槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用及治疗宫颈癌药物制造技术

本发明专利技术涉及药物领域，具体涉及槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用治疗宫颈癌药物。本发明专利技术分析了槲皮素与乌头碱联用时的相互作用，发现同时应用这两种药物在很宽的效应范围内存在着协同效应。提示在人宫颈癌的治疗中，将槲皮素和乌头碱联用，即可减少槲皮素和乌头碱的剂量，又能够增加治疗宫颈癌的效果，同时还能减轻病人的疼痛感。

Combination of quercetin and aconitine for preparation of drugs for cervical cancer and treatment of cervical cancer drugs

The invention relates to the field of medicine, in particular to the combination of quercetin and aconitine for preparing cervical cancer drugs for the treatment of cervical cancer drugs. The interaction between quercetin and aconitine is analyzed. It is found that synergistic effects exist between the two drugs in a wide range of effects. It is suggested that the combination of quercetin and aconitine can reduce the dosage of quercetin and aconitine in the treatment of human cervical cancer, and it can also increase the effect of treating cervical cancer and reduce the pain of the patients.

【技术实现步骤摘要】
槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用及治疗宫颈癌药物
本专利技术涉及药物领域，具体涉及槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用治疗宫颈癌药物。
技术介绍
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，到目前为止宫颈癌对大多数抗癌药物不敏感，化疗的有效率不超过15％。寻找有效的低毒或无毒的治疗宫颈癌的药物显得更为紧迫。槲皮素是黄酮类化合物中的典型代表物，是植物界中分布最广泛的黄酮类化合物，其具有抗氧化、抗菌消炎、保护肝肾和心血管及止腹泻等作用。乌头碱是存在于川乌、草乌、附子等植物中的主要有毒成份，具有镇痛作用。然而槲皮素是否能与乌头碱协同抑制人宫颈癌HeLa细胞还尚不清楚。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供槲皮素和乌头碱联合用药在治疗人宫颈癌药物中的应用。根据本专利技术的具体实施方式，本专利技术提供了槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用。根据本专利技术的具体实施方式，本专利技术提供了槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用，其中，槲皮素和乌头碱的用量比为1:1。根据本专利技术的具体实施方式，本专利技术提供了治疗宫颈癌的药物，其包含槲皮素和乌头碱。根据本专利技术的具体实施方式，所述治疗宫颈癌的药物包含1:1的槲皮素和乌头碱。根据本专利技术的具体实施方式，槲皮素和乌头碱联合用药对人宫颈癌HeLa细胞增殖的实验结果表明，槲皮素单用时对人宫颈癌HeLa细胞的半抑制浓度为55.99±1.21μg/mL；乌头碱单用时对人宫颈癌HeLa细胞的半抑制浓度为71.89±0.98μg/mL；槲皮素和乌头碱联用时对人宫颈癌HeLa细胞的半抑制浓度为44.08±0.68μg/mL。因此，槲皮素和乌头碱这两种药物在很宽的效应范围内存在着协同效应。本专利技术分析了槲皮素与乌头碱联用时的相互作用，发现同时应用这两种药物在很宽的效应范围内存在着协同效应。提示在人宫颈癌的治疗中，将槲皮素和乌头碱联用，即可减少槲皮素和乌头碱的剂量，又能够增加治疗宫颈癌的效果，同时还能减轻病人的疼痛感。附图说明图1显示了槲皮素对人宫颈癌HeLa细胞生长抑情况，其中C为阳性对照药物喜树碱，浓度为10μg/mL。图2显示了乌头碱对人宫颈癌HeLa细胞生长抑情况，其中C为阳性对照药物喜树碱，浓度为10μg/mL。图3显示了槲皮素和乌头碱联合用药对人宫颈癌HeLa细胞生长抑情况，其中C为阳性对照药物喜树碱，浓度为10μg/mL。图4显示了中位效应法判断槲皮素和乌头碱联合用情况。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本专利技术的保护范围。如无特殊说明，本专利技术中所使用的试剂为常规试剂；如无特殊说明，所使用的方法为常规方法。槲皮素和乌头碱购自从中国食品药品检定研究院。实施例1槲皮素和乌头碱联合用药抑制HeLa细胞增殖一、MTT法检测细胞增殖用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖作用。取对数生长期的细胞接种于96孔培养板,每孔100μL,37℃,5％CO2培养箱中培养。24h后加入不同浓度的药物。槲皮素终浓度分别为1.56，3.12，6.25，12.5，25，50，100μg/mL；乌头碱终浓度分别为1.56，3.12，6.25，12.5，25，50，100μg/mL；两药联用时的浓度比例为1:1，两药联用时的终浓度为3.12，6.25，12.5，25，50，100，200μg/mL。培养48h后，弃去培养液，每孔加入MTT(5mg/mL)10μL,继续培养4h；弃上清,每孔加二甲基亚砜100μL，避光振荡10min,使MTT结晶物充分溶解。选择490nm波长测定各孔吸光值A,用下列公式计算细胞的增殖抑制率。细胞增殖抑制率％＝(1-实验组A平均数/对照组A平均数)×100％(1)结果如附图1、图2和图3所示，槲皮素、乌头碱单用及两药联用时，随着药物浓度的增加，其抑制人宫颈癌HeLa细胞的作用也逐渐增强，即药物浓度与效应成正比。二、中位效应法判断槲皮素和乌头碱联和用药对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响应用中位效应法来判定两种药物的联合作用。该方法首先需要绘出两种药物单独应用和联合应用时的剂量效应曲线，按中效方程式，计算出不同抑制率时两药单用、合用的浓度，公式如下：D＝Dm[fa/(1-fa)]1/m(2)式中D为药物浓度，Dm是中效剂量，fa为细胞增殖抑制率，m为斜率，两种药物的联合作用指数(combinationindex，CI)的计算公式为(Dx)1和(Dx)2为两种药物单独应用产生x％细胞增殖抑制率时所需的浓度，(D)1和(D)2为两种药物合用产生相同的x％细胞增殖抑制率时各自所需要的浓度。当两种药物的相互作用为非排斥性时α＝1，当两种药物的相互作用为排斥性时α＝0。(Dx)1和(Dx)2可依照公式(2)求得，而(D)1和(D)2可以根据两药联合应用时所采用的固定配比(P/Q)而依照下列公式求得：(D)1＝(Dx)1，2×P/(P+Q)(4)(D)2＝(Dx)1，2×Q/(P+Q)(5)公式中(Dx)1，2为两种药物联合应用时产生x％细胞增殖抑制率时所需的浓度，可根据公式(2)求出。根据公式(3)求出的CI值如果CI＜1，认为两种药物的联合作用为协同效应；如果CI＞1，认为两种药物呈现拮抗作用；如果CI＝1，则认为两种药物的联合作用为相加作用。所得数据均输入Excel软件中进行分析处理。结果如表1所示，槲皮素联合乌头碱对人宫颈癌HeLa细胞生长抑制的效果较单药好。按两药的合用比例(1:1)可分别计算出两药联用后的中效浓度，槲皮素为22.04μg/mL，较单用时的中效浓度减小了60.63％，乌头碱为22.04μg/mL，较单用时的中效浓度减小了69.34％。表1两药单用及联用时的中效浓度(μg/mL)和斜率结果如附图4所示，从两种药物的量效曲线图可看出，当fa＝0.6，CI＝1，说明两种药在该效应时其相互作用为相加。当两药小剂量(小于于IC60)联用时，呈现协同作用(CI＜1)；而两药的大剂量(大于IC60)联用时，呈现拮抗作用(CI＞1)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用。

【技术特征摘要】
2017.03.08 CN 20171013298801.槲皮素和乌头碱联合用于制备治疗宫颈癌药物的应用。2.根据权利要求1所述的应用，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨培龙，李秀梅，张同存，石冬冬，刘婧，闻治国，牛灿芳，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11