一种应用超高压装置提取落叶松中二氢槲皮素提取物的制备方法制造方法及图纸

本发明专利技术提供一种从落叶松木屑以乙醇为溶剂，利用超高压设备提取二氢槲皮素的制备方法，本技术所用溶剂量小，能耗低，时间短，解决了现有技术的溶剂提取过程生产周期长、生产效率低、工艺路线复杂操作难度大的技术问题；简言之，选取原料中二氢槲皮素含量为2%‑4.5%落叶松树根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；加入水浸泡，使木屑含水量在40‑50%，加入60%‑95% 酒精，于超高压舱中，加压400‑600 兆帕，保持压力时间10分钟，然后卸压，得酒精溶液，回收酒精，保持50‑60℃条件下，去除杂质，再行浓缩，加适量酒精，室温放置3天，得二氢槲皮素粗结晶，室温条件下条件下，再行重结晶，得二氢槲皮素提取物，纯度92%以上。

【技术实现步骤摘要】
一种应用超高压装置提取落叶松中二氢槲皮素提取物的制备方法
本专利技术涉及一种超高压提取落叶松二氢槲皮素提取物的制备方法，该提取物以二氢槲皮素为主要成分并含有少量其他成分，该项技术属于天然产物分离与纯化技术。
技术介绍
花旗松素独有的五羟基结构使其具有众多的生物学活性，如抗病毒、抗氧化、抗炎、抑制恶性肿瘤细胞生长、调节酶活性等，因此被广泛应用于食品、药品、化妆品、工业、农业等多个领域。二氢槲皮素是自然界中广泛存在的一种二氢黄酮醇类的化合物,目前被发现分布在50多种植物中,其中尤以落叶松中储量丰富，容易形成规模化生产。落叶松是我国东北地区主要三大针叶用材树种之一，中国东北地区天然分布和人工栽培的落叶松种类长白山落叶松、日本落叶松、兴安落叶松和朝鲜落叶松。专利”一种利用超高压设备提取植物中有效成分的方法”（ZL201510231951.4）指出，将粉状植物原材料装入容器中，加入水或5%-60%酒精浸泡，料液比为1:1-1:3，充分搅拌，浸泡4-8小时，使植物细胞充分吸水膨胀；将经过充分浸泡膨胀的植物原料装入塑料袋或塑料瓶中，排除袋或瓶中的空气，封严；将塑料袋或瓶放入超高压舱中，加压50-600兆帕，保持压力时间3-10分钟；卸压。本专利技术采用落叶松与酒精比例为1:2-1:3，但用60-95%酒精浸泡，效果明显优于5%-60%酒精浸泡，二氢槲皮素出率更高，也更优于水煮、醇沉，醚萃取技术（ZL201310302501.0），不仅收率高，而且省略醚萃取过程，解决产品溶剂残留，并且对环境无污染。本专利技术采用超高技术，所用容剂量小，能耗非常低，时间非常短，不同于以往的水提醇沉或醇提水沉，需要处理大量溶剂，如，落叶松木粉中二氢槲皮素的预处理乙醇提取方法（CN104841156A），料液比1：8～1：35，乙醇回流提取至少重复进行2次，本专利技术采用落叶松与酒精比例为1:2-1:3，最多重复2次。据俄罗斯文献报道[1]，兴安落叶松（Larix.gmelini）提取物中，除了含有二氢槲皮素外，还含有香橙素、圣草酚、槲皮素、柚皮素、山奈酚、松属素等黄酮类物质。据专利“长白落叶松提取物的制备方法及医药用途”（ZL201310302501.0）报告，长白落叶松中以二氢槲皮素为主，其他包括：香橙素、圣草酚、槲皮素和山奈酚。本专利技术在朝鲜落叶松中又发现2种新的成分，经质谱、1HNMR、13CNMR分别鉴定为3,5,7-三羟基色原酮（4）和(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素。本专利技术分离得到的二氢槲皮素提取物，主要含有二氢槲皮素，其他少量成分是香橙素、槲皮素、3,5,7-三羟基色原酮（图1）和(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素（图2）。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从朝鲜落叶松木屑以乙醇为溶剂，利用超高压设备提取二氢槲皮素的制备方法，本技术所用容剂量小，能耗非常低，时间非常短，解决了现有技术的水解过程生产周期长、生产效率低、工艺路线复杂操作难度大的技术问题；本专利技术目的的实现是通过以下步骤实现：1）选落叶松树根，原材料中二氢槲皮素含量为2%-4.5%；2）原材料前处理：将侧根与主根分割归类，用清水洗净泥沙后风干；去除树皮及毛根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；3）将上述木屑材料装入容器中，加入水浸泡，料液比为1:5～1:10，充分搅拌，浸泡4-8小时，使木屑粉充分吸水膨胀，然后滤出水分，湿润木屑；4）将经过充分浸泡膨胀的木屑原料装入塑料袋，加入60%-95%酒精，料液比为1:1-1:3，排除袋中的空气，封严，将塑料袋放入超高压舱中，加压400-600兆帕，保持压力时间10分钟，然后卸压，取出袋中的酒精溶液；5）取出已经破壁的落叶松木屑倒入容器中，加入60%-95%酒精，料液比为1:1-1:3，浸泡过夜后，取出容器中的酒精溶液，与4）处理得到的酒精溶液合并；6）将步骤5）得到的酒精提取液，真空减压回收，浓缩到一定体积，保持50-60℃条件下，去除杂质，然后溶液浓缩至1.02-1.08，加95%酒精1/5体积，室温放置3天，得二氢槲皮素粗结晶；7）将6）得到的粗结晶物与纯化水（结晶物与纯化水之比为1:3.5—4.5）混合倒入加热罐中搅拌2h，温度为95℃，罐中液体入转移容器中，室温条件下条件下静止72小时，得二氢槲皮素提取物，纯度92%以上。本专利技术揭示落叶松二氢槲皮素提取物中，除含有已经报道的成分之外，又分离得到2个新成分，经质谱与核磁共振鉴定为，3,5,7-三羟基色原酮和(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素。本专利技术的积极效果在于，通过超高压设备提取二氢槲皮素的制备方法，所用容剂量小，能耗非常低，时间非常短，解决了现有技术的水解过程生产周期长、生产效率低、工艺路线复杂操作难度大的技术问题。本专利技术的积极效果还在于，通过超高压设备提取二氢槲皮素的制备方法得到的(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素具有较强的抗氧化、抗衰老、降血糖、抗炎的生物活性。附图1.3,5,7-三羟基色原酮结构式附图2.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素结构式附图3.3,5,7-三羟基色原酮1H-NMR；附图4.3,5,7-三羟基色原酮13C-NMR；附图5.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素1H-NMR；附图6.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素13C-NMR；附图7.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素CD谱;附图8.3,5,7-三羟基色原酮ESI-MS;附图9.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素ESI-MS.附图10.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素对RAW264.7细胞活性的影响附图11.(2R,3R)-3'-O-甲基花旗松素对LPS诱导小鼠细胞NO的生成情况具体实施例下面通过具体的实施例进一步描述本专利技术，但并非是限制本专利技术的范围。实施例1将朝鲜落叶松侧根与主根分割归类，用清水洗净泥沙后风干；去除树皮及毛根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；上述木屑材料装入容器中，加水室温浸泡，料液比为1:5，充分搅拌，浸泡4-8小时，使木屑粉充分吸水膨胀，然后滤出水分，使木屑含水量保持在40%；将上述处理的木屑3kg原料装入塑料袋，加入95%酒精，料液比为1:3，排除袋中的空气，封严，将塑料袋放入超高压舱中，加压400-600兆帕，保持压力时间10分钟，然后卸压，取出袋中的酒精溶液，再取出已经破壁的落叶松木屑倒入容器中，加入60%-95%酒精，料液比为1:3，搅拌浸泡过夜后，取出容器中的酒精溶液，与处理得到的酒精溶液合并，真空减压回收酒精至无醇味，并浓缩到一定体积，保持50-60℃条件下，去除杂质，然后溶液浓缩至比重1.02-1.08，加95%酒精1/5体积，室温放置3天，得二氢槲皮素粗结晶；得到的粗结晶物与纯化水（结晶物与纯化水之比为1:3.5—4.5）混合倒入加热罐中搅拌2h，温度为95℃，罐中液体入转移容器中，室温条件下条件下静止72小时，得二氢槲皮素提取物，纯度92%，50g，扣除原材料含水率，木屑粉为1.2公斤，收率为4.1%。实施例2将朝鲜落叶松侧根与主根分割归类，用清水洗净泥沙后风干；去除树皮及毛根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；上述木屑材料装入容器中，加水室温浸泡，料液比为1:5，充分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种朝鲜落叶松提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）选落叶松树根，原材料中二氢槲皮素含量为2%‑4.5%；2）原材料前处理：将侧根与主根分割归类，用清水洗净泥沙后风干；去除树皮及毛根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；3）将上述木屑材料装入容器中，加入水浸泡，料液比为1:5 ～ 1:10，充分搅拌，浸泡4‑8 小时，使木屑粉充分吸水膨胀，然后滤出水分，湿润木屑备用；4）将经过充分浸泡膨胀的木屑原料装入塑料袋，加入60%‑95% 酒精，料液比为1:3，，排除袋中的空气，封严，将塑料袋放入超高压舱中，加压400‑600 兆帕，保持压力时间10分钟，然后卸压，取出袋中的酒精溶液，备用；5）从超高压舱内取出塑料袋，将已经破壁的落叶松木屑倒入容器中，加入60%‑95% 酒精，料液比为1:1‑1:3，浸泡过夜后，取出容器中的酒精溶液，与4）处理得到的酒精溶液合并，备用；6）将步骤5）得到的酒精提取液，真空减压回收，浓缩到一定体积，保持50‑60℃条件下，去除杂质，然后溶液浓缩至1.02‑1.08，加95%酒精1/5体积，室温放置3天，得二氢槲皮素粗结晶；7）将6）得到的粗结晶物与纯化水（结晶物与纯化水之比为1:3.5—4.5）混合倒入加热罐中搅拌2.5h，温度为95℃，罐中液体入转移容器中，室温条件下条件下静止72小时，得二氢槲皮素提取物，纯度92%以上，经过二次重结晶后二氢槲皮素的纯度达到97%以上。...

【技术特征摘要】
1.一种朝鲜落叶松提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）选落叶松树根，原材料中二氢槲皮素含量为2%-4.5%；2）原材料前处理：将侧根与主根分割归类，用清水洗净泥沙后风干；去除树皮及毛根，切成片后粉碎成木屑（0.4×0.4×8mm）；3）将上述木屑材料装入容器中，加入水浸泡，料液比为1:5～1:10，充分搅拌，浸泡4-8小时，使木屑粉充分吸水膨胀，然后滤出水分，湿润木屑备用；4）将经过充分浸泡膨胀的木屑原料装入塑料袋，加入60%-95%酒精，料液比为1:3，，排除袋中的空气，封严，将塑料袋放入超高压舱中，加压400-600兆帕，保持压力时间10分钟，然后卸压，取出袋中的酒精溶液，备用；5）从超高压舱内取出塑料袋，将已经破壁的落叶松木屑倒入容器中，加入60%-95%酒精，料液比为1:1-1:3，浸泡过夜后，取出容器中的酒精溶液，与4）处理得到的酒精溶液合并，备用；6）将步骤5）得到的酒精提取液，真空减压回收，浓缩到一定体积，保持50-...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁传波，向兰，高飞飞，赵婷，蒋白楠，郑毅男，刘文丛，曾露露，杨烁，
申请(专利权)人：郑毅男，
类型：发明
国别省市：吉林,22