质的免疫应答。

Improved methods and compounds for eliminating immune responses to therapeutic agents

The present invention describes a polycomponent of a polypeptide kit containing: a peptide, which contains: A1) MHC II T cell epitopes or CD1d restrictive NKT cell epitopes, and A2) close to the epitopes or the [CST] X (2) X (2) of the oxidoreductase motif Sequences; and b) polypeptides, which contain: B1) the epitopes defined in the therapeutic protein and B2) in A1, in which the sequence of the epitopes is a sequence different from the sequence of the protein in the B1). Therapeutic protein and peptide combinations are used to prevent immune responses against therapeutic proteins.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于消除对治疗剂的免疫应答的改进的方法和化合物
本专利技术涉及在替代疗法、基因疗法和基因疫苗接种(genevaccination,基因免疫)中使用的经修饰的蛋白质。本专利技术还涉及用于预防针对替代疗法、基因疗法和基因疫苗接种中使用的蛋白质的免疫应答的化合物和方法。
技术介绍
用作治疗剂的蛋白质通常会引起免疫应答,从而阻碍进一步的使用。例子是血友病A患者的治疗中的因子VIII和对细胞因子(例如抗-TNF-α抗体)特异或对细胞表面标记物(例如抗-CD20抗体)特异的抗体。平均而言,用这种试剂治疗的患者中有30%在外周血中产生可检测浓度的抗体。此外,相当大比例的患者需要施用高于预期剂量的治疗剂,这表明低于检测浓度的抗体可中和试剂的活性和/或增加其从循环中的清除。在所有这些情况下,防止这些免疫应答是有利的。基因疗法和基因疫苗接种依赖于用于进行转基因的病毒载体。然而,由这些载体表达的病毒蛋白引发免疫应答,降低转基因效率并防止转基因的再施用。避免这种响应将允许长期表达转基因,并且会减少实现功能性转基因或疫苗接种效率所需的病毒颗粒的数量。专利申请WO2008017517描述了具有抗原和氧化还原基序序列的II类限制性T细胞表位的肽及其在治疗许多疾病中的用途。Carlieretal.(2012),PloSONE7,e45366中公开了进一步的细节。此类肽的使用导致产生具有溶细胞特性的CD4+T细胞,其在与肽-MHCII类复合物同源相互作用后诱导抗原呈递细胞的凋亡(呈递在肽设计中使用的抗原)。同一专利技术人的其他专利申请公开了使用该技术以避免针对治疗性蛋白质或抗体的免疫应答(WO2009101206)或针对由用于接种的基因疗法的病毒骨架编码的蛋白质的免疫应答(WO2009101204)。针对多种抗原,已经描述了与多种MHCII类分子结合的混杂的MHCII类T细胞表位。US2007184023中公开了VEGF和混杂的T辅助细胞表位的融合蛋白。透明带蛋白和破伤风毒素混杂的T细胞表位的融合蛋白产生抗体,该抗体与内源性透明带蛋白结合并充当避孕药(Louetal.(1995)J.Immunol.155,2715-2720)。
技术实现思路
本专利技术为以下问题提供解决方案。在上述的现有技术方法中,在肽中使用的表位的序列由抗原的序列限定。当分离并与氧化还原基序序列融合时,此类表位肽可能经历蛋白水解切割、可能难以溶解、或可能倾向于与氧化还原基序形成内部胱氨酸桥。另外,将不同的肽用于不同的治疗性蛋白质使得难以设计标准程序,在这种标准程序中,可以以相同的浓度和相同的接种方案施用肽,而不管使用的治疗性蛋白质的类型如何。MHCII类决定簇在人类中的大多态性使得难以使用来自一种蛋白质的单个或少量表位来匹配这种多态性。只有那些含有混杂表位(promiscuousepitope)的抗原,或只有其中抗原的不同表位可以被识别以规避该多态性的那些抗原,有可能治疗任何不依赖于他/她的HLA类型的个体。如果在蛋白质中存在,使用CD1d-限制性NKT细胞肽表位可以绕过HLA多态性,然而并不是所有的抗原蛋白质都含有这样的肽序列。本专利技术允许解偶联含有T细胞表位的抗原之间的连接和使用相同表位以制备具有表位和氧化还原基序序列的肽。本专利技术允许使用结合不同MHCII类蛋白质和等位基因的T细胞表位。如从本申请中描述的医疗用途可以容易理解的,并且如下面更详细地描述,这些医疗用途需要第一施用包含表位和氧化还原酶基序的肽,以引出针对呈递表位的抗原呈递细胞(APC)的溶细胞CD4+群体。这之后是第二施用用于基因疗法的具有新引入的表位的治疗性蛋白质或载体。在本文中,治疗性蛋白质(或由载体编码的病毒载体蛋白质)含有与第一施用中使用的肽中存在的表位相同的表位。对例如治疗性蛋白质的最终免疫应答,将首先从APC呈递治疗性蛋白质的表位开始。APC不仅会呈递治疗性蛋白质本身中存在的表位,还会呈递已经引入的表位。因此,APC将被上述溶细胞杀死,阻止了抗原的清除。本专利技术的医疗用途基于两种类型多肽的分开给予。因此,它们通过同义词“组合”、“组”或“多组分试剂盒(kitofparts,成套试剂盒,部分的试剂盒,试剂盒套件,试剂盒部件)”中的一个来引用。本专利技术的一个方面涉及多肽的多组分试剂盒,包含:a)肽,该肽包含:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)多肽,该多肽包含:b1)治疗性蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。本专利技术的一个方面涉及多组分试剂盒,包含:a)肽,该肽包含:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)包含编码多肽的多核苷酸序列的表达载体,该多肽包含:b1)治疗性蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。本专利技术的一个方面涉及多组分试剂盒,包含:a)肽,该肽包含:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)用于基因疗法或基因疫苗接种的病毒载体,其在骨架中包含编码蛋白质的多核苷酸序列,该蛋白质包含:b1)用于载体的功能和维持的病毒载体蛋白质,b2)在a1)中定义的表位,其中表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。因此,表位的序列不出现在如现有技术治疗中使用的治疗性蛋白质或病毒载体蛋白的天然(或野生型或原生)序列中。本专利技术没有设想如下融合蛋白,其中蛋白质内的现有表位被重复为蛋白质的融合伴侣。本专利技术没有设想如下蛋白质,其中上述定义的a)的表位是从蛋白质的序列中切下的现有表位并且经由重组DNA技术通过缺失和插入而被插入到蛋白质的另一部分中。在这些试剂盒的实施方式中,b)的蛋白质是融合蛋白,其包含以下各项作为融合伴侣:b1)治疗性蛋白质或病毒载体蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。在这些试剂盒的实施方式中,氧化还原酶基序序列是C-X(2)-C[SEQIDNO:2]。在这些试剂盒的实施方式中,CD1d-限制性NKT细胞表位基序具有序列[FWYHT]-X(2)-[VILM]-X(2)-[FWYHT][SEQIDNO:1]。在这些试剂盒的实施方式中,CD1d-限制性NKT细胞表位基序具有序列[FWY]-X(2)-[VILM]-X(2)-[FWY][SEQIDNO:28]。在这些试剂盒的实施方式中,所述MHCII类T细胞表位是与一个或多个HLA-DR1分子结合的混杂表位。在这些试剂盒的实施方式中,MHCII类T细胞表位具有序列X1X2MATX6LLM[SEQIDNO:29],其中X1和X2独立地选自V、I本文档来自技高网
...

【技术保护点】
1.一种多肽的多组分试剂盒,包括:a)肽,所述肽包括:a1)MHC II类T细胞表位或CD1d‑限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]‑X(2)‑C[SEQ ID NO:7]或C‑X(2)‑[CST][SEQ ID NO:8]氧化还原酶基序序列,和b)多肽,所述多肽包括:b1)治疗性蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中,表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.25 EP 15186845.21.一种多肽的多组分试剂盒,包括:a)肽,所述肽包括:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)多肽,所述多肽包括:b1)治疗性蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中,表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。2.一种多组分试剂盒,包括:a)肽,所述肽包括:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)包括编码多肽的多核苷酸序列的表达载体,所述多肽包括:b1)治疗性蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中,表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。3.一种多组分试剂盒,包括:a)肽,所述肽包括:a1)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列,和b)用于基因疗法或基因疫苗接种的病毒载体,所述病毒载体在骨架中包括编码蛋白质的多核苷酸序列,所述蛋白质包括:b1)用于所述载体的功能和维持的病毒载体蛋白质,b2)在a1)中定义的表位,其中,表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的多组分试剂盒,其中,b)的蛋白质是包括以下各项作为融合伴侣的融合蛋白:b1)治疗性蛋白质或病毒载体蛋白质,和b2)在a1)中定义的表位,其中,表位序列是与b1)的蛋白质的序列不同的序列。5.根据权利要求1至4中任一项所述的多组分试剂盒,其中,所述氧化还原酶基序序列是C-X(2)-C[SEQIDNO:2]。6.根据权利要求1至5中任一项所述的多组分试剂盒,其中,CD1d-限制性NKT细胞表位基序具有序列[FWYHT]-X(2)-[VILM]-X(2)-[FWYHT][SEQIDNO:1]。7.根据权利要求1至6中任一项所述的多组分试剂盒,其中,CD1d-限制性NKT细胞表位基序具有序列[FWY]-X(2)-[VILM]-X(2)-[FWY][SEQIDNO:28]。8.根据权利要求1至7中任一项所述的多组分试剂盒,其中,所述MHCII类T细胞表位是结合到一个或多个HLA-DR1分子的混杂表位。9.根据权利要求1至8中任一项所述的多组分试剂盒,其中,所述MHCII类T细胞表位具有序列X1X2MATX6LLM[SEQIDNO:29],其中,X1和X2独立地选自V、I、L、M、Y、H、F和W,并且X6为R或P。10.根据权利要求1至9中任一项所述的多组分试剂盒,用作药物。11.一种多肽,包括:b1)治疗性蛋白质,和b2)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞肽表位,其中,表位序列是与b1的蛋白质的序列不同的序列,所述多肽在先前使用肽治疗的个体中用作药物,所述肽包括:a1)所述MHCII类T细胞表位或所述CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的具有[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列的序列。12.一种编码多肽的表达载体,所述多肽包括:b1)治疗性蛋白质,和b2)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞肽表位,其中,表位序列是与b1的蛋白质的序列不同的序列,所述表达载体在先前使用肽治疗的个体中用作药物,所述肽包括:a1)所述MHCII类T细胞表位或所述CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的具有[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列的序列。13.一种用于基因疗法或基因疫苗接种的病毒载体,所述病毒载体在骨架中包括编码蛋白质的多核苷酸序列,所述蛋白质包括:b1)用于所述载体的功能和维持的病毒蛋白质,和b2)MHCII类T细胞表位或CD1d-限制性NKT细胞表位,其中,表位序列是与b1的蛋白质的序列不同的序列,所述病毒载体在先前使用肽治疗的个体中用作药物,所述肽包括:a1)所述MHCII类T细胞表位或所述CD1d-限制性NKT细胞表位,和a2)紧邻所述表位或与所述表位隔开至多7个氨基酸的具有[CST]-X(2)-C[SEQIDNO:7]或C-X(2)-[CST][SEQIDNO:8]氧化还原酶基序序列的序列。14.一种肽,包括:-a...

【专利技术属性】
技术研发人员:让玛丽·圣雷米卢克·范德·埃尔斯特文森特·卡利尔
申请(专利权)人:易姆赛斯股份公司
类型:发明
国别省市:比利时,BE

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1