用于改善的侧向流动测定法的单一垫条制造技术

本发明专利技术涉及一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法的条。本发明专利技术的条由下列各项组成：用血液裂解剂预处理的单一垫；和以干形式沉积的底物；其中底物是测定混合物，其包含葡萄糖‑6‑磷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、氢化物或电子转移剂及其混合物；其中底物包含指示剂，指示剂是染料化合物；其中条能通过分析物或血红蛋白组分的差别迁移而将存在于被测定的血液样品中的分析物或反应所得物与血红蛋白分离；其中血红蛋白组分比反应所得物迁移得更快；其中反应所得物是通过分析物和底物之间反应生成的反应产物；和其中血液样品中的红细胞通过与血液裂解剂接触而裂解。

【技术实现步骤摘要】
用于改善的侧向流动测定法的单一垫条本申请是申请日为2012年7月20日专利技术名称为“用于改善的侧向流动测定法的单一垫条及使用其的测试装置”的申请号为201280043565.7的专利技术专利申请的分案申请。对相关申请的交叉引用本申请要求2011年7月22日提交的美国临时专利申请流水号61/510,762的优先权权益，其内容通过提及并入本文。
本申请涉及生物学标本检测领域，具体地涉及一种用于改善的侧向流动测定法的单一垫条。
技术介绍
在护理点(POC)实施的测试已经不仅在健康护理设施，包括医院和医生诊所中，而且还在其它临床位置，包括工作场所或远程现场位置中变成常见且非常有用的诊断工具。由于测试的紧迫和目的，简单且有效的测试装置和以成本和时间有效的方式获得结果的方法是很想要的。更具体而言，在非健康护理设施中，诸如在用于快速增长的流行性疾病的远程现场临床位置测试，用于战场的生物战试剂的测试，用于污染物的环境测试，或用于药物滥用的工作场所测试中的测试需要简单且容易实施。有时，由于这些测试经常由具有很少(若有的话)临床诊断学培训的个体实施，这些护理测试点需要是简单的，快速的，且容易使用的。此外，环境中需要对贮存条件诸如温度或湿度没有大量控制的装置。如此，理想地，用于护理测试点点的装置需要最小量的设备，并且装置内体现的测试方法在对于严格环境条件，包括温度或湿度稳定时会是想要的。随着不断需要用于不断增加的目的和变化环境的护理测试点，本领域中仍然需要提供用于以成本和时间有效的方式实施用于生物学标本的测试的方法和装置。
技术实现思路
在一个实施方案中，本专利技术提供了一种用于侧向流动测定法的基于单一垫(single-pad)的条，其中样品应用(样品)区和反应物-所得物区(reactant-resultantzone)(在那里沉积有反应混合物(反应物))均在同一平面的、单一的、单垫上(asingle,one-pad)。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法(enzyme-driven,lateralchromatographicflowassay)的条，其由下列各项组成：单一垫；和以干形式(dryform)沉积的底物。在又一个实施方案中，本专利技术提供了一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法(assay)，其包括：(a)提供包含条的测试装置，所述条由下列各项组成：(i)单一垫；和(ii)以干形式沉积的底物；(b)对其中沉积有所述底物的所述单一垫应用样品；(c)容许所述样品流过消化垫以到达所述底物；(d)容许所述样品与所述底物起反应以产生应答；并(e)鉴定并解读所述应答以指示所述样品中所述分析物的存在或浓度。在别的实施方案中，本专利技术提供了一种用于检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)存在的酶驱动的侧向层析流动测定法，其包括：(a)提供包含单一垫条的测试装置，所述单一垫条包含：(i)用裂解缓冲液处理的消化单一垫；(ii)测定混合物，其包含葡萄糖-6-磷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、氢化物或电子转移剂及其混合物；和(iii)四唑盐，(b)在所述消化单一垫上应用样品；(c)容许所述样品流过所述消化垫以接触所述测定混合物；(d)容许所述样品与所述测定混合物起反应以产生应答，并(e)鉴定并解读(interprete)所述应答以指示所述样品中所述分析物的存在或浓度。在另一个实施方案中，本专利技术基于干形式测定法，其中样品应用区中应用的样品通过毛管力(capillaryforce)行进至反应区，而应用区和反应区在同一平面上。反应物含有组分的组合，包括引发颜色反应并且以干形式沉积的组合物和酶。在本专利技术中，样品行进至反应物区，并且与反应物混合。由于样品与反应物混合，所得的组合物会缓慢迁移并且在反应物-所得物区上保留，而样品中的其它组分，诸如血红蛋白比所得的组合物更快移动，并且通过诸如毛管力继续行进以与期望的所得物分开。在与含有分析物的样品起反应后，反应物结果区会呈现指示剂，诸如颜色的结果。所得物的保留和样品的其它组分的继续毛细管移动会消除其它组分，诸如血红蛋白的任何干扰，并且改善结果的鉴定。样品在样品(诸如血液)或另外应用有样品的缓冲溶液中含有的液体中通过毛管力行进。在一个实施方案中，本专利技术提供了用于护理测试点的单垫条上干形式测定法中的快速诊断测试(RDT)。单垫上的侧向层析提供了稳定的测试，简单的方法及快速的测试结果。在另一个实施方案中，本专利技术提供了层析方法，其中在固相上使用差别层析将血红蛋白与分析物分开。血红蛋白的颜色经常干扰红细胞中分析物的颜色反应的视觉读出。本专利技术提供了侧向层析方法，其中样品的差别迁移由于大小差异、粘度、分析物与反应物的沉淀、通过充满会与分析物起反应的试剂的多孔基质的电荷差异而发生。本专利技术的优点包括容易且简单过程的能力，和没有血红蛋白干扰的清楚视觉读出。贯穿本申请，以下术语具有下文所列的意义。“生物学材料”、“生物学样品”或“样品”指从脊椎动物提取的流体或组织，诸如全血、血清、血浆、唾液、尿液和脑脊液。“分析物”指生物学材料、生物学样品、或样品中含有作为测定法的目的以鉴定结果诸如存在、缺乏或浓度之一的比活的某种组分。除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语与本专利技术所属领域普通技术人员的通常理解具有相同的意义。虽然与本文中描述的方法和材料相似或等同的方法和材料可以在本专利技术的实施或测试中使用，但是下文描述了合适的方法和材料。本文中提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献通过提及完整并入。在冲突的情况中，应以本说明书，包括定义为准。另外，材料、方法和例子仅是例示性的而不意图为限制性的。本专利技术的其它特征和优点从以下专利技术详述及从权利要求书看会是显而易见的。附图说明图1提供了与常规两垫条相比本专利技术的单垫条(one-padstrip)的结构。图2提供了在G6PD缺乏测试方面本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的视觉比较测试结果。通过图中提供的得分测量视觉颜色鉴定强度。图3提供了对G6PD测试使用酶测定法得到的本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的信号强度比较测试结果。通过图中提供的得分测量视觉颜色鉴定强度。图4提供了在乳酸脱氢酶测试方面本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的视觉比较测试结果。图5提供了对乳酸脱氢酶测试使用酶测定法得到的本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的信号强度比较测试结果。通过aQzen阅读器测量视觉颜色鉴定的强度。图6提供了在乙醇(alcohol)测试方面本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的视觉比较测试结果。图7提供了对醇脱氢酶测试使用酶测定法得到的本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的信号强度比较测试结果。通过aQzen阅读器测量视觉颜色鉴定的强度。图8提供了对乳酸脱氢酶测试使用酶测定法得到的本专利技术的单垫条与常规两垫条之间的信号强度比较测试结果。通过图中提供的得分测量视觉颜色鉴定强度。具体实施方式本专利技术提供了一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法的条，其由下列各项组成：单一垫；和以干形式沉积的底物。在一个实施方案中，本专利技术的单一垫是用裂解缓冲液，诸如氯化镁预处理的消化垫。在另一个实施方案中，分析物选自人和动物流体中的蛋白质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法的条，其由下列各项组成：用血液裂解剂预处理的单一垫；和以干形式沉积的底物；其中所述底物是测定混合物，其包含葡萄糖‑6‑磷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、氢化物或电子转移剂及其混合物；其中所述底物包含指示剂，所述指示剂是染料化合物，所述染料化合物选自下组：TTC(四唑，氯化四唑或2,3,5‑三苯基‑2H‑氯化四唑)、INT(2‑(4‑碘苯基)‑3‑(4‑硝基苯基)‑5‑苯基‑2H‑氯化四唑)、MTT(3‑(4,5‑二甲基‑2‑噻唑基)‑2、5‑二苯基‑2H‑溴化四唑)、XTT(2,3‑二‑(2‑甲氧基‑4‑硝基‑5‑磺苯基)‑2H‑四唑‑5‑甲酰苯胺)、NBT(硝基蓝四唑)、MTS(3‑(4,5‑二甲基噻唑‑2‑基)‑5‑(3‑羧基甲氧基苯基)‑2‑(4‑磺苯基)‑2H‑四唑)、和DCPIP(2,6‑二氯靛酚)其中所述条能通过所述分析物或血红蛋白组分的差别迁移而将存在于被测定的血液样品中的所述分析物或反应所得物与血红蛋白分离；其中所述血红蛋白组分比所述反应所得物迁移得更快；其中所述反应所得物是通过所述分析物和所述底物之间反应生成的反应产物；和其中所述血液样品中的红细胞通过与血液裂解剂接触而裂解。...

【技术特征摘要】
2011.07.22 US 61/510,7621.一种用于预先选择的分析物的酶驱动的侧向层析流动测定法的条，其由下列各项组成：用血液裂解剂预处理的单一垫；和以干形式沉积的底物；其中所述底物是测定混合物，其包含葡萄糖-6-磷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、氢化物或电子转移剂及其混合物；其中所述底物包含指示剂，所述指示剂是染料化合物，所述染料化合物选自下组：TTC(四唑，氯化四唑或2,3,5-三苯基-2H-氯化四唑)、INT(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基-2H-氯化四唑)、MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2、5-二苯基-2H-溴化四唑)、XTT(2,3-二-(2-甲氧基-4-...

【专利技术属性】
技术研发人员：金贤淑，具泰希，崔永镐，
申请(专利权)人：阿赛斯生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US