促进WSSV感染的基因Cq-BAF及制备方法与应用技术

促进WSSV感染的基因Cq‑BAF及制备方法与应用，所述红螯螯虾屏障自整合因子命名为Cq‑BAF。构建Cq‑BAF重组表达载体；将所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化所得的表达产物，获得重组蛋白，即rCq‑BAF。Cq‑BAF能结合WSSV，抑制其功能后WSSV的感染复制能力降低，说明其本身对WSSV的感染具有促进作用，因此针对Cq‑BAF的功能鉴定在探究WSSV如何感染虾类细胞中具有重要研究价值，作为抗病毒感染的靶点，为制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂奠定良好基础。红螯螯虾屏障自整合因子在制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂中应用。

【技术实现步骤摘要】
促进WSSV感染的基因Cq-BAF及制备方法与应用
本专利技术涉及对虾白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus，WSSV)，尤其是涉及一种促进WSSV感染的基因Cq-BAF及制备方法与应用。
技术介绍
WSSV是对虾的主要病毒性病原，还能够感染螯虾、蟹和龙虾等，WSSV已成为水产甲壳动物养殖的主要障碍，对水产甲壳动物养殖业的经济造成极大的危害，迄今为止，依然缺乏有效的药物治疗或预防。屏障自整合因子(Barriertoautointegrationfactor,BAF)是一种重要的高度保守的蛋白，具有多种功能，与保持细胞基因组的完整性有关。BAF首先被发现能够防止莫洛尼氏鼠白血病病毒(MoMLV)的自动整合，因此被命名为屏障自整合因子[1]。BAF能与双链DNA以非特异性的方式结合，并且同源二聚化成交联桥DNA，形成更高阶的核蛋白复合物[2,3]。BAF还与许多细胞蛋白相互作用，包括驻留在核膜中的LAP2/emerin/MAN1(LEM)蛋白、组蛋白、核纤层蛋白、转录因子和DNA损伤应答蛋白(DDR)等[4-8]。除此之外，BAF还被认为是一种系膜蛋白，核膜(NE)被重新组装时，在有丝分裂后期阶段将染色质DNA和LEM蛋白结合在一起[9,10]。在与病毒相关的研究中，BAF首先被确定为与莫洛尼鼠白血病病毒前整合复合物(PIC)相关的细胞因子，并且能通过阻断PICs中“自杀”性的自整合来促进病毒基因组整合到宿主染色体中[1]。BAF也能作为Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染的表观遗传调节剂起作用，通过招募组蛋白甲基转移酶SETD1A到病毒启动子处来增强HSV-1自身的转录复制[7]，此外，在表达不可磷酸化的BAF突变体的细胞中，HSV-1DNA复制和病毒蛋白表达能力均降低[11]。参考文献：1.LeeMS,CraigieR.APreviouslyUnidentifiedHostProteinProtectsRetroviralDNAfromAutointegration.ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica.199895:1528.2.BradleyCM,RonningDR,GhirlandoR,CraigieR,DydaF.StructuralbasisforDNAbridgingbybarrier-to-autointegrationfactor.Naturestructural&molecularbiology.200512:935-6.3.SkokoD,LiM,HuangY,MizuuchiM,CaiM,BradleyCM,etal.Barrier-to-autointegrationfactor(BAF)condensesDNAbylooping.ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica.2009106:16610-5.4.BrachnerA,BraunJ,GhodgaonkarM,CastorD,ZlopasaL,EhrlichV,etal.TheendonucleaseAnkle1requiresitsLEMandGIY-YIGmotifsforDNAcleavageinvivo.Journalofcellscience.2012125:1048-57.5.MontesdeOcaR,AndreassenPR,WilsonKL.Barrier-to-AutointegrationFactorinfluencesspecifichistonemodifications.Nucleus.20112:580-90.6.MontesdeOcaR,LeeKK,WilsonKL.Bindingofbarriertoautointegrationfactor(BAF)tohistoneH3andselectedlinkerhistonesincludingH1.1.TheJournalofbiologicalchemistry.2005280:42252-62.7.OhHS,TraktmanP,KnipeDM.Barrier-to-AutointegrationFactor1(BAF/BANF1)PromotesAssociationoftheSETD1AHistoneMethyltransferasewithHerpesSimplexVirusImmediate-EarlyGenePromoters.mBio.20156:e00345-15.8.WangX,XuS,RivoltaC,LiLY,PengGH,SwainPK,etal.Barriertoautointegrationfactorinteractswiththecone-rodhomeoboxandrepressesitstransactivationfunction.TheJournalofbiologicalchemistry.2002277:43288-300.9.FurukawaK,SugiyamaS,OsoudaS,GotoH,InagakiM,HorigomeT,etal.Barrier-to-autointegrationfactorplayscrucialrolesincellcycleprogressionandnuclearorganizationinDrosophila.Journalofcellscience.2003116:3811.10.Segura-TottenM,WilsonKL.BAF:rolesinchromatin,nuclearstructureandretrovirusintegration.Trendsincellbiology.200414:261-6.11.JaminA,ThunuguntlaP,WicklundA,JonesC,WiebeMS.BarriertoAutointegrationFactorBecomesDephosphorylatedduringHSV-1InfectionandCanActasaHostDefensebyImpairingViralDNAReplicationandGeneExpression.PLoSOne.20149:e100511.
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供红螯螯虾屏障自整合因子的基因序列。本专利技术的第二目的在于提供红螯螯虾屏障自整合因子的氨基酸序列。本专利技术的第三目的在于提供红螯螯虾屏障自整合因子的制备方法。本专利技术的第四目的在于提供红螯螯虾屏障自整合因子的应用。所述红螯螯虾屏障自整合因子命名为Cq-BAF。所述Cq-BAF的基因序列为：所述Cq-BAF的氨基酸序列为：所述Cq-BAF的制备方法包括以下步骤：1)构建Cq-BAF重组表达载体；2)将步骤1)所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即rCq-BAF。在步骤1)中，所述表达载体可选用p本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.Cq‑BAF的基因序列为：

【技术特征摘要】
1.Cq-BAF的基因序列为：2.Cq-BAF的氨基酸序列为：3.Cq-BAF的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)构建Cq-BAF重组表达载体；2)将步骤1)所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即rCq-BAF。4.如权利要求3所述Cq-BAF的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述表达载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海鹏，刘灵珂，张秋霞，王克坚，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35