保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管制造技术

本发明专利技术公开了一种具有保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体功能的采血管，包括试管，在试管开口处设置有密封胶塞和塑料外帽，试管内预充有由酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶配制而成的保护剂。由于在采血管中预充有保护剂，大大延长了ProGRP样本的保存时间（样品在2‑8℃能够稳定保存7天），一方面方便临床的操作应用，当怀疑个别样本检测结果异常时还可以进行复测，降低了检测结果假阴性的概率，提高了该项目检测结果的准确性和临床应用价值。

Protecting and stabilizing the blood vessels of precursor of gastrin releasing peptide in serum or plasma

The invention discloses a blood vessel for protecting and stabilizing the function of gastrin releasing peptide precursor in serum or plasma, including a test tube, a sealant plug and a plastic outer cap at the opening of the test tube, and a protective agent prepared by casein, sodium alkyl sulfate and aprotinin in the test tube. As a protective agent is prefilled in the blood vessel, the preservation time of ProGRP samples is greatly extended (the sample can be kept stable for 7 days at 2 8 degrees C). On the one hand, it is convenient for clinical operation. When the results of individual samples are suspected to be abnormal, the probability of false negative detection can be reduced and the project is improved. The accuracy of the test results and the clinical application value.

【技术实现步骤摘要】
保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管
本专利技术涉及医学检验领域，尤其是涉及一种保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管。
技术介绍
近年来，肺癌已成为我国恶性肿瘤死因的第一杀手。肺癌分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC）。其中，非小细胞肺癌约占85%，5年生存率为15%，小细胞肺癌虽只占约15%，但2年生存率仅为1%。70%的肺癌患者在确诊时已是局部晚期或者转移，失去了最佳手术机会。如果肺癌能够在早期被诊断出来，那么5年的生存率可提高到60%以上。肿瘤标志物与传统的CT、核磁共振等影像学检查手段相比，不仅具有方便、快捷、成本低等优势，更重要的是能够有助于癌症的早期诊断与发现，且通过肿瘤标志物的动态监测，可辅助用于判断疾病的进程、治疗效果和复发。胃泌素释放肽前体（ProGRP）是一种新型的用于肺癌早期诊断的肿瘤标志物。特别针对于小细胞型肺癌，ProGRP较之前的神经元特异性烯醇化酶（NSE）更有优势。ProGRP和NSE检测SCLC的敏感性分别为73%和60%，特异性分别为98%和92%，相比较NSE诊断早期SCLC的敏感性仅36.84%，而ProGRP诊断早期SCLC的敏感性为63.16%。此外，ProGRP较NSE有一个更大的优势，就是样本检验结果不受溶血的影响。目前，市面上的ProGRP检测试剂盒在检测ProGRP时都面临着样本不稳定的问题。雅培公司的ProGRP试剂盒说明书规定：血清样本在2-8℃只能保存3h，血浆样本在2-8℃只能保存24h。康乃格公司的ProGRP试剂盒说明书规定：血清样本在2-8℃只能保存24h。这主要是由于血清中的蛋白酶会将ProGRP裂解造成的。ProGRP样本的快速降解，一方面会造成检测结果的假阴性，另一方面无法进行后续实验，如个别样本检测结果异常时的复测，这给该项目的临床应用带来了极大的不便。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供了一种保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体（ProGRP）的采血管；该采血管可以抑制ProGRP的降解速率，延长ProGRP样本的保存时间。为实现上述目的，本专利技术可采取下述技术方案：本专利技术所述的保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，包括试管，在所述试管开口处设置有密封胶塞和塑料外帽，所述试管内预充有由酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶配制而成的保护剂。所述保护剂中酪蛋白的含量为1~5%，十二烷基硫酸钠的含量为1~5%，抑肽酶的含量为0.1~1mg/L。配制完成的保护剂中酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶的成分比为5:10:1时效果最佳。实际生产时，所述试管的材质为聚对苯二甲醇酸酯，所述密封胶塞的材质为丁基橡胶。所述试管的真空负压为5ml或10ml。本专利技术使用时，按常规方法采集血液，并将其上下颠倒混合均匀，然后按照常规的操作方法进行血清或血浆的离心处理后，于2~8℃保存。本专利技术的优点在于：由于在采血管中预充有保护剂，大大延长了ProGRP样本的保存时间，一方面方便临床的操作应用，当怀疑个别样本检测结果异常时还可以进行复测，降低了检测结果假阴性的概率，提高了该项目检测结果的准确性和临床应用价值。由于ProGRP易被样本中的蛋白酶降解，从而导致样本保存的不稳定。本专利技术采用十二烷基硫酸钠（SDS）（一种阴离子型表面活性剂）与一定浓度的SDS配合，可以破坏蛋白质中的离子键和氢键等非共价键，甚至改变蛋白质的构象，从而发挥阻断蛋白酶对ProGRP降解的作用。当溶液pH在酪蛋白等电点(4.8)以下时，分子表面带正电的酪蛋白可通过静电作用与带负电的SDS亲水基结合成酪蛋白/SDS复合物，该复合物可通过蛋白分子发生相互交联作用，从而阻断蛋白酶对ProGRP的降解。附图说明图1是本专利技术采血管的结构示意图。具体实施方式如图1所示，本专利技术所述的保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，包括试管1，在试管1开口处设置有密封胶塞2和塑料外帽3，为延长血清或血浆样本的保存时间，本专利技术的试管1内预充有由酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶配制而成的保护剂4。本专利技术保护剂中酪蛋白的含量为1~5%（w/v），十二烷基硫酸钠的含量为1~5%（w/v），抑肽酶的含量为0.1~1mg/L；实际配制时，保护剂4中酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶的成分比为5:10:1时效果最佳。本专利技术的试管1可采用有疏水性质的聚对苯二甲醇酸酯材质制成，密封胶塞可采用丁基橡胶制成。本专利技术试管的真空负压可设计为5ml或10ml，以满足其检测要求。实施例1本专利技术采血管的制作方法第一步，按比例调配保护剂4的成分（以1L计）：量取纯化水1000mL，依次加入NaH2PO4·2H2O0.59g、Na2HPO4·12H2O5.8g、NaCl9g、酪蛋白10g、十二烷基硫酸钠20g、抑肽酶2g、ProClin3001mL，搅拌直至混合溶液澄清透明。然后使用真空冷冻干燥机进行冻干处理得到冻干饼，再使用匀质机处理冻干饼得到均匀的粉状物，即为保护剂4。第二步，清洗试管1内壁，在超净台无菌工作环境下将调配好的保护剂4注入试管1底部，加入量为采血管血量的1~5%（w/v）；第三步，按照采血管的计量进行抽真空处理，然后将密封胶塞2和塑料外帽3组装好，成品采血管结构如图1所示。实施例2样本保存时间对比使用本专利技术的采血管和常规的普通管采血管同时进行血样处理，共考核10例样本。抽血后均上下颠倒10次，置于37℃温箱放置30min，取出后在4000转/min的转速下离心10min；离心后置于2~8℃保存。分别在0h、3h、1天、3天、5天、7天、14天的时间点，使用市售的某公司胃泌素释放肽前体检测试剂盒对样本进行检测，考核两种采血管在2~8℃保存条件下的样本稳定性，结果见表1和表2。表12~8℃条件下本专利技术采血管样本保存时间表22~8℃条件下常规普通管采血管样本保存时间由表1和表2的实验数据可以看出，使用本专利技术所述的具有保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，ProGRP样本可以在2~8℃稳定保存7天，降幅小于10%。而使用常规的普通管采血管，ProGRP样本在2~8℃保存1天后，降幅已达到20%，并且随着时间的延长降幅越来越大。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，包括试管，在所述试管开口处设置有密封胶塞和塑料外帽，其特征在于：所述试管内预充有由酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶配制而成的保护剂。

【技术特征摘要】
1.一种保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，包括试管，在所述试管开口处设置有密封胶塞和塑料外帽，其特征在于：所述试管内预充有由酪蛋白、十二烷基硫酸钠和抑肽酶配制而成的保护剂。2.根据权利要求1所述的保护和稳定血清或血浆中胃泌素释放肽前体的采血管，其特征在于：所述保护剂中酪蛋白的含量为1~5%，十二烷基硫酸钠的含量为1~5%，抑肽酶的含量为0.1~1mg/L。3.根据权利要求1或2所述的保...

【专利技术属性】
技术研发人员：渠文涛，史小芹，陈小玲，项立红，刘功成，渠海，冉盼盼，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41