测定逍遥丸中成分含量的方法技术

本发明专利技术测定逍遥丸中成分含量的方法，属于药物分析领域。色谱条件为:采用Shimadzu Wondasil C18色谱柱，流动相为乙腈‑0.1%甲酸溶液梯度洗脱，柱温30℃。建立逍遥丸中柴胡皂苷（1）、芍药苷（2）、甘草苷（3）、异甘草素（4）、甘草酸铵（5）、白术内酯Ⅲ（6）、甘草次酸（7）等7种成分的HPLC含量测定方法。结果显示上述7种化学成分均达到基线分离，线性范围较宽且线性关系良好。本方法简单准确，灵敏度高，重复性好，从而为逍遥丸的质量评价及临床合理应用提供科学依据。

【技术实现步骤摘要】
测定逍遥丸中成分含量的方法
本专利技术涉及测定逍遥丸中成分含量的方法，属于药物分析领域。
技术介绍
逍遥丸是中药复方制剂，具有疏肝健脾，养血调经之功效。现收录于中国药典，可用于肝气不舒，胸胁胀痛，头晕目眩等症，疗效确切。处方中主要含有柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、甘草、薄荷7种药材。其中阿魏酸是当归的主要化学成分；甘草苷、异甘草素、甘草酸铵、白术内酯Ⅲ、甘草次酸为甘草的主要化学成分；柴胡皂苷、柴胡苷元及龙吉苷元是柴胡的主要化学成分；白素内酯Ⅲ是白术主要成分；茯苓糖是茯苓的主成分等。现行药典规定对逍遥丸中的芍药苷含量进行控制，文献仅见测定逍遥丸中芍药苷、阿魏酸、当归等一种或多种成分含量的报道。本文建立了同时测定逍遥丸中7种成分含量的HPLC-DAD分析方法，从而为逍遥丸的质量评价及临床合理应用提供科学依据。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供测定逍遥丸中成分含量的方法。专利技术概述：本专利技术利用HPLC-DAD波长切换法同时测定逍遥丸中柴胡皂苷（1）、芍药苷（2）、甘草苷（3）、异甘草素（4）、甘草酸铵（5）、白术内酯Ⅲ（6）、甘草次酸（7）等7种成分的有效成分的含量，为逍遥丸的质量测定与评价提供科学依据。专利技术详述：本专利技术HPLC-DAD波长切换法同时测定逍遥丸中7种化学成分的含量，包括如下步骤：1材料1.1仪器ShimadzuLC-20A高效液相色谱仪（日本岛津）。包括SCL-20AvpSystemController；SPD-M20ADAD；FCV-20ALvp；SIL-20AAutoSampler；LC-Solution1.22SP1（色谱数据工作站）；Milli-Q50超纯水仪（美国密理博）；UltrasonicGenerator超声仪（宁波新芝生物科技有限公司）；AE240电子天平（瑞士MettlerTole-do）。1.2试剂与药品对照品芍药苷（≥98.0%，MUST-12113009）、甘草苷（≥98.0%，MUST-12020901)柴胡皂苷（≥98.0%，MUST-12052402）、异甘草素（≥98.0%，MUST-11041605）均购自成都曼思特生物科技有限公司。对照品甘草酸铵（≥98.0%，120225）、甘草次酸（≥98.0%，101207）均购自四川维克奇生物科技有限公司。6个批号的逍遥丸均购自本地零售药房。乙腈（色谱纯，美国MREDA公司）；水为超纯水；其余试剂为分析纯。方法与结果2.1色谱条件的优化2.1.1色谱条件色谱柱为ShimadzuWondasil-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱：0～30min，10%～12%B；30～35min，12%～13%B；35～55min，13%～15%B；55～60min，15%～18%B；60～90min，18%～19%B；90～100min，19%～24%B；100～125min，24%～30%B；125～155min，30%～45%B；155～195min，45%～65%B；205min，10%B。流速为1.0mL/min，进样量20μL，柱温30℃，外标法定量。2.1.2柱温的选择分别考察25、30、35℃柱温对样品分离的影响，结果表明30℃柱温下峰形及分离度较好。2.1.3固定相的选择在确定流动相和柱温的情况下，分别考察ShimadzuWondasilC18（250×4.6mm,5μm）、Kromasil100-5C18（250×4.6mm,5μm）、HypersilODSC18（250×4.6mm，5μm）、KromasilC18（250×4.6mm,5μm）色谱柱，结果表明在ShimadzuWondasil-C18色谱柱下峰形及分离度较好。2.1.4流动相的选择逍遥丸为中药复方，检测组分较多，采用等度洗脱法难以达到有效分离，所以采用梯度洗脱。流动相系统比较了乙腈-甲酸三乙胺、甲醇-0.1%磷酸、乙腈-0.1%甲酸、乙腈-水洗脱系统，结果表明以乙腈-0.1%甲酸洗脱系统分离效果最好。样品溶液的制备2.2.1供试品溶液的制备取样品适量，研细，精密称定7.5g置于具塞锥形瓶中，精密加入100%甲醇20mL，称定重量，浸渍30min后超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，用100%甲醇定容至25ml，即得。2.2.2阴性溶液的制备按《中国药典》一部“逍遥丸”项下的处方，分别制不含白芍、柴胡、白术[[i]]和甘草的片剂，并按2.2.1“供试品溶液的制备”项下方法，制备阴性对照品溶液。2.2.3对照品溶液的制备精密称定7种对照品适量，加70%甲醇配制成质量浓度分别为：1.22，1.02，0.58，0.51，1.99，0.51，0.505（mg/mL）的对照品溶液，冷藏，备用。与现有技术相比本专利技术的有益效果在于：本专利技术HPLC-DAD波长切换法同时测定逍遥丸中7种化学成分的含量，而现有的测定技术，只测定逍遥丸中两种或三种的有效成分，不能全面的分析逍遥丸的主要成分。本方法可以为逍遥丸的质量测定提供更加全面的理论依据和科学评价。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术进一步描述，这些实施例只为清楚公开本专利技术，但本专利技术的保护范围并不仅限于此。实施例1专属性试验对上述溶液进行测定。结果表明，7种成分和供试品中的其他成分理论板数大于2000，分离度大于1.5。阴性对照溶液不干扰组分测定。实施例2稳定性试验取样品粉末约0.75g，精密称定，按“2.2.1”项下方法制成供试品溶液，在“2.1.1”项下色谱条件下，分别于0、2、4、8、12、18、24h进样20uL，测定各成分的峰面积。24h内7种成分的峰面积的RSD分别为1.4%、1.0%、1.5%、2.1%、2.3%、1.8%、2.2%，表明供试品溶液在24h内稳定。实施例3加样回收率试验取已知含量的逍遥丸适量，研细，精密称定，分别按相当于样品中7种成分含量的80％、100％、120％加入对照品，各3份，分别按“2.2.1”项下方法处理，进样测定，记录峰面积。计算得7种成分平均回收率分别为99.64%、99.59%、99.41%、99.53%、99.67%、99.75%、99.62%、99.78%，RSD分别为1.8%、1.3%、1.2%、2.5%、2.2%、1.4%、2.3%。实施例4含量测定取6批号逍遥丸制成供试品溶液，每个批号平行处理3份，按上述色谱条件进行测定，测定波长分别为217nm（1），238nm（2），276nm（3），360nm（4），250nm（5），232nm（6），249nm（7），以外标两点法计算7种成分的含量[[ii]]，结果见表1。表1含量测定结果(μg/g，n=3)Table1Resultsofcontentdetermination(μg/g,n=3)批号1234567A111.860.320.570.032.650.010.07A29.50.360.530.343.760.020.09A312.730.210.510.023.310.010.06B12.240.681.580.032.210.070.17B23.990.611.540.034.550.040.14B34.210.712.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.测定逍遥丸中成分含量的方法，含量测定步骤为：取6批号逍遥丸制成供试品溶液，每个批号平行处理3份，按一定色谱条件进行测定，测定波长分别为217nm（1），238nm（2），276nm（3），360nm（4），250nm（5），232nm（6），249nm（7），以外标两点法计算7种成分的含量。

【技术特征摘要】
1.测定逍遥丸中成分含量的方法，含量测定步骤为：取6批号逍遥丸制成供试品溶液，每个批号平行处理3份，按一定色谱条件进行测定，测定波长分别为217nm（1），238nm（2），276nm（3），360nm（4），250nm（5），232nm（6），249nm（7），以外标两点法计算7种成分的含量。2.测定逍遥丸中成分含量的方法，其特征在于洗脱梯度为0～30min，10%～12%B；30～35min，12%～13%B；35～55min，13%～15%B；55～60mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：李捷茹，陈健，朱驯，
申请(专利权)人：盐城工业职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32