一种蜈蚣多肽SLP_SsTx及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种蜈蚣多肽SLP_SsTx及其编码基因和应用，属于生物医学技术领域。本发明专利技术提供了一种蜈蚣多肽SLP_SsTx，所述蜈蚣多肽SLP_SsTx的氨基酸全序列为如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术提供的蜈蚣多肽SLP_SsTx具有抑制KCNQ家族通道并介导心血管系统、神经系统和呼吸系统的功能，能作为探究KCNQ通道探针模板和解释蜈蚣叮咬临床症状，进一步开发缓解蜈蚣叮咬药物模板的应用。

A centipede polypeptide SLP_SsTx and its coding gene and Application

The invention relates to a centipede polypeptide SLP_SsTx, its coding gene and application, and belongs to the field of biomedicine technology. The invention provides a centipede polypeptide SLP_SsTx, and the complete amino acid sequence of the centipede polypeptide SLP_SsTx is shown as SEQ ID NO.1. The centipede polypeptide SLP_SsTx provided by the present invention has the function of inhibiting the KCNQ family channel and mediating the cardiovascular system, the nervous system and the respiratory system. It can be used as a template for exploring the KCNQ channel probe and explaining the clinical symptoms of the centipede bites, and further developing the application of the drug template to alleviate the centipede bite.

【技术实现步骤摘要】
一种蜈蚣多肽SLP_SsTx及其编码基因和应用
本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种蜈蚣多肽SLP_SsTx及其编码基因和应用。
技术介绍
少棘蜈蚣是我国的一种传统中药，有败毒抗癌、息风解痉之功效。少棘蜈蚣(S.subspinipesmutilansL.Koch)是模棘蜈蚣的近似种，主要分布于中国和日本，在我国长江中下游常见。蜈蚣的第一对脚经过长期的进化，形成钩状、锐利、钩端有毒腺口、外有坚硬的甲壳质包裹的螯。蜈蚣的毒螯中有用于分泌和储存毒液的毒腺，毒腺呈囊泡状分布，周围的小泡可以理解为亚毒腺，这有利于毒腺细胞在胞外寻求更大的贮藏毒液的空间。蜈蚣毒素是指毒腺分泌的无色透明的黏稠液体,注入猎物体内能使其麻痹甚至死亡。它们已经进化出适应捕食猎物的能力，如鱼类、昆虫、爬行动物、软体动物、两栖动物、甚至哺乳动物都是它们的捕食对象(Undheim,E.A.,andKing,G.F.(2011)Onthevenomsystemofcentipedes(Chilopoda),aneglectedgroupofvenomousanimals.Toxicon57,512-524；Yang,S.,Liu,Z.,Xiao,Y.,Li,Y.,Rong,M.,Liang,S.,Zhang,Z.,Yu,H.,King,G.F.,andLai,R.(2012)Chemicalpunchpackedinvenomsmakescentipedesexcellentpredators.Molecular&cellularproteomics:MCP11,640-650)。被蜈蚣致伤后的特征主要有疼痛、烧灼感、痒、红斑、充血、发炎、发疱、皮下出血、水肿、表皮坏死和脱皮,严重者有头痛、恶心、呕吐、发热、心率和呼吸不规则、淋巴炎、组织坏死、血管痉挛和昏迷等,甚至导致死亡。有报道指出蜈蚣毒素也会导致横纹肌溶解症、心肌缺血，甚至心肌梗死(Yildiz,A.,Biceroglu,S.,Yakut,N.,Bilir,C.,Akdemir,R.,andAkilli,A.(2006)Acutemyocardialinfarctioninayoungmancausedbycentipedesting.Emergencymedicinejournal:EMJ23,e30)。尽管人们遇到蜈蚣并遭遇其伤害，但有关蜈蚣毒液的组成及作用机制却少有深入研究，毒液中存在什么物质能够产生上述阐述的生理反应？所以探究蜈蚣毒液的功能活性分子有助于我们理解临床症状的发病原因，发病机理，可以让我们有针对性的对蜈蚣叮咬进行干预，从而规避其伤害。国内外对蜈蚣毒的研究大多都停留在粗毒的研究水平上,对其有效成分以及药理学活性的研究仍有待于深入。蜈蚣毒液含有极其复杂的化学成分，主要可分为蛋白类和非蛋白类，蛋白质类可进一步分为酶类和非酶类。另外还含有大量的多肽类物质，这些多肽物质在蜈蚣捕食和防御过程中发挥重要作用。KCNQ钾通道是一种电压门控型(Kv)离子通道，该家族包括5个家族成员：KCNQ1-5。KCNQ1主要表达在外周组织和心脏，而KCNQ2-5在神经系统、肌肉系统和心血管系统等广泛表达。目前的研究发现，KCNQ的五个亚家族成员中，四个KCNQ通道的突变和疾病相关。其中KCNQ1的突变和长QT综合症相关，有些还伴随着耳聋，而长QT综合症最明显的表现是心电图QT间隔的延长，因此该突变还伴随着心律不齐和心源性猝死等。KCNQ2通道和KCNQ3的突变则会导致良性家族性婴儿惊厥，有些还伴随着外周神经的过度兴奋，而良性家族性婴儿惊厥一般在婴儿出生后2-4天，故又名“第三天惊厥”，有11％的患者会在以后出现癫痫等神经系统疾病(Bal,M.,Zhang,J.,Hernandez,C.C.,Zaika,O.,andShapiro,M.S.(2010)Ca2+/calmodulindisruptsAKAP79/150interactionswithKCNQ(M-Type)K+channels.TheJournalofneuroscience:theofficialjournaloftheSocietyforNeuroscience30,2311-2323；Brown,D.A.,andPassmore,G.M.(2009)NeuralKCNQ(Kv7)channels.Britishjournalofpharmacology156,1185-1195)。KCNQ4通道的突变则会引起先天性的耳聋，这是一种在婴儿出生时或者出生后出现的听力障碍。只有KCNQ5通道还未有报道和疾病相关，但是有报道指出KCNQ5和静息电位的形成相关(Brueggemann,L.I.,Haick,J.M.,Neuburg,S.,Tate,S.,Randhawa,D.,Cribbs,L.L.,andByron,K.L.(2014)KCNQ(Kv7)potassiumchannelactivatorsasbronchodilators:combinationwithabeta2-adrenergicagonistenhancesrelaxationofratairways.Americanjournalofphysiology.Lungcellularandmolecularphysiology306,L476-486)。鉴于KCNQ家族在负责氯化物分泌和心脏动作电位复极(KCNQ1)、冠状循环和反应性充血(KCNQ4)和大脑神经元兴奋(KCNQ2，3，4)等多种生理功能中发挥重要作用(Jentsch,T.J.(2000)NeuronalKCNQpotassiumchannels:physiologyandroleindisease.Naturereviews.Neuroscience1,21-30)，而蜈蚣叮咬的临床病例报告中描述的一些症状，例如组织坏死、血管痉挛、急性高血压和心肌缺血等(Undheim,E.A.,andKing,G.F.(2011)Onthevenomsystemofcentipedes(Chilopoda),aneglectedgroupofvenomousanimals.Toxicon57,512-524；Yildiz,A.,Biceroglu,S.,Yakut,N.,Bilir,C.,Akdemir,R.,andAkilli,A.(2006)Acutemyocardialinfarctioninayoungmancausedbycentipedesting.Emergencymedicinejournal:EMJ23,e30；Kuhn-Nentwig,L.(2003)Antimicrobialandcytolyticpeptidesofvenomousarthropods.Cellularandmolecularlifesciences:CMLS60,2651-2668；Ozsarac,M.,Karcioglu,O.,Ayrik,C.,Somuncu,F.,andGumrukcu,S.(2004)Acutecoronaryischemiafollowingcentipedeenve本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蜈蚣多肽SLP_SsTx，其特征在于，所述蜈蚣多肽SLP_SsTx的氨基酸全序列为如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种蜈蚣多肽SLP_SsTx，其特征在于，所述蜈蚣多肽SLP_SsTx的氨基酸全序列为如SEQIDNO.1所示。2.编码权利要求1所述蜈蚣多肽SLP_SsTx的基因，其特征在于，包括成熟肽部分相应基因和信号肽部分相应基因，所述蜈蚣多肽SLP_SsTx基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于，所述蜈蚣多肽SLP_SsTx成熟肽部分相应基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。4.编码权利要求2所述蜈蚣多肽SLP_SsTx的基因的扩增方法，包括以下步骤：1)以少棘蜈蚣毒液腺为模板，提取总RNA；2)从步骤1)得到的总RNA中对mRNA进行纯化，得到mRNA；3)将步骤2)得到的mRNA进行反转录，得到cDNA文库；4)以cDNA文库为模板，使用第一简并引物对进行蜈蚣多肽SL...

【专利技术属性】
技术研发人员：赖仞，杨仕隆，罗雷，
申请(专利权)人：中国科学院昆明动物研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53