The invention relates to a method for preparation of chromatographic separation and purification of Nimmo Curtin. The steps are as follows: (1) filtering: filtering the fermented liquid plate and frame of Nimok cement to get wet bacteria residue; (2) extraction: adding organic solvent to the wet bacteria residue and filtering the nimokine extract; (3) vacuum concentration: concentration of extract to 35% of solid 45%, Adding non water-soluble organic solvent to dissolve (4) static stratification: stationary at room temperature, collecting non water-soluble organic solvent layer; (5) decolorizing: adding activated carbon and anhydrous sodium sulfate for decolorization; (6) pumping, vacuum concentration: vacuum pump filtration, and further concentration of extracted liquid after vacuum concentration The solid content is 30 (40%); (7) dissolution: the extracted extract is mixed in proportion to the organic solvent and stirred and dissolved; (8) chromatographic separation is made. The method of separating and purifying Nimmo Curtin has simple operation, little organic solvent consumption, no environmental pollution, and the obtained Nimmo Curtin has high purity.
【技术实现步骤摘要】
一种用制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法
本专利技术涉及一种尼莫克汀的分离纯化方法,具体是一种用制备色谱分离尼莫克汀的方法,属于分离提取领域。
技术介绍
尼莫克汀(Nemadectin)是一种十六元大环内酯类抗生素,由蓝灰链霉菌Streptomycescyaneogriseussp.Noncyanogenus经发酵过程生产,其结构式为:作为米尔贝霉素族的一员,表现出很好的抗寄生虫活性。作为抗寄生虫抗生素,尼莫克汀具有杀虫谱广,易降解,低残留,无抗药性,对人畜安全,尼莫克汀主要用于合成活性更强的农药兽药莫西克汀(Moxidectin)。上世纪70年代,日本Sankyo公司最早发现了米尔贝霉素类化合物。二十世纪80年代中期,以尼莫克汀为底物合成的莫西菌素开始作为兽用驱虫药使用,目前在日本已经商品化。目前国内外对尼莫克汀的分离纯化主要采用大孔树脂吸附、一次性硅胶分离和有机溶剂结晶等三种方法。其中大孔树脂吸附和一次性硅胶分离两种方法:树脂和硅胶的前期预处理要消耗大量的酸碱溶液;在洗脱过程中有机溶剂使用量大,有机溶剂回收条件要求高,上样量小,收率低,成本高。有机溶剂结晶方法:有机溶剂使用量大,并且是多种有机溶剂混合使用,有机溶剂回收困难,成本高。本专利技术采用的利用制备色谱分离尼莫克汀的方法,使用的有机溶剂少,操作简单,不产生环境污染,所得到的尼莫克汀纯度高,开辟了一种全新的尼莫克汀分离纯化的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于:提供一种用制备色谱分离尼莫克汀的方法。解决现有技术中尼莫克汀分离纯化过程中因使用大孔树脂、硅胶或有机溶剂结晶而产生大量废水和有机溶剂,污染环 ...
【技术保护点】
一种用制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法,其特征在于:所述方法步骤如下:S1:过滤:将尼莫克汀发酵液板框过滤,得到湿菌渣;S2:萃取:将湿菌渣中加入有机溶剂,过滤得到尼莫克汀提取液;S3:真空浓缩:将提取液放在温度60‑80℃、真空度‑0.075‑0.095mpa下浓缩至固含量35%‑45%,加入非水溶性有机溶剂溶解;S4:静止分层:将步骤3的溶液放在室温环境,静置4小时,收集非水溶性有机溶剂层;S5:脱色:加入活性炭、无水硫酸钠进行脱色处理;S6:抽滤、真空浓缩:利用真空泵进行抽滤,将抽滤后的提取液放在温度60‑80℃、真空度‑0.085‑0.095mpa下进一步浓缩至固含量为30‑40%;S7:溶解:将浓缩后的提取液于有机溶剂按质量g与体积比ml为1∶3的比例混合,并不断搅拌,直至溶解;S8:制备色谱分离;所述制备色谱的填料为C18,粒径为10um,柱直径为10cm,高度为30cm,填料装量为1.2kg,上样量为填料重量的1.6%,流动相为甲醇:水体积比=79∶21,检测波长为254nm,保留时间为120min,泵流速为240ml/min。
【技术特征摘要】
1.一种用制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法,其特征在于:所述方法步骤如下:S1:过滤:将尼莫克汀发酵液板框过滤,得到湿菌渣;S2:萃取:将湿菌渣中加入有机溶剂,过滤得到尼莫克汀提取液;S3:真空浓缩:将提取液放在温度60-80℃、真空度-0.075-0.095mpa下浓缩至固含量35%-45%,加入非水溶性有机溶剂溶解;S4:静止分层:将步骤3的溶液放在室温环境,静置4小时,收集非水溶性有机溶剂层;S5:脱色:加入活性炭、无水硫酸钠进行脱色处理;S6:抽滤、真空浓缩:利用真空泵进行抽滤,将抽滤后的提取液放在温度60-80℃、真空度-0.085-0.095mpa下进一步浓缩至固含量为30-40%;S7:溶解:将浓缩后的提取液于有机溶剂按质量g与体积比ml为1∶3的比例混合,并不断搅拌,直...
【专利技术属性】
技术研发人员:生英涛,方明山,储消和,余炜,王鸿,吴黎诚,徐顺清,沈建,陈万河,程跃,
申请(专利权)人:浙江工业大学,浙江绿创生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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