负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体，包括沸石咪唑类骨架、包埋于沸石咪唑类骨架中的表没食子儿茶素没食子酸酯，以及通过酰胺键修饰在沸石咪唑类骨架上的叶酸‑聚乙二醇。本发明专利技术还涉及负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体的制备方法和应用。该叶酸靶向载体提高了表没食子儿茶素没食子酸酯的抗氧化效果，既解决了茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯利用率低的问题，又减少了治疗癌症的毒副作用，并且使药物的治疗具有靶向性。

Folate targeted carrier loaded with epigallocatechin gallate and preparation method and application thereof

The present invention relates to a folic acid targeting carrier containing the epigallocatechin gallate, including the zeolite imidazole skeleton, epigallocatechin gallate embedded in the zeolite imidazole skeleton, and the modified polyethylene glycol with the amide bond on the zeolite imidazole skeleton. The invention also relates to the preparation method and application of a folate targeted carrier loaded with epigallocatechin gallate. The folic acid targeted carrier improves the antioxidant effect of epigallocatechin gallate, which not only solves the problem of low utilization rate of the tea polyphenigallocatechin gallate, but also reduces the side effects of the treatment of cancer, and makes the drug therapy targeted.

【技术实现步骤摘要】
负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体及其制备方法和应用
本专利技术涉及靶向载体，具体涉及一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体及其制备方法和应用。
技术介绍
癌症在全球范围内的危害不断加剧，已成为威胁人类身体健康的头号“杀手”。不论年龄、性别、社会地位等，癌症都直接或者间接地影响着人类的生活，它已经不只是个人的健康问题，同时还是家庭、社会一直密切关注的社会性问题。因此针对癌细胞的研究一直是近来科学研究中的热点。癌细胞的一些本质特征如不受控制的繁殖、较高的活性氧水平，较强的环境适应能力已经陆续被发现。在癌症的研究中，针对癌细胞的特征来治疗癌症陆续成为研究中的方向。茶叶中含有大量的多元酚类化合物，这些化合物统称为茶多酚(teapolyphenol，TP)，约占茶叶干重的18-36％。通过对茶多酚的化学成分研究表明，茶多酚的主要成分是儿茶素类化合物，约占茶多酚总量的70％～80％，主要含有儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子酸儿茶素(EGC)及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)等多种活性物质，其中以EGCG含量最高，约占儿茶素总量的50％～60％。目前大量的研究表明EGCG具有抗癌、抗突变、预防和治疗心脑血管系统疾病以及调理内分泌、免疫系统等生物活性，同时对机体内生物代谢酶也具有抑制活性，由此将对机体的肝解毒功能及药物的联合应用产生重要影响。抗氧化作用一直是茶多酚类物质所具有的重要功能，并作为食品添加剂在广泛使用。除此之外，茶多酚中的主要成分还可以消除体内自由基、延缓机体衰老。金属有机骨架(Metal-organicFrameworks,MOFs)又称多孔配位聚合物，具有比较好的稳定性，较高的比表面积，是近年来研究比较为广泛的多孔材料。金属有机骨架材料一般由特定的金属离子或金属簇与相应的有机配体通过强的配位键连接而成并具有一定的周期性网络结构。金属有机骨架同时包含无机金属和有机分子，因而具备无机材料和有机材料的双重特点。ZIF系列金属有机骨架材料是由金属和有机配体咪唑及其衍生物生成的具有拓扑结构的固体多孔材料。ZIF-8是由硝酸锌和2-甲基咪唑在室温下醇溶液或者水溶液中，快速生成的具有高纯度的晶体。其高温下具有比较好的稳定性，晶体尺寸均一，具有较大的比表面积。此外合成ZIF-8晶体过程中，可加入表面活性剂进行调控，进而得到不同形态、不同尺寸的晶体。目前ZIF-8受到了国内外学者广泛的关注，己有大量的实验和研究正在开发其应用。第一，ZIF-8直径10～500nm，能够通过细胞膜的内吞作用进入细胞，因结构稳定，能够通过人体代谢排除，故无细胞毒性；第二，ZIF-8具有巨大的比表面积(>600m2·g-1)和孔体积(>1cm3·g-1)，从而具有较大载药量，特殊的孔道结构又使其具有药物缓释功能；第三，近年来药物载体的表面修饰及功能化取得了突破性进展，利用功能化的高分子、蛋白质等作为“守门员(Gatekeepers)”来实现药物的控制释放。叶酸作为用于递送药物的靶向配体已被广泛研究，其可被癌细胞表面上过表达的叶酸受体选择性识别并刺激受体介导的胞吞作用，从而增加肿瘤对药物的摄取，同时减少全身性毒性。因此，叶酸-聚乙二醇被认为是改善药物递送系统以实现满意的肿瘤靶向治疗的有前景的稳定剂之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体，提高了表没食子儿茶素没食子酸酯的抗氧化效果，既解决了茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯利用率低的问题，又减少了治疗癌症的毒副作用，并且使药物的治疗具有靶向性。本专利技术所提供的技术方案为：一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体，包括沸石咪唑类骨架、包埋于沸石咪唑类骨架中的表没食子儿茶素没食子酸酯，以及通过酰胺键修饰在沸石咪唑类骨架上的叶酸-聚乙二醇。本专利技术中通过原位包埋法将表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)封装在沸石咪唑类骨架内，再通过叶酸-聚乙二醇上的羟基与表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架上的氨基形成酰胺键，将叶酸-聚乙二醇修饰在沸石咪唑类骨架的表面。表没食子儿茶素没食子酸酯为茶多酚中的有效成分，它具有强氧化性质能降低细胞中的活性氧水平。沸石咪唑类骨架对于表没食子儿茶素没食子酸酯具有保护作用，能够减缓表没食子儿茶素没食子酸酯在空气中的氧化速度，从而延长了保持表没食子儿茶素没食子酸酯高纯度的时间；其次，叶酸分子修饰在沸石咪唑骨架载体的表面，从而使其具有针对癌细胞的靶向性，能够使其到达肿瘤细胞部位，释放表没食子儿茶素没食子酸酯来降低癌细胞的活性氧水平，既能靶向针对癌细胞，又能保护正常细胞的生长。本专利技术还提供一种如上述的负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体的制备方法，包括如下步骤：1)通过原位包埋法将表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)封装在沸石咪唑类骨架(ZIF-8)中，得到表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体EGCG@ZIF-8；2)表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体(EGCG@ZIF-8)与叶酸-聚乙二醇(FA-PEG)通过酰胺化反应，得到负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体(FA-PEG/EGCG@ZIF-8)。本专利技术的制备方法合成方法简单，该载体中表没食子儿茶素没食子酸酯的负载量高达50％，提高了药物的利用率和药效。作为优选，所述步骤1)中原位包埋法包括：硝酸锌与表没食子儿茶素没食子酸酯反应形成配位化合物；配位化合物与2-甲基咪唑反应得到表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体。作为优选，所述步骤1)中原位包埋法包括：硝酸锌与表没食子儿茶素没食子酸酯分别配制成甲醇溶液，室温下混合后得到配位化合物体系；进一步优选，所述混合是指搅拌1-5min；所述表没食子儿茶素没食子酸酯、六水硝酸锌和无水甲醇的质量比为1-10：1-100：100；配位化合物体系中加入2-甲基咪唑的甲醇溶液室温下混合，离心清洗干燥后，得到表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体。进一步优选，所述混合是指搅拌15-20min；所述2-甲基咪唑与无水甲醇的投料比为2-5g:10ml。作为优选，所述步骤1)中表没食子儿茶素没食子酸酯、硝酸锌与2-甲基咪唑的质量比为1:5-20:50-200。作为优选，所述步骤2)中酰胺化反应包括：将叶酸-聚乙二醇溶解于水中，加入表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体室温下搅拌，离心清洗干燥后，得到负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体。进一步优选，叶酸-聚乙二醇与去离子水的投料比为8-10g:5ml。作为优选，所述搅拌时间为36-60h。作为优选，所述叶酸-聚乙二醇与表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体的质量比为2:2-3。进一步优选为1:1。本专利技术还提供一种如上述的负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体在制备抑制肿瘤细胞增殖药物中的应用。同现有技术相比，本专利技术的有益效果体现在：(1)本专利技术中沸石咪唑类骨架对于表没食子儿茶素没食子酸酯具有保护作用，能够减缓表没食子儿茶素没食子酸酯在空气中的氧化速度，从而延长了保持表没食子儿茶素没食子酸酯高纯度的时间，为提高表没食子儿茶素没食子酸酯的抗氧本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体，其特征在于，包括沸石咪唑类骨架、包埋于沸石咪唑类骨架中的表没食子儿茶素没食子酸酯，以及通过酰胺键修饰在沸石咪唑类骨架上的叶酸‑聚乙二醇。

【技术特征摘要】
1.一种负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体，其特征在于，包括沸石咪唑类骨架、包埋于沸石咪唑类骨架中的表没食子儿茶素没食子酸酯，以及通过酰胺键修饰在沸石咪唑类骨架上的叶酸-聚乙二醇。2.一种如权利要求1所述的负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)通过原位包埋法将表没食子儿茶素没食子酸酯封装在沸石咪唑类骨架中，得到表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体；2)表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体与叶酸-聚乙二醇通过酰胺化反应，得到负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体。3.根据权利要求2所述的负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中原位包埋法包括：硝酸锌与表没食子儿茶素没食子酸酯反应形成配位化合物；配位化合物与2-甲基咪唑反应得到表没食子儿茶素没食子酸酯-沸石咪唑类骨架载体。4.根据权利要求2或3所述的负载表没食子儿茶素没食子酸酯的叶酸靶向载体的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中原位包埋法包括：硝酸锌与表没食子儿茶素没食子酸酯分别配制成甲醇溶液，室温下混合后得到配位化...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈雪瑞，施浙琪，吴健，雷群芳，方文军，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33