一种检测主动脉夹层的标志物及标志物评估方法技术

本发明专利技术属于医药学技术领域，公开了一种检测主动脉夹层的标志物及标志物评估方法，检测主动脉夹层的标志物为：MMP‑9+D‑Dimer+ET‑1+Calponi；评估方法包括：采用ELISA技术，将所选的MMP‑9+D‑Dimer+ET‑1+Calponi标志物进行血清学分析；绘制工作特征ROC曲线，并采用SPSS 21.0统计学软件进行分析。本发明专利技术中，ET‑1、D‑Dimer、MMP‑9三项指标的特异度均较高，分别为98.6％、98.7％、97.1％，其灵敏度为80.0％、81.7％、81.7％，其诊断准确度也较高为86.4％、87.5％、87.5％。

An evaluation method for markers and markers for detecting aortic dissection

The invention belongs to the technical field of medicine and pharmacology, and discloses a marker and marker evaluation method for detecting aortic dissection. The marker for detecting aortic dissection is MMP 9+D Dimer+ET 1+Calponi; the evaluation method includes the use of ELISA technology to carry out the serology of the selected MMP 9+D Dimer+ET 1+Calponi markers. Analysis, draw the working characteristic ROC curve, and use SPSS 21 statistical software for analysis. In this invention, the specificity of ET 1, D Dimer and MMP 9 is higher, 98.6%, 98.7%, 97.1% respectively, and its sensitivity is 80%, 81.7%, 81.7%, and its diagnostic accuracy is also 86.4%, 87.5%, 87.5%.

【技术实现步骤摘要】
一种检测主动脉夹层的标志物及标志物评估方法
本专利技术属于医药学
，尤其涉及一种检测主动脉夹层的标志物及标志物评估方法。
技术介绍
急性主动脉夹层属于急性主动脉综合征的一种，是一类死亡率极高的心血管急危重症。结合目前的分析发现，AAD的发生机制主要是主动脉血管壁出现突发的致命性病理变化，管壁的局部破损使血液在极高的压力作用下进入主动脉内膜并累及中层，进而造成内膜与中层之间的夹层。此类患者的临床表现多为突发的撕裂样胸背部疼痛。发病初期，多数患者因夹层病变较重，导致主动脉外膜破裂死亡。此外，由于主动脉夹层的假腔形成，部分患者会随着病程的发展及分支血管的受累，逐步影响机体的血流供应，进而出现多器官的血供受限，严重者可在短期出现多脏器功能衰竭，进而导致各种并发症的发生危及生命，严重影响患者预后。依据主动脉夹层初发后(主要以患者出现临床表现开始)所经历时间的变化，2014年的欧洲心脏病学会指南将其分为：急性期(2周以内)，亚急性期(2周至3个月)，慢性期(3个月以上)。其中，急性期主动脉夹层死亡风险极高在发病初期的24小时内,每延误1小时死亡风险增加1％，1周内死亡率高达50％以上。伴随诊断水平的不断提高，及疾病谱的改变，我国的统计数据显示：主动脉夹层的发病率表现为逐年增加的变化趋势。面对如此凶险的疾病，临床上的治疗方法除常规的药物治疗外，日趋成熟的血管腔内介入封堵技术及外科手术是目前首选的治疗方案。但实施上述治疗方案的前提条件是在最短的时间内，能明确诊断主动脉夹层，进而指导临床医师在短期内制定及时有效的药物或手术治疗策略，最终降低AAD的死亡率，提高生存率。结合目前较为经典的早期诊断方法，同样作为心血管急危重症之一的急性心肌梗死(AcuteMyocardialInfarction，AMI)，近年来由于其早期诊断的水平不断提高，肌钙蛋白T、肌钙蛋白I的广泛应用，加之冠状动脉溶栓治疗及冠状动脉介入技术的日趋成熟，急性心肌梗死患者急性期的住院死亡率已明显降低，但AAD的住院死亡率仍居高不下。因此，对于临床表现为胸背部剧烈疼痛，首诊不排除主动脉夹层的患者，急需构建一种灵敏度高、特异性强的快速床旁诊断方法。目前临床上对于胸背部疼痛疑似AAD的患者进行血常规、血生化等标志物的实验室检测，主要是为初步评估患者一般情况，做出鉴别诊断，尚不能达到确诊的目的。现今的临床诊疗过程中，对AAD的诊断主要依靠影像学技术。X线胸片能发现异常的主动脉轮廓，主动脉壁的分离或扩大，纵膈的改变等，故可用于诊断部分表型较为明显的主动脉夹层，且该项检查可在床旁完成，故而作为入院的常规检查项目，具有一定的诊断价值。但由于其灵敏度及特异度不高，且干扰因素较多，易漏诊等不足，X线胸片尚不能作为诊断AAD的决定性证据。经食管超声心动图(Transesophagealechocardiography,TEE)的应用可明确诊断AAD，但其准备条件严格，操作时易引起患者交感神经兴奋，增加夹层破裂风险，故临床上未将其作为常规检查。目前临床上主要以主动脉CTA(ComputedTomographyAngiography)和磁共振血管造影(MagneticResonanceAngiography，MRA)作为AAD诊断的金标准而被广泛应用。然而，主动脉CTA需要三维数据成像，期间需要花费大量时间，不利于AAD的早期诊断。由于频繁搬运及扫描时间长的缺点，MRA检查对于生命体征不稳定的急诊患者尚存较大风险。此外上述检查无法在床边或者急诊室内实施，需频繁搬运AAD患者，增加其夹层破裂的风险。再者，偏远地区的医疗机构，因缺乏大型的影像学设备和经验丰富的医生，限制了上述方法的推广应用。综上所述，目前急需一种简单、客观、灵敏、经济的检查手段用以早期准确诊断AAD。相比影像学诊断而言，血清学检查因具备上述优点，而成为临床的重要检查手段被广泛应用，其中较为经典的诸如：AMI时患者血清中肌钙蛋白的升高，可以为临床提供重要信息，进而指导后续的治疗。近年来，在AAD诊断标志物的分析多集中在血清标志物上。结合目前的分析，经过精细设计及大样本验证所得的相关标志物包括：D-二聚体(D-dimer)、转化生长因子-β(TransformingGrowthFactor-β，TGF-β)、基质金属蛋白酶-9(MatrixMetalloprotein-9，MMP-9)、调宁蛋白(Calponin)等。但上述标志物存在不同程度的限制，未能很好应用临床AAD的诊断。再者，AAD的发病机制复杂，可能涉及基因改变、多种通道、多个蛋白的参与以及种族差异性、环境因素的作用等。国内外关于AAD发病机制的分析虽取得一些成果，但迄今为止AAD早期诊断标志物及其分子机制的分析始终未获突破。目前有分析报道，采用标志物联合诊断的方法可以提高特异性及灵敏度，但因缺乏大样本验证，未能推广。近年来，在AAD的基础分析中，获得部分意义较大的，可能成为早期诊断AAD潜在的标志物，诸如：亲环素A(CyclophilinA,CyPA)等，但尚未在临床验证。综上所述，现有技术存在的问题是：与主动脉夹层相关的炎性标志物种类繁多，其对于疾病的意义也不尽相同。目前的研究也证实，主动脉夹层的发生非单一因素所决定，而是多种因素相互作用而产生的结果。对于AD的发病机制目前仍在探索阶段，其中对于基因的多态性、MMPs的表达及调控、免疫炎症反应在AD中的作用仍存在盲区。目前关于AD的研究尚存在诸多不足，例如样本量较少、多数为回顾性研究、缺乏系统的前瞻性研究等。现有的主动脉夹层的标志物，用于AAD的早期诊断及预后评估性以及在临床应用中对AAD诊断准确性低、实用性差。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种检测主动脉夹层的标志物及标志物评估方法。本专利技术结合基础分析及临床实验，将目前经典的AAD血清标志物结合基础实验所得的潜在标志物进行分析组合，筛选其中最佳的标志物组合，用于AAD的早期诊断及预后评估。本专利技术对临床工作中就诊于的急性主动脉夹层患者的血清标本进行收集保存，并采用经典的ELISA实验技术，将所选的标志物进行血清学分析，绘制受试者工作特征(ROC)曲线，并采用SPSS21.0统计学软件进行分析，明确基础分析中所得标志物能否成为新的AAD诊断标志物应用于临床，同时探索联合指标对AAD诊断价值。本专利技术是这样实现的，一种检测主动脉夹层的标志物，所述检测主动脉夹层的标志物为：MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi。本专利技术的另一目的在于提供一种检测主动脉夹层的标志物的评估方法包括：采用ELISA技术，将所选的MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi标志物进行血清学分析；绘制工作特征ROC曲线，并采用SPSS21.0统计学软件进行分析。进一步，采用ELISA技术，将所选的MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi标志物进行血清学分析前，需进行对采集的急性主动脉夹层的血清充分融冻；将预先购置的96T酶标包被板取出，设立6孔标准检验区，2孔空白对照区，88孔待测样品检验区；将标准品稀释后加样于6孔标准检验区，检测样本分别加入88孔待测样品检验区，待加样完成后，轻摇混匀样本；选择封板膜将96T酶标板进行完全封本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测主动脉夹层的标志物，其特征在于，所述检测主动脉夹层的标志物为：MMP‑9+D‑Dimer+ET‑1+Calponi。

【技术特征摘要】
1.一种检测主动脉夹层的标志物，其特征在于，所述检测主动脉夹层的标志物为：MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi。2.一种如权利要求1所述检测主动脉夹层的标志物的评估方法，其特征在于，所述检测主动脉夹层的标志物的评估方法包括：采用ELISA技术，将所选的MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi标志物进行血清学分析；绘制工作特征ROC曲线，并采用SPSS21.0统计学软件进行分析。3.如权利要求1所述检测主动脉夹层的标志物的评估方法，其特征在于，采用ELISA技术，将所选的MMP-9+D-Dimer+ET-1+Calponi标志物进行血清学分析前，需进行对采集的急性主动脉夹层的血清充分融冻；将预先购置的96T酶标包被板取出，设立6孔标准检验区，2孔空白对照区，88孔待测样品检验区；将标准品稀释后加样于6孔标准检验区，检测样本分别加入88孔待测样品检验区，待加样完成后，轻摇混匀样本；选择封板膜将96T酶标板进行完全封包后，将其置于37℃温育箱中约30分钟，充分温育后，将酶标板各孔重复洗涤5次，进行物理干燥；将相关酶标试剂加入标准检测区及待测样品检测区后，再次温育洗涤，加入显色剂，充分轻摇混匀，37℃下避光显色15...

【专利技术属性】
技术研发人员：马翔，成娜，汪浩，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：新疆,65