赤霉酸的发酵方法技术

本发明专利技术提供了一种赤霉酸的发酵方法，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；在发酵过程中当溶氧高于20％时，补加葡萄糖与植物油。与现有技术相比，本发明专利技术在发酵过程中采用糖油混补，提高了产酸量，同时以玉米蛋白粉作为有机氮源，其蛋白质含量较高，达50％以上，能够实现赤霉素高密度发酵，且能够避免如花生饼粉产生黄曲霉的隐患，保证菌体的合成与代谢，使其能够快速稳定的发酵；再者，添加植物油不仅能够为发酵提供碳源，还可有效减少发酵气泡逃液等情况的发生，避免了物料损失、染菌等潜在风险；另外，在发酵培养基中添加微量元素能够全面保证微生物生长代谢过程中各类酶与代谢物的活性。

The fermentation method of gibberellic acid

The invention provides a method for fermenting of gibberellic acid, including: transferring the seed liquid of gibberellic acid into the fermenting tank and getting the gibberellic acid fermentation broth, and adding glucose and vegetable oil when the dissolved oxygen is higher than 20% during the fermentation process. Compared with the existing technology, the invention uses sugar oil in the fermentation process to improve the acid production, while the protein content of the corn protein powder is higher than 50%, which can achieve the high density fermentation of gibberellin, and can avoid the hidden danger of Aspergillus flavus produced by the flower cake powder and ensure the synthesis of the bacteria. In addition, adding plant oil can not only provide carbon source for fermentation, but also effectively reduce the occurrence of fermentation bubbles, avoid the potential risk of material loss and bacteria infection. In addition, adding trace elements in the fermentation medium can fully guarantee the growth of microorganism. The activity of all kinds of enzymes and metabolites in Xie Guocheng.

【技术实现步骤摘要】
赤霉酸的发酵方法
本专利技术属于发酵
，尤其涉及一种赤霉酸的发酵方法。
技术介绍
赤霉酸是通过一种赤霉菌发酵培养代谢得到的一类次级代谢产物，被分离、鉴定和命名的一种有116种，其中在农业中应用最广泛的就是GA3，在我国农业生产中发挥着巨大的作用。GA3具有非常高的植物调节活性，对各种农作物的生长和发育都有很明显的调节作用。在北方，GA3主要应用于葡萄、红枣、山楂、油桃等经济作物上，在花期喷洒一定浓度赤霉酸溶液可以有效提高果树的坐果率，促进果实生长发育，果树产量提高20％～30％左右。在南方，赤霉酸主要应用于杂交水稻制种上，调节水稻父母本在同一时间开花，使母本授粉率大幅提高，进一步提高了杂交水稻种子的产量，降低了种子的生产成本，为农民减轻了负担。现有赤霉酸的制备通常采用液体深层发酵法，在发酵过程中采用分批/流加豆油或葡萄糖等方式，得到的发酵产酸较高水平为2800～3000ppm，但其仍有待提高。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种赤霉酸的发酵方法，该发酵方法产量较高且稳定。本专利技术提供了一种赤霉酸的发酵方法，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％～30％时，补加葡萄糖与植物油。优选的，所述发酵的温度为28℃～30℃；所述发酵的时间为8～10天；所述发酵的pH值为5.0～5.2。优选的，所述发酵的压力为0.01～0.05MPa；所述发酵的空气流量为2000～3000Nm3/h。优选的，所述葡萄糖与植物油的质量比为(1～3)：1。优选的，所述葡萄糖以葡萄糖溶液的形式添加；所述葡萄糖溶液中葡萄糖的质量浓度为40％～50％；所述葡萄糖溶液与植物油的体积比为(2～4)：1。优选的，所述小分子有机碳源选自蔗糖、葡萄糖、糖蜜、淀粉糊精、甘露糖与半乳糖中的一种或多种。优选的，所述小分子有机碳源为蔗糖与葡萄糖。优选的，所述蔗糖与葡萄糖的质量比为(1～2)：(2～1)。优选的，所述微量元素包括硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴。优选的，所述硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的质量比为(0.5～1.5)：(0.5～1.5)：(0.5～1.5)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)。本专利技术提供了一种赤霉酸的发酵方法，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％时，补加葡萄糖与植物油。与现有技术相比，本专利技术在发酵过程中采用糖油混补，提高了产酸量，同时以玉米蛋白粉作为有机氮源，其蛋白质含量较高，达50％以上，能够实现赤霉素高密度发酵，且能够避免如花生饼粉产生黄曲霉的隐患，保证菌体的合成与代谢，使其能够快速稳定的发酵；再者，添加植物油不仅能够为发酵提供碳源，还可有效减少发酵气泡逃液等情况的发生，避免了物料损失、染菌等潜在风险；另外，在发酵培养基中添加微量元素能够全面保证微生物生长代谢过程中各类酶与代谢物的活性。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种赤霉酸的发酵方法，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％时，补加葡萄糖与植物油。本专利技术对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。所述赤霉酸的种子液为本领域技术人员熟知的种子液即可，并无特殊的限制；所述种子液的湿重优选为30％～40％。按照本专利技术，所述赤霉酸的种子液优选按照以下方法进行制备：S1)将冷冻保藏的GA3菌种接入至种子培养基中进行摇瓶培养，得到悬浮液；所述种子培养基包括5～15g/L第一有机氮源、5～15g/L第一小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇；S2)将所述悬浮液转入种子罐中进行发酵培养，得到种子液；所述种子罐的培养基包括5～15g/L第二有机氮源、5～15g/L第二小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇。本专利技术对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。将冷冻保藏的GA3菌种接种至种子培养基中进行摇瓶培养，得到悬浮液；所述种子培养基包括5～15g/L第一有机氮源、5～15g/L第一小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇，优选包括8～12g/L第一有机氮源、8～12g/L第一小分子有机碳源、2～4g/L磷酸二氢钾、0.3～0.8g/L硫酸镁与0.3～0.8g/L聚丙二醇，更优选包括9～11g/L第一有机氮源、9～11g/L第一小分子有机碳源、2～4g/L磷酸二氢钾、0.5～0.7g/L硫酸镁与0.4～0.5g/L聚丙二醇，再优选包括10g/L第一有机氮源、10g/L第一小分子有机碳源、3g/L磷酸二氢钾、0.6g/L硫酸镁与0.5g/L聚丙二醇；所述第一有机氮源为本领域技术人员熟知的有机氮源即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为大豆蛋白、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉与鱼粉中的一种或多种；有机氮源在微生物分泌的蛋白酶的作用下，分解成氨基酸，被菌体吸收后作为菌体蛋白质等的组成部分，并且有机氮源除提供菌体生长繁殖的营养外，还可作为产物前体；所述第一小分子有机碳源为本领域技术人员熟知的小分子有机碳源即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为蔗糖、葡萄糖、糖蜜、淀粉糊精、甘露糖与半乳糖中的一种或多种；小分子有机碳源可为微生物细胞的生长繁殖提供能源和合成菌体所必须的碳成分，还可为合成目的产物提供所需的碳成分；培养基中磷酸二氢钾用以提供磷元素，磷是核酸和蛋白质的必要成分，也是重要的能量传递着-三磷酸腺苷(ATP)的成分，在代谢途径的调节方面，磷也起着很重要的作用，其有利于糖代谢的进行，因此可促进微生物的生长；本专利技术中所用的硫酸镁为本领域技术人员熟知的硫酸镁即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为七水硫酸镁；硫酸镁用以提供镁元素，镁元素是许多酶的活化剂，能促进碳水化合物的新陈代谢、核酸的合成及磷酸盐的转化等；聚丙二醇(PPG)其在培养基中作为消泡剂使用，可避免因气泡引起的逃液流失营养剂菌体，并且逃液也会增加染菌风险；所述摇瓶培本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种赤霉酸的发酵方法，其特征在于，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％～30％时，补加葡萄糖与植物油。

【技术特征摘要】
1.一种赤霉酸的发酵方法，其特征在于，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％～30％时，补加葡萄糖与植物油。2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述发酵的温度为28℃～30℃；所述发酵的时间为8～10天；所述发酵的pH值为5.0～5.2。3.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述发酵的压力为0.01～0.05MPa；所述发酵的空气流量为2000～3000Nm3/h。4.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述葡萄糖与植物油的质量比为(1～3)：1。5.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘健，杨宝强，沈颂娣，熊仁科，齐昊，景飞江，
申请(专利权)人：四川龙蟒福生科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川,51