The invention belongs to the field of biological detection technology, and discloses a test strip for detecting PLA2R antibodies and a detection method thereof. The test paper for the PLA2R antibody of the present invention, including a sample pad in turn on a sticky floor, combined with a pad 1, combined with a pad 2, a NC film and a water absorbent paper, is sprayed with a PLA2R biotinylated coupling, and the binding pad 2 is sprayed with a SA fluorescent microsphere coupling and a DNP BSA fluorescent microsphere coupling. The NC film is wrapped up on the NC film package. A captured body is used as the detection line, and the NC membrane is also coated with an anti DNP BSA antibody as the quality control line. This invention adopts the capture method to detect the color of the test paper of PLA2R antibody faster. From the addition to the reading result, the test time is 7min, the test time is shorter, the color signal of the test paper is stronger, the weak Yang is not easy to leak, the specificity is better, and the content of PLA2R antibody in human serum, plasma and whole blood can be measured, accurately and conveniently.
【技术实现步骤摘要】
一种PLA2R抗体的检测试纸条及检测方法
本专利技术属于生物检测
,具体涉及一种PLA2R抗体的检测试纸条及检测方法。
技术介绍
膜性肾病(MN)是成人肾病综合征最常见的病理类型之一,其特征性的病理学改变是肾小球毛细血管袢上皮侧可见大量免疫复合物沉积。MN按发病原因可分为特发性膜性肾病(IMN)和继发性膜性肾病(SMN)两大类。IMN是一种肾小球慢性炎症性疾病,大多与抗磷脂酶A2受体抗体相关,抗磷脂酶A2受体抗体与足细胞上的相应抗原结合,形成原位免疫复合物,继而通过旁路途径激活补体,形成C5b-9膜攻击复合物,损伤足细胞,破坏肾小球滤过屏障,其典型特征是蛋白尿,随着尿蛋白含量的增加,有肾衰竭的发展趋势。而SMN与IMN不同,是继发性疾病或并发性疾病,药物治疗、滥用毒品、感染性疾病、其他的自身免疫疾病和肿瘤都可能导致SMN的发生。如系统性红斑狼疮,类风湿性关节炎,乙肝病毒感染,以及药物、毒物、肿瘤或环境因素等。引起继发性膜性肾病的药物主要有一些金制剂、汞、青霉胺、布洛芬、双氯芬酸等。同时,SMN可以随着根本疾病的治疗而好转。IMN和SMN的诊断主要依靠临床表现和肾脏穿刺。肾脏穿刺即肾活检,也称肾穿刺活检术。是一种侵入式的创伤诊断方法,对病人有一定的伤害,而根据临床表现的诊断需要一定的经验,并且也需要组织病理学的验证。近年来的研究和文献报道,IMN是一种自身免疫性疾病,已经发现的自身免疫抗原磷脂酶A2受体(PLA2R)是其主要靶抗原,对IMN的诊断阳性率可达70%-82%,且在其他疾病和正常人血清样本中未检测出该抗体。血清学PLA2R抗体定量检测可以为特 ...
【技术保护点】
1.一种PLA2R抗体的检测试纸条,包括在粘性底板上依次搭接样品垫,结合垫1,结合垫2、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫1上喷涂有PLA2R生物素化偶联物,所述结合垫2喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP‑BSA荧光微球偶联物,所述硝酸纤维素膜上包被有捕获体作为检测线,所述硝酸纤维素膜上还包被有抗DNP‑BSA抗体作为质控线。
【技术特征摘要】
1.一种PLA2R抗体的检测试纸条,包括在粘性底板上依次搭接样品垫,结合垫1,结合垫2、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫1上喷涂有PLA2R生物素化偶联物,所述结合垫2喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物,所述硝酸纤维素膜上包被有捕获体作为检测线,所述硝酸纤维素膜上还包被有抗DNP-BSA抗体作为质控线。2.根据权利要求1所述的检测试纸条,所述PLA2R生物素化偶联物中PLA2R为PLA2R分子全长或部分片段的蛋白,或能起到PLA2R蛋白类似作用的变异体、类似物、替代物。3.根据权利要求1或2所述的检测试纸条,所述荧光微球的粒径为200nm。4.根据权利要求1-3任意一项所述的检测试纸条,所述捕获体为抗人IgG抗体或能与人IgG抗体结合的物质。5.权利要求1-4任意一项所述的检测试纸条的制备方法,包括以下步骤:A、将PLA2R蛋白生物素化获得PLA2R生物素化偶联物,喷涂在结合垫1上;B、分别将预处理的亲和素和DNP-BSA与活化的荧光微球偶联,获得亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物喷涂在结合垫2上;C、将捕获体包被到硝酸纤维素膜上作为检测线,将抗DNP-BSA抗体包被到硝酸纤维素膜上作为质控线;D、在粘性底板上依次搭接样本垫、喷涂有PLA2R生物素化偶联物的结合垫1、喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物的结合垫2、包被捕获体和抗DNP-BSA抗体的硝酸纤维素膜、吸水纸。6.根据权利要求5所述的制备方法,所述步骤B所述偶联为将活化的荧光微球离心去上清后,用pH7.0~8.050mMMES缓冲液洗涤后,按每100μl微球加入0.1mg~0.2mg亲和素或0.2~0.4mgDNP-...
【专利技术属性】
技术研发人员:熊祖应,张永顶,马伟民,张大准,王洪涛,
申请(专利权)人:深圳市伯劳特生物制品有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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