LINC01814在胃癌诊治中的应用制造技术

本发明专利技术公开了LINC01814在胃癌诊治中的应用。本发明专利技术通过QPCR实验证实了LINC01814在胃癌组织中表达上调，且对LINC01814进行ROC分析，发现使用LINC01814进行诊断具有较高的准确性。本发明专利技术通过细胞实验证实了干扰LINC01814的表达可以抑制胃癌细胞的增殖，提示LINC01814可作为药物靶点应用于胃癌患者的个性化治疗。

The application of LINC01814 in the diagnosis and treatment of gastric cancer

The invention discloses the application of LINC01814 in the diagnosis and treatment of gastric cancer. The present invention confirmed that the expression of LINC01814 in gastric cancer tissues was up regulated by QPCR experiment, and the ROC analysis of LINC01814 was found. It was found that the diagnostic accuracy of LINC01814 was high. The present invention proved that the expression of interfered LINC01814 can inhibit the proliferation of gastric cancer cells by cell test, suggesting that LINC01814 can be used as a drug target for individualized treatment of gastric cancer patients.

【技术实现步骤摘要】
LINC01814在胃癌诊治中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及LINC01814在胃癌诊治中的应用。
技术介绍
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，同时肿瘤相关死亡率在全世界排在第三位。尽管随着医学科学的发展、手术方式的改进和医学诊疗技术的提高，许多的胃癌病人能得妥善和规范的治疗，并且已取得较好疗效，但胃癌的早期发现较难、进展期胃癌切除术后复发率和转移率高一直严重影响着胃癌病人的治疗效果与生存期。相对于其他肿瘤而言，胃癌的早期发现比例低，确诊时，进展期高达7％以上，进展期病人即使根治性切除后5年复发率较高。因此，在加强胃癌早期诊断研究的同时，阐述引起胃癌发生及转移的具体机制，建立新的早期胃癌或转移性胃癌的诊断标准，进而探索新的干预措施，防止胃癌的进一步复发及转移，提高胃癌术前术后的治疗效果，增加患者的存活率和生活质量对疾病的治疗和预防具有重大的意义。胃癌的发生、发展与癌基因的异常表达和抑癌基因功能失活相关，胃癌发生及转移等涉及细胞功能紊乱，病毒介导的免疫微环境改变，基质破坏、血管生成等多个环节，包括多因素诱导，多基因参与的复杂病理过程。因此，寻找有效的与胃癌发生或转移相关的基因表达谱及关键蛋白标志，预测其发生是保证临床治疗效果和提高生存率的重要步骤。随着高通量测序技术的发展，研究者已经证实在人类基因组中具有蛋白编码能力的RNA仅占人类基因组5％，但其它95％的非编码区大部分也发生转录，这些转录产物大部分是长链和短链的非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA)，并且表明长期以来被认为是垃圾的基因组大部分区域其实有着重要的生物学作用。异常表达的lncRNA可通过不同途径和不同作用机制参与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移的各个阶段，是肿瘤进展的关键因素。胃癌早期症状多缺乏特异性，早期病例仅占胃癌手术病例的10％～20％，大约2/3的患者在确诊时已处于中晚期或出现淋巴结、血行转移，其5年生存率仅为20％～30％。尽管专利CN201710300189.X、CN201710069880.1、CN201710069879.9相继公开了lncRNALINC01234、ENSG00000225521、ENSG00000228742可应用于胃癌的诊断，但是其到临床应用仍需要很长的一段时间，因此寻找新的生物学靶标用于胃癌的癌变监测和干预，对于胃癌的诊断和治疗具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于胃癌诊治的lncRNA生物标志物，本专利技术所提供的lncRNA生物标志物对于人胃癌具有较高的灵敏度和特异性，可作为新型生物标志物用于胃癌的检测。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测LINC01814水平的试剂在制备诊断胃癌的产品中的应用。进一步，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术检测样本中LINC01814基因的表达水平的试剂。进一步，所述试剂选自：特异性识别LINC01814的探针；或特异性扩增LINC01814的引物。进一步，特异性扩增LINC01814的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。本专利技术提供了一种诊断胃癌的产品，所述产品包括检测LINC01814水平的试剂，所述产品包括芯片、制剂或试剂盒。进一步，所述试剂选自：特异性识别LINC01814的探针；或特异性扩增LINC01814的引物。进一步，特异性扩增LINC01814的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。本专利技术中的芯片可用于检测包括LINC01814基因在内的多个基因(例如，与胃癌相关的多个基因)的表达水平；本专利技术中的试剂盒可用于检测包括LINC01814基因在内的多个基因(例如，与胃癌相关的多个基因)的表达水平。本专利技术提供了LINC01814在制备预防或治疗乳腺癌的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括LINC01814的下调剂。所述下调剂选自：以LINC01814或其转录本为靶序列、且能够抑制LINC01814基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(siRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。优选的，所述的下调剂为siRNA。本专利技术提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括LINC01814的下调剂，和/或与所述下调剂相配伍的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料。进一步，所述下调剂为siRNA。进一步，所述siRNA具有如SEQIDNO.7～8所示的序列。本专利技术的药物还可与其他治疗胃癌的药物联用，其他治疗性化合物可以与主要的活性成分同时给药，甚至在同一组合物中同时给药。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了LINC01814的差异表达与胃癌的发生发展相关，通过检测受试者样本中LINC01814的水平，可以判断受试者是否患有胃癌，从而指导临床医师给受试者提供预防方案或者治疗方案。附图说明图1是利用QPCR检测LINC01814基因在胃癌组织中的表达情况图；图2是利用QPCR检测LINC01814在不同胃癌细胞中的表达情况图；图3是利用QPCR检测LINC01814基因过表达载体对胃癌细胞中该基因表达水平的影响图；图4是用MTS法检测LINC01814基因对胃癌细胞增殖的影响图。具体的实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，通过高通量方法，检测胃癌组织和癌旁组织中lncRNA的表达水平，发现其中具有明显表达差异的lncRNA，探讨其与胃癌的发生发展之间的关系，从而为胃癌的早期检测及靶向治疗寻找更好的途径和方法。通过筛选，本专利技术首次发现了胃癌中LINC01814显著性上调。实验证明，siRNA干扰LINC01814，能够有效地抑制胃癌细胞的增殖，为胃癌的个性化治疗提供了新途径。生物标志物术语“生物标志物”是其在组织或细胞中的表达水平与正常或健康细胞或组织的表达水平相比发生改变的任何基因。本领域技术人员将认识到，本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的标志物基因的任何特定变体的基因表达进行定量。作为非限制性的实例，标志物基因的序列如目前国际公共核酸数据库GeneBank中LINC01814基因(NR_110257.1)所示。本专利技术中的LINC01814包括野生型、突变型或其片段。本专利技术可以利用本领域内已知的任何方法测定基因表达。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本专利技术的重要方面。可以在转录水平上检测生物标志物的表达水平。在一些实施方案中，在转录水平上检测生物标志物的表达水平。利用核酸杂交技术进行具体DNA和RNA测量的多种方法是本领域技术人员已知的。一些方法涉及电泳分离(例如，用于检测DNA的Southern印迹和用于检测RNA的Northern印迹)，但是也可以在不利用电泳分离的情况下进行DNA和RNA的测量(例如，通过斑点印迹)。基因组DNA(例如，来自人)的Southern印迹可用于筛选限制性片段长度多态性(RFLP)，以检测影响本专利技术多肽的遗传病症的存在。可以检测所有形式的RNA。芯片本专利技术的所述的lncRNA芯片包括：固相载体；以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述的寡核苷酸探针特异性地对应于LINC01814本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LINC01814水平的试剂在制备诊断胃癌的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测LINC01814水平的试剂在制备诊断胃癌的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术检测样本中LINC01814基因的表达水平的试剂。3.一种诊断胃癌的产品，其特征在于，所述产品包括检测LINC01814水平的试剂。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别LINC01814的探针；或特异性扩增LINC01814的引物。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，特异性扩增LINC01814的引物序列如...

【专利技术属性】
技术研发人员：李岚，梁丽，叶丽敏，
申请(专利权)人：贵州省人民医院，
类型：发明
国别省市：贵州,52