本发明专利技术涉及一种甾体化合物中DMAP的分析方法，尤其是涉及醋酸阿比特龙中DMAP的高效液相测定方法,选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙腈和烷基磺酸钠盐溶液为流动相，其中烷基磺酸钠盐溶液浓度为0.005～0.1M，流动相乙腈和烷基磺酸钠盐的体积配比为：乙腈:烷基磺酸钠溶液＝38:62～42:58，其中烷基磺酸钠选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠或癸烷磺酸钠中的一种或多种；检测波长选自270‑290nm。
A method for determination of DMAP content in acetic acid
The present invention relates to a method for the analysis of DMAP in steroid compounds, in particular to the high performance liquid phase determination of DMAP in the anecdol acetate, a chromatographic column with eighteen alkyl silane bonded silica gel and a sodium salt solution of acetonitrile and alkyl sulfonic acid as the mobile phase, in which the sodium alkylsulfonic acid sodium salt solution is 0.005 to 0.1M, The volume ratio of the sodium salt of the mobile phase acetonitrile and alkyl sulfonic acid is: acetonitrile: sodium alkyl sulfonate solution = 38:62 ~ 42:58, of which sodium alkyl sulfonate is selected from one or more of sodium heptane sulfonic acid sodium, sodium hexane sulfonic acid sodium, sodium pentane sulfonic acid sodium or decane sulfonic acid sodium, and the detection wave length is selected from 270 290nm.
【技术实现步骤摘要】
一种醋酸阿比特龙中DMAP含量的测定方法
本专利技术涉及一种甾体化合物中DMAP的分析方法，尤其是涉及醋酸阿比特龙中DMAP含量的高效液相测定方法，属于医药
技术介绍
醋酸阿比特龙的化学名为17-(3-吡啶基)雄甾-5,16-二烯-3β-醋酸酯。醋酸阿比特龙片由JANSSENBIOTECH公司开发，2011年4月首次在美国上市，2011年9月获得欧盟批准，商品名为适应症为与泼尼松联用用于治疗转移性去势抵抗性前列腺癌。在体内代谢成阿比特龙发挥作用，通过抑制甾类17α-羟化酶/C17-20(P450C17)来阻止睾酮的生成。临床研究表明醋酸阿比特龙抑制活性是酮康唑的10～30倍，可使前列腺癌患者体内的前列腺特异性抗原(PSA)水平显著下降，且有助于缩小肿瘤，使前列腺癌晚期患者的寿命延长数年。4-二甲氨基吡啶(DMAP)是合成醋酸阿比特龙用到的一种催化剂，与其他催化剂相比催化效果显著，反应速度快，条件温和，产品纯度高。但同时DMAP的N原子会形成基因毒性警示结构的氨氧化物，因此需要建立一种有效测定方法对醋酸阿比特龙中的DMAP的含量进行控制。醋酸阿比特龙和DMAP的结构结下：文献“化学研究与应用，27(2)，237-240，2015”以及“JournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysis，70，251-258(English)2012”报道了DMAP的含量测定方法。还有一些文献报道了醋酸阿比特龙的含量测定方法，按色谱柱及流动相的不同主要分为以下几类：(1)色谱柱C18，流动相：甲醇/乙腈:水，结文献现代生物医学进展，15(28)，5418-5423，2015；吴青松等，西南交通大学硕士学位论文，2015；ZL201310516430.4；ZL201410740491.3。(2)色谱柱C18，流动相：甲醇/乙腈:醋酸铵，结文献JournalofchromatograghyA，1374，122-133(English)；中国医药工业杂质，43(10)，804-806，2012；文献合成化学，21(2)，245-247，2013。(3)色谱柱C18，流动相：甲醇/乙腈:磷酸缓冲盐/磷酸，结文献Biomedicalchromatography，27，203-207(English)2013；理化检验-化学分册，50(8)，983-986，2014；ZL201210291338.8；(4)其他：色谱柱C8，流动相：乙腈:甘氨酸缓冲盐，结文献JournalofChromatograghyB，989，86-90(English)2015；色谱柱C18，流动相：乙腈:甲酸，结文献JournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysis，82，74-77(English)2013，；色谱柱C5，流动相：色含2％异丙醇的乙腈：醋酸铵，结文献JournalofChromatograghyB，843，262-267(English)2006；色谱柱C8，流动相：乙腈：醋酸铵，结WO2014064032。对上述文献方法进行一一尝试，但是发现DMAP峰型拖尾严重，信噪比低，在色谱柱的保留时间短，存在溶剂(甲醇)峰的干扰，无法准确测定醋酸阿比特龙中DMAP的含量。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供了一种全新的4-二甲氨基吡啶液相分析方法，该方法能够准确测定醋酸阿比特龙中4-二甲氨基吡啶的含量。一种醋酸阿比特龙中二甲氨基吡啶含量的高效液相测定方法：a.色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；b.以乙腈和烷基磺酸钠盐溶液为流动相，所述烷基磺酸钠盐溶液浓度为0.005～0.1M，流动相乙腈和烷基磺酸钠盐的体积配比选自：乙腈:烷基磺酸钠溶液＝38:62～42:58，所述烷基磺酸钠选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠或癸烷磺酸钠的一种或多种；c.检测波长选自270-290nm。所述的一种醋酸阿比特龙中二甲氨基吡啶含量的高效液相测定方法，其特征在于所述烷基磺酸钠盐溶液浓度为0.01M；流动相乙腈和烷基磺酸钠的体积配比为乙腈:烷基磺酸钠溶液＝40:60；检测波长为280nm。所述的一种醋酸阿比特龙中二甲氨基吡啶含量的高效液相测定方法，其特征在于所述烷基磺酸钠盐为庚烷磺酸钠。具体方法结下：照高效液相色谱法(中国药典2015年版二部附录VD)测定。测定过程：取测试样品适量，精密称定，加甲醇溶解并用甲醇稀释制成一定浓度Ca的溶液，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取测试样品的对照品适量，精密称定，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得到该样品的液相含量C％。外标法计算公式：C％＝Aa/As×Cs/Ca×100％Aa为测试样品液相主峰面积；As为测试样品的对照品液相主峰面积；Ca为测试样品浓度；Cs为测试样品的对照品浓度。本专利技术提供的分析方法，根据中国药典2015年版，目前已经做完了方法学验证，包括系统适用性试验、线性试验、回收试验以及专属性试验。经过这些验证，本专利技术提供的分析方法实用可靠，稳定性较好。本专利技术的技术方案可以改善DMAP峰形，且信噪比高，有利于催化剂DMAP的含量测定，同时使溶剂和DMAP能够有效分离，便于准确定量。由于DMAP是合成常用催化剂，可用于其它合成中使用过DMAP的化合物的检测。说明书附图附图1：专利技术实施例1测定的醋酸阿比特龙样品中DMAP的HPLC图谱附图2：对照实施例11测定的醋酸阿比特龙样品中DMAP的HPLC图谱附图3：对照实施例16测定的醋酸阿比特龙样品中DMAP的HPLC图谱具体实施方式下面将通过实施例对本专利技术作进一步的描述，这些描述并不是对本
技术实现思路
作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本专利技术的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本专利技术的保护范围之内。以下实施例中相同的试药和试剂均采用同一批号。醋酸阿比特龙样品为本公司自制。专利技术实施例和对照实施例中供试品溶液和对照品溶液的制备：取醋酸阿比特龙样品200mg，精密称定，置20ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取DMAP对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml约含0.3mg的溶液，作为对照品贮备液；取对照品贮备液适量用乙腈-水(40:60)稀释制成每1ml约含0.03μgDMAP的溶液，作为对照品溶液。专利技术实施例色谱条件：色谱柱：C18；3μm；2.0mm×50mm。流动相：流动相A：乙腈；流动相B：0.01mol/L庚烷磺酸钠。时间(分分)流动相A(％)流动相B(％)04060104060257030357030264060354060进样量：20μl柱温：40℃检测波长：280nm流速：1.0ml/min精密量取对照品和供试品各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品(醋酸阿比特龙样品)的HPLC图见说明书附图1；按外标法以峰面积计算，得到醋酸阿比特龙样品中DMAP液相含量为0.4ppm，样品中DMAP峰(保留时间3.76min)与溶剂峰(保留时间2.5min)分离度大于2，DMAP峰对称因子符合2015版中国药典规定。对照实施例对照实施例1按照参考文献(现代生物医学进展，15(28)，5418-5423，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种醋酸阿比特龙中二甲氨基吡啶的高效液相测定方法：a.色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；b.以乙腈和烷基磺酸钠盐溶液为流动相，所述烷基磺酸钠盐溶液浓度为0.005～0.1M，流动相乙腈和烷基磺酸钠盐的体积配比为：乙腈:烷基磺酸钠溶液＝38:62～42:58，所述烷基磺酸钠选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠或癸烷磺酸钠中的一种或多种；c.检测波长选自270‑290nm。
【技术特征摘要】
1.一种醋酸阿比特龙中二甲氨基吡啶的高效液相测定方法：a.色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；b.以乙腈和烷基磺酸钠盐溶液为流动相，所述烷基磺酸钠盐溶液浓度为0.005～0.1M，流动相乙腈和烷基磺酸钠盐的体积配比为：乙腈:烷基磺酸钠溶液＝38:62～42:58，所述烷基磺酸钠选自庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠或癸烷磺酸钠中的一种或多...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宏玲，郭志强，
申请(专利权)人：天津金耀集团有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12
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