The invention discloses a refining process of heparin sodium, which comprises the following steps: (1) dissolving; (2) enzymolysis; (3) adjusting the acid; (4) oxidizing; (5) settling; (6) drying. The purification process of heparin sodium is a combination of enzymatic hydrolysis and oxidation. The protein is hydrolyzed by protease specific hydrolysis of protein first, and then the protein and impurity are removed by combination of acid removing protein and oxidation removal, and the high potency of heparin sodium is obtained.
【技术实现步骤摘要】
一种肝素钠的精制工艺
本专利技术涉及生化
,尤其是涉及一种肝素钠的精制工艺。
技术介绍
肝素广泛存在于在猪、牛、狗等哺乳动物的内脏和肠粘膜中。肝素主要是由D-葡糖胺,L-艾杜糖醛酸,N-乙酰葡萄糖胺及D-葡糖醛酸交替组成的粘多糖硫酸酯,分子量分布在6000~20000,为白色或类白色粉末,无毒无味,有吸湿性。肝素易溶于水,不溶于乙醇、丙酮、二氧六环等有机溶剂,分子结构单元中含有5个硫酸基和2个羟基,呈强酸性,为聚阴离子,能与阳离子发生反应生成盐。由于肝素在动物体中主要以肝素钠-蛋白质复合物的形式存在,故使得目前从动物体中提取的粗品肝素钠中会残留一定量的蛋白质,使得肝素钠的活性受到一定影响。肝素的精制过程主要是对粗品肝素钠进行除蛋白提纯和脱色,达到国家药典标准要求。在我国肝素的精制多采用高锰酸钾氧化法和过氧化氢法。但是高锰酸钾氧化法会产生二氧化锰吸食肝素的问题,使肝素钠活性损失大,导致肝素钠回收率低、色泽差;过氧化氧氧化法,因产品色泽较好,目前被普遍采用,但由于现有技术对氧化剂加入量及反应条件均难以控制,往往在实际生产过程中会加入过量的氧化剂,而反应条件也不适宜,最终对肝素钠结构的破坏,使其收率低,活性低,难以得到较高纯度的精品肝素钠产品。
技术实现思路
本专利技术提供了一种肝素钠的精制工艺,以解决现有肝素钠精制使时因对肝素钠结构产生破坏而难以得到较高纯度的肝素钠的问题。为了解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案概述如下:一种肝素钠的精制工艺,包括以下步骤:(1)溶解:将肝素钠粗品溶于3.5%的氯化钠溶液中,并加热至48-53℃,用NaOH溶液调节pH ...
【技术保护点】
1.一种肝素钠的精制工艺,其特征在于,包括以下步骤:(1)溶解:将肝素钠粗品溶于3.5%的氯化钠溶液中,并加热至48‑53℃,用NaOH溶液调节pH至8.0‑8.3,静置2‑3h后抽滤,除不溶性杂质,得澄清的滤液;(2)酶解:在步骤(1)中所述的澄清的滤液中加入蛋白酶,调节pH至7‑9,将温度控制在40‑45℃,酶解时间为5‑6h;(3)调酸:加入亚硫酸氢钠作为保护剂,加入盐酸调节pH至1.5‑2,维持温度在20‑22℃,离心脱除蛋白;(4)氧化:在步骤(3)所述的离心脱除蛋白的滤液中加入过氧化氢,过氧化氢的加入量为滤液质量的2‑3%,调节pH至8‑9,将温度控制在25‑27℃,进行氧化反应14‑15h;(5)沉淀:将步骤(4)所述的氧化反应完成的液体中加入盐酸调节pH至6‑7,加入与液体等量的95%的乙醇进行沉淀,沉淀时间为12‑13h,抽出上清液,得到沉淀物,将沉淀物慢慢加入到丙酮中脱水二次;(6)干燥:将步骤(5)所述的脱水后的沉淀物在55‑60℃下真空烘干4‑6h,得到精制肝素钠。
【技术特征摘要】
1.一种肝素钠的精制工艺,其特征在于,包括以下步骤:(1)溶解:将肝素钠粗品溶于3.5%的氯化钠溶液中,并加热至48-53℃,用NaOH溶液调节pH至8.0-8.3,静置2-3h后抽滤,除不溶性杂质,得澄清的滤液;(2)酶解:在步骤(1)中所述的澄清的滤液中加入蛋白酶,调节pH至7-9,将温度控制在40-45℃,酶解时间为5-6h;(3)调酸:加入亚硫酸氢钠作为保护剂,加入盐酸调节pH至1.5-2,维持温度在20-22℃,离心脱除蛋白;(4)氧化:在步骤(3)所述的离心脱除蛋白的滤液中加入过氧化氢,过氧化氢的加入量为滤液质量的2-3%,调节pH至8-9,将温度...
【专利技术属性】
技术研发人员:李海生,
申请(专利权)人:广元市海鹏生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:四川,51
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