同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色培养基及检测片制造技术

技术编号:18455680 阅读:38 留言:0更新日期:2018-07-18 11:31
本发明专利技术公开了同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色培养基及检测片,显色培养基含有蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉、氯化钠、丙酮酸钠、胆盐、特异性酶显色底物、酶诱导剂、稳定剂、新生霉素、高分子吸水凝胶。本发明专利技术显色培养基用于同时检测大肠菌群和沙门氏菌,检测灵敏度高,检测时间短,效率高,可对大肠菌群和沙门氏菌同时进行定性检测和定量检测分析,明显减少实验操作,节约成本,可应用于餐具直接取样检测、食品生产环境设备检测等场所。其中,大肠菌群显蓝色菌点,沙门氏菌显红色菌点。

Simultaneous detection of coliform and Salmonella chromogenic media and detection tablets

The present invention discloses the color culture medium and detection tablets of coliform and Salmonella. The color culture medium contains peptone, yeast extract, beef dipping, sodium chloride, sodium pyruvate, bile salt, specific enzyme chromogenic substrate, enzyme inducer, stabilizer, neonatal mycin, macromolecule absorbent gel. The color culture medium is used for simultaneous detection of coliform and Salmonella, with high detection sensitivity, short detection time and high efficiency, which can be used for qualitative detection and quantitative analysis of coliform and Salmonella, reducing experimental operation and saving cost, and can be applied to direct sampling and food production of tableware. Environmental equipment testing and other places. Among them, coliform bacteria were found in blue bacteria and Salmonella was found in red bacteria.

【技术实现步骤摘要】
同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色培养基及检测片
本专利技术涉及微生物检测领域,特别涉及一种同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色培养基及检测片。
技术介绍
大肠菌群是一类在一定培养条件下能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。科研调查报告显示,大肠菌群广泛存在于动物粪便及受其污染的水体、食品生产线等环境中。大肠菌群已被作为一项检验食品及其接触介质的卫生质量重要指标之一。沙门氏菌是肠杆菌科细菌中的一员,是一种能导致人畜共患病的重要致病微生物,由食用被沙门氏菌污染的食品而导致食物中毒的事例见诸报端,因此受到各国食品安全监管部门的重视。由沙门氏菌或大肠菌群污染而带来大量的经济损失,威胁人类身体健康与正常生活。目前我国GB4789系列标准中检测该两种菌主要依靠传统培养皿法,采用一系列生化培养特征和血清学鉴定来检测。GB14934-2016标准对消毒餐饮具中微生物指标要求大肠菌群和沙门氏菌均不得检出。随着免疫学、生物化学、分子生物学、酶学、基因测序等学科技术取得长足发展,用于沙门氏菌和大肠菌群的检测手段不断扩宽且具有快速、简便、高特异等特点,如RTPCR、胶体金免疫试纸法、酶联免疫快速检测法、DNA探针技术和快速测序技术等快速检测方法,正在一定领域内得到推广应用。但是这些技术对微生物检验人员有较高的技术要求且配套使用试剂、仪器昂贵,使用成本较高,一些技术还存在不成熟不完善,尚未有基层推广的基础。利用细菌产生特异性酶分解特异性显色底物产色来达到检测鉴定目的的显色培养基在国内已有较好发展,GB4789.4中已把显色培养基作为一种筛选手段嵌入到检测流程中,而GB14934把大肠菌群快速检测纸片法列为一种检测方法。但目前市面上商品化的显色培养基或检测纸片、检测卡多只能单独检测沙门氏菌或大肠菌群。CN102827918A公布了一种沙门氏菌显色培养基配方,其主要成分是:琼脂、蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、表面活性剂、胆盐、酶诱导剂、辛酸酯酶显色底物、β-半乳糖苷酶显色底物、氨基己糖苷酶显色底物、新生霉素组成。该培养基上沙门氏菌属菌株呈紫红色典型菌落,未被抑制的部分大肠菌呈蓝绿色菌落,部分大肠菌群菌属在该培养基上会因为被抑制而无法生长显色。CN106244670A公布了一种沙门氏菌快速检测培养基及检测皿,其主要由吸水凝胶、胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、胆盐、特异性显色底物、IPTG、新生霉素和稳定剂组成。现有显色培养基依靠大剂量高选择性抑菌剂作为细菌筛选条件,培养基不能高温消毒而可能发生培养基本身带菌而出现假阳性现象,类似的大肠菌群显色培养基、沙门氏菌显色培养基及其快速检测纸片等同类型产品由于选择性物质的相互抑制或缺乏相应的特异性酶显色底物、酶诱导剂而不能达到同时检测的目的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足,提供一种显色明显,检测效果更佳的同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色培养基及检测片。本专利技术所采取的技术方案是:一种可同时检测沙门氏菌和大肠菌群的显色培养基,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~50g、蛋白胨5~30g、酵母浸粉1~10g、牛肉浸粉1~10g、氯化钠3~15g、丙酮酸钠0.001~15g、胆盐2~15g、新生霉素2~40mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.1~0.8g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.1~0.8g、IPTG0.001~0.6g、稳定剂1~16g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~40g、蛋白胨10~25g、酵母浸粉2~8g、牛肉浸粉2~8g、氯化钠3~8g、丙酮酸钠0.001~10g、胆盐2~8g、新生霉素2~30mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.1~0.6g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.1~0.6g、IPTG0.01~0.3g、稳定剂2~10g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~30g、蛋白胨10~20g、酵母浸粉5g、牛肉浸粉3~8g、氯化钠3~6g、丙酮酸钠0.1~5g、胆盐2~5g、新生霉素5~25mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.2~0.5g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.2~0.5g、IPTG0.1~0.3g、稳定剂5~10g。作为上述显色培养基的进一步改进,吸水凝胶由聚乙烯醇、聚环氧乙烷、丙烯酸树脂、瓜尔胶、羧甲基纤维素钠、琼脂组成,每1000mL培养基中含有聚乙烯醇1~10g、聚环氧乙烷1~10g、丙烯酸树脂1~15g、瓜尔胶1~15g、羧甲基纤维素钠1~5g、琼脂1~5g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基中含有聚乙烯醇2~8g、聚环氧乙烷2~8g、丙烯酸树脂4~12g、瓜尔胶2~10g、羧甲基纤维素钠1~4g、琼脂1~4g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基中含有聚乙烯醇3~5g、聚环氧乙烷3~5g、丙烯酸树脂4~8g、瓜尔胶4~6g、羧甲基纤维素钠2~4g、琼脂1~2g。作为上述显色培养基的进一步改进,稳定剂由SDS、吐温、甘油组成,每1000mL培养基中含有SDS0.05~0.5g、吐温2~8g、甘油1~10g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基中含有SDS0.05~0.2g、吐温2~5g、甘油1~8g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基中含有SDS0.1~0.2g、吐温4g、甘油3~5g。一种可同时检测大肠菌群和沙门氏菌的显色检测片,包括吸附载体,吸附载体负载有上述的显色培养基。本专利技术的有益效果是:本专利技术的大肠菌群和沙门氏菌显色培养基,通过配方优化,特别是对稳定剂的优化,同时添加丙酮酸钠,复合稳定剂SDS、吐温、甘油和丙酮酸钠协同作用,既能促进损伤细菌快速恢复、适应抑制剂环境,且其自身对大肠菌群和沙门氏菌外的其他肠道菌具有较好的抑制作用,能提高本培养基的选择性,有助于降低胆盐、新生霉素的使用剂量,减少了对大肠杆菌和沙门氏菌生长抑制作用。同时添加了酶诱导剂,从而达到同时检测两种细菌的目的。对大肠菌群和沙门氏菌进行定性和定量检验,菌落特征明显、易于辨认计数、检测周期短、节约大量人力物力、可用于食品及其生产环境中的大肠菌群和沙门氏菌进行快速检测和初步鉴定,显色检测片可用于餐具微生物快速检测,方便执法监控。本专利技术的显色检测片特异性好、使用方便快捷,能够同时检测大肠菌群和沙门氏菌两项指标,检测周期短。本检测纸片还可应用于食品生产环境等场所的微生物检测。附图说明图1是显色检测片2的检测结果照片;图2是显色检测片4的检测结果照片。具体实施方式一种可同时检测沙门氏菌和大肠菌群的显色培养基,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~50g、蛋白胨5~30g、酵母浸粉1~10g、牛肉浸粉1~10g、氯化钠3~15g、丙酮酸钠0.001~15g、胆盐2~15g、新生霉素2~40mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.1~0.8g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.1~0.8g、IPTG0.001~0.6g、稳定剂1~16g。作为上述显色培养基的进一步改进,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~40g、蛋白胨10~25g本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种可同时检测沙门氏菌和大肠菌群的显色培养基,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~50g、蛋白胨5~30g、酵母浸粉1~10g、牛肉浸粉1~10g、氯化钠3~15g、丙酮酸钠0.001~15g、胆盐2~15g、新生霉素2~40mg、5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯0.1~0.8g、5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚‑β‑D‑半乳糖苷0.1~0.8g、IPTG 0.001~0.6g、稳定剂1~16g。

【技术特征摘要】
1.一种可同时检测沙门氏菌和大肠菌群的显色培养基,每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~50g、蛋白胨5~30g、酵母浸粉1~10g、牛肉浸粉1~10g、氯化钠3~15g、丙酮酸钠0.001~15g、胆盐2~15g、新生霉素2~40mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.1~0.8g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.1~0.8g、IPTG0.001~0.6g、稳定剂1~16g。2.根据权利要求1所述的显色培养基,其特征在于:每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~40g、蛋白胨10~25g、酵母浸粉2~8g、牛肉浸粉2~8g、氯化钠3~8g、丙酮酸钠0.001~10g、胆盐2~8g、新生霉素2~30mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.1~0.6g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.1~0.6g、IPTG0.01~0.3g、稳定剂2~10g。3.根据权利要求1所述的显色培养基,其特征在于:每1000mL培养基含有高分子吸水凝胶2~30g、蛋白胨10~20g、酵母浸粉5g、牛肉浸粉3~8g、氯化钠3~6g、丙酮酸钠0.1~5g、胆盐2~5g、新生霉素5~25mg、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0.2~0.5g、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷0.2~0.5g、IPTG0.1~0.3g、稳定剂5~10g。4.根据权利要求1~3任意一项所述的显...

【专利技术属性】
技术研发人员:张联裕雷达
申请(专利权)人:广州聚佰生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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