抗肿瘤性药物递送制剂制造技术

本发明专利技术提供一种抗肿瘤性药物递送制剂，用于治疗具有与正常组织相比高表达TUG1基因的肿瘤的受试对象或者预防肿瘤转移，其特征在于，含有高分子胶束作为有效成分，所述高分子胶束含有抑制所述TUG1基因高表达的核酸；该高分子胶束含有：具有阳离子性聚氨基酸链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物，以及所述核酸；该核酸与所述阳离子性聚氨基酸链段的阳离子基团结合形成复合体和/或该核酸包载或附着于所述胶束内部；以及该高分子胶束积聚于肿瘤。

Antitumor drug delivery agent

The present invention provides an antitumor drug delivery agent for the treatment of a tumor that has a high expression of TUG1 gene compared with normal tissue or to prevent tumor metastasis. It is characterized by containing polymeric micelles as an effective component, and the polymer micelles contain nucleic acids that inhibit the high expression of the TUG1 gene. Molecular micelles contain: block copolymers with cationic polyamino acid chain segments and hydrophilic polymer chains, and the nucleic acid; the nucleic acid is combined with the cationic group of the cationic polyamino acid chain to form a complex and / or the nucleic acid encapsulated or attached to the micelle; and the polymer micelle accumulates. In the tumor.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗肿瘤性药物递送制剂
本专利技术涉及针对高表达TUG1基因的肿瘤的抗肿瘤性药物递送制剂。具体地，本专利技术涉及一种含有在肿瘤细胞中有效抑制TUG1表达的修饰siRNA、修饰反义RNA、反义DNA等核酸的药物递送制剂。
技术介绍
TUG1是taurineupregulatedgene1(牛磺酸上调基因1)的缩写，其是经剪接的多聚腺苷酸化RNA，由Young等人(非专利文献1)等鉴定为啮齿类的视网膜分化所必需的非编码DNA，在视网膜和脑等神经系统的组织中表现出较强的表达。关于TUG1在癌或肿瘤中的作用，例如Zhang等人(非专利文献2)记载了如果在非小细胞肺癌(NSCLC)中将TUG1敲减时，则会促进细胞增殖。与此相反，也有报告称，在特定的癌或肿瘤中TUG1过量表达，如果抑制TUG1表达，则增殖会受到抑制。例如，Xu等人(非专利文献3)记载了TUG1的沉默会使食管鳞状上皮细胞癌(ESCC)细胞的增殖受到抑制，阻止细胞周期的进行。另外，Zhang等人(非专利文献4)记载了在骨肉瘤细胞株中TUG1过量表达，此外如果抑制TUG1表达，则骨肉瘤细胞会发生凋亡。另外，Han等人(非专利文献5)记载了在尿路上皮癌中TUG1过量表达，与晚期有关，此外如果使TUG1沉默，则会发生增殖抑制和凋亡诱导。在原发性脑肿瘤中恶性程度最高的胶母细胞瘤(glioblastomamultiforme:GBM)是至今仍然极难根治的肿瘤。GBM除了基因组异常以外，还有非翻译RNA和组蛋白修饰、DNA甲基化等表观基因组异常，提示了这些表观基因组异常会加剧GBM的恶性化。也有报告称，非翻译RNA之一的longnon-codingRNA(lncRNA，长链非编码RNA)进行的基因表达控制与细胞的分化和增殖等各种生命现象密切相关，参与到癌的恶性化。基于这种见解，对于GBM等肿瘤的顽固性疾病的疗法的研究开发也正在进行中，但尚未发现创新性技术。近年来，在实用性方面尤其引人注目的有希望的技术是片冈等人开发的高分子胶束药物递送系统，该技术是例如将药物包含在由包括亲水性嵌段和阳离子性氨基酸嵌段的嵌段共聚物形成的胶束内(专利文献1～6等)。能够利用该技术的疾病中也包括肿瘤，但对于含有何种药物，包括治疗效果在内，在很大程度上要依赖于今后的研究。现有技术文献专利文献专利文献1：日本再表2007/099660专利文献2：日本再表2007/099661专利文献3：日本再表2009/113645专利文献4：WO2013/162041专利文献5：日本再表2010/093036专利文献6：日本再表2012/005376非专利文献非专利文献1：T.L.Youngetal.,Curr.Biol.,2005；15(6):501-512非专利文献2：E.B.Zhangetal.,CellDeathDis.May22,2014；5:e1243.doi:10.1038/cddis.2014.201非专利文献3：Y.Xuetal.,TumorBiologyOct31,2014,doi:10,1007/s13277.014.2763.6非专利文献4：Q.Zhangetal.,AsianPacificJCancerPrev,2013；14(4):2311-2315非专利文献5：Y.Hanetal.,JSurgOncol,2013；107:555-559专利技术概述专利技术所要解决的课题本专利技术的目的在于提供一种能够预防或治疗包括胶质母细胞瘤(GBM)等脑肿瘤在内的高表达TUG1的癌或肿瘤的核酸药物。如上所述，GBM是在原发性脑肿瘤中恶性程度最高，至今仍是极难改善和根治的肿瘤。GBM除了基因组异常以外，还有非翻译RNA和组蛋白修饰、DNA甲基化等表观基因组异常，提示了这些表观基因组异常会加剧GBM的恶性化。本专利技术人首先发现了在包括GBM的一些肿瘤中，lncRNA之一的TUG1高表达，以其为靶标的核酸可有效使该肿瘤明显萎缩(WO2016/129633A1)，但是，本次还发现了在以脑肿瘤为代表的肿瘤组织内特异性地积聚，且能够抑制TUG1的表达而使肿瘤退缩的抗肿瘤性药物递送制剂，从而完成了本专利技术。解决课题的手段因此，本专利技术包含以下特征。(1)一种药物递送制剂，其是用于治疗具有与正常组织相比高表达TUG1基因的肿瘤的受试对象或者预防肿瘤转移的抗肿瘤性药物递送制剂，其特征在于，含有高分子胶束作为有效成分，所述高分子胶束含有抑制所述TUG1基因高表达的核酸；该高分子胶束含有：具有阳离子性聚氨基酸链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物，以及所述核酸；该核酸与所述阳离子性聚氨基酸链段的阳离子基团结合形成复合体和/或该核酸包载或附着于所述胶束内部；以及该高分子胶束积聚于肿瘤。(2)根据上述(1)所述的药物递送制剂，其中，所述肿瘤为脑肿瘤、胰腺癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、白血病或淋巴瘤。(3)根据上述(2)所述的药物递送制剂，其中，所述肿瘤为脑肿瘤或胰腺癌。(4)根据上述(1)～(3)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸为针对TUG1基因转录物RNA的siRNA、其前体RNA、反义RNA，或者其修饰RNA或反义DNA。(5)根据上述(1)～(4)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸以分别在TUG1基因转录物RNA的SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:3的核苷酸序列中在核苷酸第1044～1062位、第1044～1062位或第1044～1062位的区域，和/或在苷酸第2997～5181位、第2941～5111位或第2941～5125位的区域作为靶标。(6)根据上述(1)～(5)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸为siRNA、其前体RNA或其修饰RNA中任一种或两种以上的组合，所述siRNA含有由SEQIDNO:4～SEQIDNO:11的核苷酸序列组成的有义链和由与该有义链分别互补的SEQIDNO:12～SEQIDNO:19的核苷酸序列组成的反义链。(7)根据上述(4)～(6)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA含有一个或两个以上的修饰核苷酸或脱氧核糖核苷酸。(8)根据上述(4)～(7)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA为siRNA或反义RNA/DNA嵌合体，所述siRNA含有由SEQIDNO:20～SEQIDNO:27的核苷酸序列组成的有义链和由含有与该有义链分别互补的序列的SEQIDNO:28～SEQIDNO:35的核苷酸序列组成的反义链，所述反义RNA/DNA嵌合体由SEQIDNO:28～SEQIDNO:35的核苷酸序列组成。(9)根据上述(4)～(8)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA为LNA修饰反义RNA，所述LNA修饰反义RNA在各末端侧含有具有2’-O,4’-C-亚甲基桥而被锁定的至少两个LAN修饰核苷酸。(10)根据上述(4)～(5)、(7)～(9)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA为由SEQIDNO:36～SEQIDNO:38、SEQIDNO:51～SEQIDNO:53中任一个核苷酸序列组成的LNA修饰反义RNA。(11)根据上述(1)～(7)中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸为含有DNA或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物递送制剂，其是用于治疗具有与正常组织相比高表达TUG1基因的肿瘤的受试对象或者预防肿瘤转移的抗肿瘤性药物递送制剂，其特征在于，含有高分子胶束作为有效成分，所述高分子胶束含有抑制所述TUG1基因高表达的核酸；该高分子胶束含有：具有阳离子性聚氨基酸链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物，以及所述核酸；该核酸与所述阳离子性聚氨基酸链段的阳离子基团结合形成复合体和/或该核酸包载或附着于所述胶束内部；以及该高分子胶束积聚于肿瘤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.19 JP 2015-2268951.一种药物递送制剂，其是用于治疗具有与正常组织相比高表达TUG1基因的肿瘤的受试对象或者预防肿瘤转移的抗肿瘤性药物递送制剂，其特征在于，含有高分子胶束作为有效成分，所述高分子胶束含有抑制所述TUG1基因高表达的核酸；该高分子胶束含有：具有阳离子性聚氨基酸链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物，以及所述核酸；该核酸与所述阳离子性聚氨基酸链段的阳离子基团结合形成复合体和/或该核酸包载或附着于所述胶束内部；以及该高分子胶束积聚于肿瘤。2.根据权利要求1所述的药物递送制剂，其中，所述肿瘤为脑肿瘤、胰腺癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、白血病或淋巴瘤。3.根据权利要求2所述的药物递送制剂，其中，所述肿瘤为脑肿瘤或胰腺癌。4.根据权利要求1～3中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸为针对TUG1基因转录物RNA的siRNA、其前体RNA、反义RNA，或者其修饰RNA或反义DNA。5.根据权利要求1～4中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸以分别在TUG1基因转录物RNA的SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:3的核苷酸序列中在核苷酸第1044～1062位、第1044～1062位或第1044～1062位的区域，和/或在核苷酸第2997～5181位、第2941～5111位或第2941～5125位的区域作为靶标。6.根据权利要求1～5中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述核酸为siRNA、其前体RNA或其修饰RNA中任一种或两种以上的组合，所述siRNA含有由SEQIDNO:4～SEQIDNO:11的核苷酸序列组成的有义链和由与该有义链分别互补的SEQIDNO:12～SEQIDNO:19的核苷酸序列组成的反义链。7.根据权利要求4～6中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA含有一个或两个以上的修饰核苷酸或脱氧核糖核苷酸。8.根据权利要求4～7中任一项所述的药物递送制剂，其中，所述修饰RNA为siRNA或反义RNA/DNA嵌合体，所述siRNA含有由SEQIDNO:20～SEQIDNO:27的核苷酸序列组成的有义链和由含有与该有义链分别互补的序列的SEQIDNO:28～SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：近藤豊，胜岛启佑，片冈一则，宫田完二郎，金铉琎，
申请(专利权)人：公立大学法人名古屋市立大学，国立大学法人东京大学，
类型：发明
国别省市：日本,JP