接骨木中总单倍木脂素的提取方法技术

本发明专利技术提供了一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，包括：提供接骨木茎枝，将接骨木茎枝干燥处理后切碎，得到接骨木茎枝碎料；将接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，获得煎煮液；将煎煮液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩液；在第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，使得混合液中乙醇的百分体积含量为68‑72％，静置12‑16小时后离心处理，收集上清液；将上清液进行减压浓缩，得到第二浓缩液；将第二浓缩液进行大孔树脂梯度洗脱，其中，大孔树脂采用HP20大孔树脂，用量为第二浓缩液质量的10‑12倍，洗脱方法为：依次用水、30％乙醇‑水、50％乙醇‑水及95％乙醇‑水洗脱，收集50％乙醇‑水洗脱馏分，减压蒸馏得到总单倍木脂素。

Extraction method of total lignans in Elderwood

The invention provides a method for the extraction of total lignans in the Elderwood, including: providing the stem and branch of the Elderwood, cutting the stem and branch of the Elderwood, and chopping the stem and branch of the Elderwood. A mixture of ethanol is added to the first concentration liquid to form a mixture of ethanol, which makes the content of ethanol in the mixture of 68 and 72%, and then centrifuge and collect the supernatant after 12 hours for 16 hours. The supernatant is decompressed and concentrated to get second concentration liquid; the second concentrated solution is eluted with large Kong Shuzhi gradient, among which, macroporous tree The HP20 macroporous resin was used, the dosage was 10 of the second concentration, and the elution method was to remove the water, 30% ethanol water, 50% ethanol water and 95% ethanol, and collect the distillate from 50% ethanol, and the total lignans were obtained by vacuum distillation.

【技术实现步骤摘要】
接骨木中总单倍木脂素的提取方法
本专利技术属于活性化合物提取分离
，尤其涉及一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法。
技术介绍
骨质疏松是导致骨折风险增加的骨病。在骨质疏松中，骨矿物质密度(BMD)降低，骨微结构被破坏，并且骨中的非胶原蛋白的量和多样性改变。世界卫生组织将(女性中的)骨质疏松定义为比骨量峰值(30岁健康女性的平均值)低2.5个标准差的骨矿物质密度。目前，市场上治疗骨质疏松的药物五花八门，而主导的抗骨质疏松药物仍然是化学合成药。但化学合成药由于副作用多、远期疗效不肯定、价格昂贵、耐受性差、且有些药物不适用于老年人等，长期应用仍有争议。中药治疗骨折及骨相关疾病已有两千多年的历史，早在《内经》中就有“腰痛”、“骨伤”、“痹证”、“痿证”等的相关记载。《素问·萎论》明确提出“肾气热，则腰脊不能举，骨枯而髓减，发为骨痿”。结合临床应用及现代药理、药效、分子生物学等研究手段，很多补肾壮骨中药(如淫羊藿、骨碎补、续断、蛇床子、补骨脂、杜仲、山茱萸等)已被证明在整体动物或细胞水平上有治疗骨质疏松的活性。但是中药抗骨质疏松药物给药剂量大、生产成本高。目前为止，只有贵州同济堂研发的复方中药仙灵骨葆收载入了国家基础药物目录，每年的销售额达4亿元。因此，从中药中研发治疗骨质疏松的药物，即具有深厚的历史研究背景，也有广阔的市场应用前景接骨木为忍冬科植物接骨木(SambucuswilliamsiiHance)的茎枝，别名续骨木、接骨草等，分布于东北、华北等地区，根及根皮、叶、花均供药用。作为民间常用中药，接骨木药用历史悠久，具有接骨续筋，活血止痛，祛风利湿的作用，主要用于治疗骨折、跌打损伤、风湿性关节炎、痛风、大骨节病等。据《本草新编》记载：“接骨木，入骨节，专续筋接骨”，“尤以接骨为奇”，此外，《唐本草》、《千金翼方》、《采药书》、《百草镜》、《品汇精要》等本草对接骨木也有相应的记载。接骨木化学成分复杂，包括单倍木脂素类、倍半木脂素类，环烯醚萜类、三萜类、黄酮类、酚酸类、脂质类等多种成分，研究表明接骨木具有抗骨质疏松、促进骨折愈合、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗衰老、增强记忆等活性，而发挥抗骨质疏松作用的主要活性成分为单倍木脂素类化合物。文献对接骨木的提取分离有不少报道，但现有提取工艺要么针对黄酮或青花素进行提取分离，要么就接骨木的整体活性成分进行提取，其重点并不在于单倍木脂素类成分的提取。因此，如何提供一种能够有效提取接骨木中单倍木脂素类化合物的方法显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，旨在解决现有技术没有提供一种针对接骨木中的总单倍木脂素整体成分进行提取分离的问题。本专利技术是这样实现的，一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，包括以下步骤：提供接骨木茎枝，将所述接骨木茎枝干燥处理后切碎，得到接骨木茎枝碎料；将所述接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，获得煎煮液；将所述煎煮液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩液；在所述第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，使得所述混合液中乙醇的百分体积含量为68-72％，静置12-16小时后离心处理，收集上清液；将所述上清液进行减压浓缩，得到第二浓缩液；将所述第二浓缩液进行大孔树脂梯度洗脱，其中，大孔树脂采用HP20大孔树脂，用量为所述第二浓缩液质量的10-12倍，洗脱方法为：依次用水、30％乙醇-水、50％乙醇-水及95％乙醇-水洗脱，收集50％乙醇-水洗脱馏分，减压蒸馏得到总单倍木脂素。本专利技术提供的接骨木中总单倍木脂素的提取方法，采用水提醇沉及大孔树脂梯度洗脱的方法来提取接骨木中的单倍木脂素，可以高效的摈除接骨木活性部位中无活性或活性较低的倍半木脂素、二倍木脂素、三萜类等成分，高效提取接骨木中的总单倍木脂素；且本专利技术提供的方法不需要使用精细的大型制备仪器，不仅可以减少原料的损耗，而且适合于工业大生产，降低了乙醇的使用量，有利于成本的控制。通过本专利技术方法提取得到的单倍木脂素提取物，所含成分种类单一，单倍木脂素含量高达62％，符合中药五类申报标准。此外，该部位干燥后为松散的颗粒状粉末，物理状态较好，易于制备药剂。附图说明图1是本专利技术实施例与对比例的馏分进行HPLC检测时，UV280nm下的对比图；图2是本专利技术实施例与对比例的馏分进行HPLC检测时，ELSD对比图。具体实施方式为了使本专利技术要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术实施例提供了一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，包括以下步骤：S01.提供接骨木茎枝，将所述接骨木茎枝干燥处理后切碎，得到接骨木茎枝碎料；S02.将所述接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，获得煎煮液；将所述煎煮液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩液；S03.在所述第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，使得所述混合液中乙醇的百分体积含量为68-72％，静置12-16小时后离心处理，收集上清液；将所述上清液进行减压浓缩，得到第二浓缩液；S04.将所述第二浓缩液进行大孔树脂梯度洗脱，其中，大孔树脂采用HP20大孔树脂，用量为所述第二浓缩液质量的10-12倍，洗脱方法为：依次用水、30％乙醇-水、50％乙醇-水及95％乙醇-水洗脱，收集50％乙醇-水洗脱馏分，减压蒸馏得到总单倍木脂素。具体的，上述步骤S01中，所述接骨木茎枝，可以通过购买得到接骨木后，自行获取茎枝部分。不同产地的接骨木样品存在成分差异，本专利技术实施例优选采用东北地区产的接骨木作为原料，其单倍木脂素含量相对较高，当然，不限于此。将所述接骨木茎枝进行干燥处理，所述干燥处理的方式没有明确的限制，可以自然晾干，也可以采用其他常规的温和干燥处理方法，如烘房中干燥。干燥完后将所述接骨木茎枝进行切碎处理，以利用后续水提过程中活性物质的充分高效浸出。上述步骤S02中，有别于通常对接骨木进行的乙醇热回流提取，本专利技术实施例将所述接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，充分提取出其单倍木脂素成分，当然，应当理解，不可避免地会将木脂素中的其他成分提取出来。所述煎煮处理，不仅可以避免乙醇热回流提供的高成本和易爆炸的安全隐患，还可以避免提取出接骨木中极性相对较小的三萜苷元类、多倍木脂素等成分，从而降低后续提取的难度，提高得到的总单倍木脂素的纯度。优选的，所述煎煮处理的方法为：将所述接骨木茎枝碎料浸于8-10倍体积的水中，90-100℃煎煮2-3小时，煎煮两次，合并煎煮液。该优选的煎煮处理，可以在将所述接骨木茎枝碎料中的单倍木脂素充分提取的前提下，减少其他难分离成分的浸出，降低后续提取的难度，更好地提高得到的总单倍木脂素的纯度。具体优选的，为了节约时间和溶剂，将所述接骨木茎枝碎料浸于8倍体积的水中，90-100℃煎煮2小时，煎煮两次，合并煎煮液。将所述煎煮液进行减压浓缩处理得到第一浓缩液，优选的，所述第一浓缩液的相对密度为1.15-1.25。优选的相对密度的所述第一浓缩液，既能有效保证提取液不粘壁，避免造成浪费，又能保证适于后续醇提的含水量，以利于提高后续醇提效率。上述步骤S03中，在所述第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，进一步的，对混合液依次进行静置、离心处理，除去部分不溶于醇的杂质，提高提取液的纯度。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，包括以下步骤：提供接骨木茎枝，将所述接骨木茎枝干燥处理后切碎，得到接骨木茎枝碎料；将所述接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，获得煎煮液；将所述煎煮液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩液；在所述第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，使得所述混合液中乙醇的百分体积含量为68‑72％，静置12‑16小时后离心处理，收集上清液；将所述上清液进行减压浓缩，得到第二浓缩液；将所述第二浓缩液进行大孔树脂梯度洗脱，其中，大孔树脂采用HP20大孔树脂，用量为所述第二浓缩液质量的10‑12倍，洗脱方法为：依次用水、30％乙醇‑水、50％乙醇‑水及95％乙醇‑水洗脱，收集50％乙醇‑水洗脱馏分，减压蒸馏得到总单倍木脂素。

【技术特征摘要】
1.一种接骨木中总单倍木脂素的提取方法，包括以下步骤：提供接骨木茎枝，将所述接骨木茎枝干燥处理后切碎，得到接骨木茎枝碎料；将所述接骨木茎枝碎料进行煎煮处理，获得煎煮液；将所述煎煮液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩液；在所述第一浓缩液中加入乙醇形成混合液，使得所述混合液中乙醇的百分体积含量为68-72％，静置12-16小时后离心处理，收集上清液；将所述上清液进行减压浓缩，得到第二浓缩液；将所述第二浓缩液进行大孔树脂梯度洗脱，其中，大孔树脂采用HP20大孔树脂，用量为所述第二浓缩液质量的10-12倍，洗脱方法为：依次用水、30％乙醇-水、50％乙醇-水及95％乙醇-水洗脱，收集50％乙醇-水洗脱馏分，减压蒸馏得到总单倍木脂素。2.如权利要求1所述的接骨木中总单倍木脂素的提取方法，其特征在于，所述煎煮处理的方法为：将所述接骨木茎枝碎料浸于8-10倍体积的水中，90-100℃煎煮2-3小时，煎煮两次，合并煎煮液。3.如权利要求1所述的接骨木中总单倍木脂素的提取方法，其特征在于，所述第一浓缩液的相对密度为1.15-1.25。4.如权利要求1所述的接骨木中总单倍木脂素的提取方法，其特征在于，在所述第一浓缩液中加入乙醇形...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖辉辉，姚新生，黄文秀，戴毅，
申请(专利权)人：香港理工大学深圳研究院，暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44