一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法技术

本发明专利技术公开一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，该方法采用先碱水解然后酸水解分离蔗渣细胞壁中的阿魏酸和对香豆酸，采用GC‑MS定量分析阿魏酸和对香豆酸的含量。本发明专利技术优点：本发明专利技术采用先碱水解再酸水解综合法分离蔗渣细胞壁中的阿魏酸和对香豆酸，排除半纤维素和木素干扰，采用乙酸乙酯为萃取溶剂，显著提高了阿魏酸和对香豆酸的得率，采用GC‑MS快速高效的定量分析阿魏酸和对香豆酸，为阿魏酸和对香豆酸的高效分离和产业化应用奠定基础。 1

【技术实现步骤摘要】
一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法
本专利技术涉及生物质资源有效利用，特别提供了一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法。
技术介绍
阿魏酸(4-羟基-3甲基肉桂酸)和对香豆酸(对羟基肉桂酸)是细胞壁中主要的羟基肉桂酸。在非木材原料细胞壁形成过程中，在羟基肉桂酸与木素单体发生反应的同时，也与聚糖发生酯化反应形成阿魏酸酯和对香豆酸酯等结构。这些交联结构对植物细胞壁的生长起着重要作用，可以调节细胞壁的机械性能和生物降解性能，充当木质素与碳水化合物的“桥梁”作用。阿魏酸和对香豆酸广泛存在农林废弃物玉米芯，蔗渣，秸秆等木质纤维生物质细胞壁中。阿魏酸和对香豆酸具有抗氧化，清除自由基的作用，可以用于食品添加剂和食品保鲜剂，同时也可用于医药防治疾病和化妆品添加剂抑制黑色素的形成，抵抗紫外线辐射，美白皮肤。利用化学合成制备阿魏酸、对香豆酸的时间较长，溶剂用量大，转化率低，成本高，限制了阿魏酸和对香豆酸的广泛应用。目前主要采用一步碱水解提取阿魏酸和对香豆酸，但是提取效果差。HPLC样品制备简单，无需特殊处理，但分离能力较弱，难以分离并检测碱水解过程中产生的羟基肉桂酸二聚体。因此，提高农林生物质阿魏酸和对香豆酸提取效率和检测方法，不仅能提高阿魏酸和对香豆酸的产量，而且可以促进阿魏酸和对香豆酸的工业生产和在食品、医药方面的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种提高蔗渣阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，是从蔗渣中分离阿魏酸和对香豆酸，并提供了一种更加精确的定量分析方法。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，按以下步骤操作：1.采用NaOH溶液水解球磨蔗渣后，分离出固体和液体A；调节液体A的pH＝5～6，加入体积浓度为95％乙醇沉淀分离出12％～14％的半纤维素，得到液体B，旋转蒸发除去乙醇。2.调节液体B的pH＝1～2，离心分离出8％～10％木素，得到提取液；3.采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸。4.固体用100ml二氧六环/盐酸混合液处理，在80℃条件的油浴中回流反应3小时，冷却后分离得到残渣1和液体C；其中，二氧六环/盐酸的体积比为9:1，HCl浓度为2mol/L。5.残渣1用二氧六环/水洗涤三次，其中，二氧六环/水的体积比为1:1，将洗涤液与液体C混合，旋蒸除去二氧六环，调节液体C的pH＝6，再次离心分离，得到残渣2和液体D；用等量体积的有机溶剂萃取液体D三次，收集萃取液，旋蒸除去有机溶剂，得到萃取物，真空冷冻干燥48h，然后在45℃下真空干燥24h，得到阿魏酸和对香豆酸。6.用200μL吡啶溶解干燥后的阿魏酸和对香豆酸，取100μL溶液转移到气相色谱瓶中，加入100μLN,O-双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺硅烷化试剂(TMCS)，在70℃下反应1h后，采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆酸含量。上述的一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸，阿魏酸的萃取总含量提高了20％～25％，对香豆酸的萃取总含量提高了5～6倍。上述的一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，采用GC-MS可以分析出阿魏酸和对香豆酸的同分异构体。上述的一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆素酸的总含量分别提高了4％～5％和11％～12％。本专利技术的优点：1、通过调节溶液pH，采用等体积体积浓度为95％的乙醇除去半纤维素和木素，减少对阿魏酸和对香豆酸提取的影响，提高阿魏酸和对香豆酸的提取效率；2、采用乙酸乙酯作为萃取溶剂，能有效排除溶液中碳水化合物和蛋白质的干扰，阿魏酸萃取效率提高了20％～25％，对香豆酸的萃取效率提高了5～6倍；3、本专利技术采用GC-MS能更加快速、准确地定量分析萃取液中的阿魏酸和对香豆酸，并检测出阿魏酸和对香豆酸的同分异构体，阿魏酸和对香豆酸的总含量分别提高了4％～5％和11％～12％。附图说明图1为一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的工艺流程图。具体实施方式下面结合附图及实施例对本专利技术作进一步详细的说明。实施例1如图1所示，一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，按以下步骤操作：1.采用NaOH溶液水解球磨蔗渣后，分离出固体和液体A；调节液体A的pH＝5，加入体积浓度为95％乙醇沉淀分离出12％半纤维素，得到液体B，旋转蒸发除去乙醇。2.调节液体B的pH＝1，离心分离出10％木素，得到提取液；3.采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸。4.固体用100ml二氧六环/盐酸混合液处理，在80℃条件的油浴中回流反应3小时，冷却后分离得到残渣1和液体C；其中，二氧六环/盐酸的体积比为9:1，HCl浓度为2mol/L。5.残渣1用二氧六环/水洗涤三次，其中，二氧六环/水的体积比为1:1，将洗涤液与液体C混合，旋蒸除去二氧六环，调节液体C的pH＝6，再次离心分离，得到残渣2和液体D；用等量体积的有机溶剂萃取液体D三次，收集萃取液，旋蒸除去有机溶剂，得到萃取物，真空冷冻干燥48h，然后在45℃下真空干燥24h，得到阿魏酸和对香豆酸。6.用200μL吡啶溶解干燥后的阿魏酸和对香豆酸，取100μL溶液转移到气相色谱瓶中，加入100μLN,O-双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺硅烷化试剂(TMCS)，在70℃下反应1h后，采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆酸含量。采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸，阿魏酸的萃取总含量提高了20％，对香豆酸的萃取总含量提高了5倍。采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆素酸的总含量分别提高了4％和11％。实施例2如图1所示，一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，按以下步骤操作：1.采用NaOH溶液水解球磨蔗渣后，分离出固体和液体A；调节液体A的pH＝6，加入体积浓度为95％乙醇沉淀分离出14％的半纤维素，得到液体B，旋转蒸发除去乙醇。2.调节液体B的pH＝1～2，离心分离出8％木素，得到提取液；3.采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸。4.固体用100ml二氧六环/盐酸混合液处理，在80℃条件的油浴中回流反应3小时，冷却后分离得到残渣1和液体C；其中，二氧六环/盐酸的体积比为9:1，HCl浓度为2mol/L。5.残渣1用二氧六环/水洗涤三次，其中，二氧六环/水的体积比为1:1，将洗涤液与液体C混合，旋蒸除去二氧六环，调节液体C的pH＝6，再次离心分离，得到残渣2和液体D；用等量体积的有机溶剂萃取液体D三次，收集萃取液，旋蒸除去有机溶剂，得到萃取物，真空冷冻干燥48h，然后在45℃下真空干燥24h，得到阿魏酸和对香豆酸。6.用200μL吡啶溶解干燥后的阿魏酸和对香豆酸，取100μL溶液转移到气相色谱瓶中，加入100μLN,O-双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺硅烷化试剂(TMCS)，在70℃下反应1h后，采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆酸含量。采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸，阿魏酸的萃取总含量提高了25％，对香豆酸的萃取总含量提高了6倍。采用GC-MS测定阿魏酸和对香豆素酸的总含量分别提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，其特征在于：按以下步骤操作：

【技术特征摘要】
1.一种提高阿魏酸和对香豆酸分离效率的方法，其特征在于：按以下步骤操作：1)采用NaOH溶液水解球磨蔗渣后，分离出固体和液体A；调节液体A的pH＝5～6，加入体积浓度为95％乙醇沉淀分离出12％～14％的半纤维素，得到液体B，旋转蒸发除去乙醇；2)调节液体B的pH＝1～2，离心分离出8％～10％木素，得到提取液；3)采用乙酸乙酯萃取提取液，分离出有机相，有机相去水后旋蒸后得到阿魏酸和对香豆酸；4)固体用100ml二氧六环/盐酸混合液处理，在80℃条件的油浴中回流反应3小时，冷却后分离得到残渣1和液体C；其中，二氧六环/盐酸的体积比为9:1，HCl浓度为2mol/L；5)残渣1用二氧六环/水洗涤三次，其中，二氧六环/水的体积比为1:1，将洗涤液与液体C混合，旋蒸除去二氧六环，调节液体C的pH＝6，再次离心分离，得到残渣2和液体D；用等量体积的有机溶剂萃取液体D三次，收集萃取液，旋蒸除去有机溶剂，得到萃...

【专利技术属性】
技术研发人员：闵斗勇，李明富，贾转，万广聪，王双飞，覃程荣，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：广西,45