The invention discloses a method for extracting rhamnolipid products in the fermentation broth, including the following steps: 1) preprocessing: heating the fermentation liquid, removing the insoluble substances, such as the bacteria and the denatured protein after cooling; 2) flocculation and concentration: adding proper amount of chitosan to the supernatant, mixing, natural settlement at the appropriate temperature and abandoning the upper liquid phase at the suitable temperature. 3) elution: the distilled water cleaning and removing the residual fermentation liquid in the sediment, adding the suitable concentration of NaHCO3 solution, eluting the rhamnolipid in the precipitate, collecting the eluant; 4) obtaining: adjusting the eluent, settling and centrifugation, and obtaining the rhamnolipid products. The method is simple and efficient for extracting rhamnolipid from fermentation broth, and has important application value in the field of rhamnolipid fermentation.
【技术实现步骤摘要】
一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法
本专利技术属于鼠李糖脂发酵生产领域,具体地说,它涉及一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法。
技术介绍
鼠李糖脂是由铜绿假单胞菌等细菌代谢合成的一种生物表面活性剂,因其具有表面活性高、临界胶束浓度低,安全无毒、可生物降解等优势,因而在微生物采油、环境污染修复、食品、生物医药等
具有广泛的应用前景。鼠李糖脂产生菌的发酵液成分复杂,从发酵液中提取鼠李糖脂的成本高、难度较大。目前,从发酵液中提取鼠李糖脂的方法主要为氯仿-甲醇萃取法、硅胶柱层析法等,在萃取法和柱层析法中需要用到大量的氯仿,而氯仿是一种高毒性的有机氯化物,危害人体和环境。上述提取方法的高成本和高毒性限制了鼠李糖脂的发酵生产和应用。因此,获得一种简便、绿色的鼠李糖脂产物提取方法,将能够解决上述瓶颈问题。本专利技术的鼠李糖脂提取方法不需要使用氯仿和甲醇等有毒溶剂,为绿色提取工艺。因此,该提取发酵液中鼠李糖脂的方法,在鼠李糖脂的发酵生产领域将具有重要的应用价值。
技术实现思路
:为了克服上述现有技术的不足,本专利技术提供了一种简便、高效提取发酵液中鼠李糖脂的方法。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案为:一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法,包括以下步骤:1)预处理:加热发酵液、冷却后离心除去菌体、变性蛋白等不溶物;2)絮凝与浓缩:上清液中加入适量壳聚糖,搅拌混匀,在适宜温度下自然沉降,弃掉上层液相;3)洗脱:蒸馏水清洗去除沉淀物中残余发酵液后,加入适宜浓度的NaHCO3溶液,洗脱沉淀物中的鼠李糖脂,收集洗脱液;4)获取:调节洗脱液pH、静置沉淀、离心,获得鼠李糖脂产物。 ...
【技术保护点】
1.一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法,所述方法包括以下步骤:1)预处理:加热鼠李糖脂产生菌发酵液、冷却至室温后离心除去不溶物,得上清液;2)絮凝与浓缩:上清液中加入壳聚糖,搅拌混匀,自然沉降后,弃掉上层液相;3)洗脱:蒸馏水清洗去除沉淀物中残余发酵液后,加入NaHCO3溶液,洗脱沉淀物中的鼠李糖脂,收集洗脱液;4)获取:调节洗脱液pH、静置沉淀、离心,获得鼠李糖脂产物。
【技术特征摘要】
1.一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法,所述方法包括以下步骤:1)预处理:加热鼠李糖脂产生菌发酵液、冷却至室温后离心除去不溶物,得上清液;2)絮凝与浓缩:上清液中加入壳聚糖,搅拌混匀,自然沉降后,弃掉上层液相;3)洗脱:蒸馏水清洗去除沉淀物中残余发酵液后,加入NaHCO3溶液,洗脱沉淀物中的鼠李糖脂,收集洗脱液;4)获取:调节洗脱液pH、静置沉淀、离心,获得鼠李糖脂产物。2.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤1)的发酵液在80~100℃下,加热处理20~60min;在8,000g~10,000g条件下,离心除去菌体和变性蛋白等不溶物。3.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤2)中加入壳聚糖至终浓度为5~20g/L,在30~40℃下,絮凝沉降1~2h,然后弃掉上层液相。4.按照权利要求1或3所述的方法,其特征在于:选择脱乙酰度≥90%的壳聚糖。5.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤3)中,对于每5-15克沉淀物,用20~50ml蒸馏水洗涤沉淀物,此洗涤过程共进行1-3次;用20~50ml浓度为1~5g/L的NaHC...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵峰,张颖,史荣久,韩斯琴,
申请(专利权)人:中国科学院沈阳应用生态研究所,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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