一种聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用技术

技术编号:17793846 阅读:35 留言:0更新日期:2018-04-25 17:20
本发明专利技术属制药技术领域,具体涉及一种聚乙二醇‑去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用;聚乙二醇‑去氧胆酸衍生物的母核为聚乙二醇‑去氧胆酸,连接键是氧化还原敏感键、pH敏感键或酶易水解键,配体为疏水性聚氨基酸类化合物、生物相容性聚合物或难溶性抗癌药物;聚乙二醇‑去氧胆酸的制备方法为将去氧胆酸和4‑二甲氨基吡啶溶于无水二氯甲烷中得到去氧胆酸溶液,再取聚乙二醇溶于二氯甲烷中得到聚乙二醇溶液,然后将去氧胆酸溶液和聚乙二醇溶液逐滴滴加到反应瓶中,加入催化剂,反应后得到聚乙二醇‑去氧胆酸。本发明专利技术制备得到的聚乙二醇‑去氧胆酸及其衍生物拥有良好的抗多药耐药性,具有很好的应用前景。

Preparation and application of PEG deoxycholic acid and its derivatives

The invention belongs to the field of pharmaceutical technology, in particular to a preparation method and application of polyethylene glycol deoxycholic acid and its derivatives; the parent nucleus of the derivative of polyethylene glycol deoxycholic acid derivative is polyethylene glycol deoxycholic acid, the bonding key is a redox sensitive bond, a pH sensitive bond or an enzyme hydrolytic bond, and a ligand of hydrophobic polyamidic acid. Compounds, biocompatible polymers, or insoluble anticancer drugs; the preparation method of polyethylene glycol deoxycholic acid is to dissolve dioxycholic acid and 4 of two methylamino pyridine in anhydrous dichloromethane to obtain deoxycholic acid solution, and then take polyethylene glycol dissolved in dichloromethane to obtain polyglycol solution, and then deoxycholic acid solution and the solution of deoxycholic acid and then the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid and the solution of deoxycholic acid are then used. Polyethylene glycol solution was added to the reaction bottle by adding the catalyst. After that, polyethylene glycol deoxycholic acid was obtained. The prepared polyethylene glycol deoxycholic acid and its derivatives have good resistance to multidrug resistance and have good application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用
本专利技术属制药
,具体涉及一种聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用。
技术介绍
化疗是治疗癌症最常见的手段,但是化疗的效果会因为肿瘤细胞拥有抗耐药性而失败。多药耐药(MDR),是指肿瘤细胞对不同结构和作用机理的药物产生交叉耐受性,肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药是成为化疗成功的障碍。据不完全统计,90%以上的患者死因与多药耐药有关。MDR的产生的原因有很多,1976年juliano用中国仓鼠卵巢细胞使其对秋水仙碱耐药,首先揭示了MDR与细胞内药物浓度降低有关,并证实细胞内存在一种能量依赖性膜转运蛋白,P-gp作为一种ATP酶活性的跨膜泵或“换位酶”,将摄入细胞内的药物泵出,促使其外流而维持细胞内化疗药物的低浓度水平。因此P-gp的过度表达与肿瘤细胞的固有耐药性有关.目前临床上使用的抗癌药物,如阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素、柔红霉素、紫杉醇、长春新碱、顺铂、喜树碱类等,均为耐药肿瘤细胞所抗。肿瘤细胞获得的抗药性,并不针对一种抗癌药,而是对多种抗癌药,即多药耐药,要增加多药耐药肿瘤细胞对药物的敏感性,办法之一就是促进或抑制P-gp蛋白的功能,增加其蛋白表达量的比例,从而增强肿瘤细胞的凋亡,因此研制促进或抑制这些蛋白功能的药物对肿瘤的化疗有重要意义。
技术实现思路
针对现有技术中的不足,本专利技术提供一种聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用。本专利技术制备得到的聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物拥有良好的抗多药耐药性,通过体外肿瘤细胞实验验证其抗多药耐药效应,表明其在抗多药耐药研究中具有良好的应用前景。为了实现上述专利技术目的,本专利技术采用了以下技术方案:一种聚乙二醇-去氧胆酸(PEG-DCA),具有如下分子结构式:一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物,母核为聚乙二醇-去氧胆酸,连接键是氧化还原敏感键、pH敏感键或酶易水解键,配体为疏水性聚氨基酸类化合物、生物相容性聚合物或难溶性抗癌药物。优选地,所述氧化还原敏感键为二硫键和单硫键;所述pH敏感键为腙键或亚胺键;所述酶易水解键为酯键、酰胺键或短肽链;所述疏水性聚氨基酸类化合物为聚天冬氨酸苄酯、聚谷氨酸苄酯或聚丙氨酸;所述生物相容性聚合物为聚乳酸或聚己内酯;所述难溶性抗癌药物为紫杉醇、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素、柔红霉素、长春新碱、喜树碱类或多西他赛。优选地,所述二硫键为3,3’-二硫代二丙羧基。一种聚乙二醇-去氧胆酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将去氧胆酸和4-二甲氨基吡啶溶于无水二氯甲烷中得到去氧胆酸溶液,再取聚乙二醇溶于二氯甲烷中得到聚乙二醇溶液,然后将去氧胆酸溶液和聚乙二醇溶液逐滴滴加到反应瓶中,加入催化剂,反应后经过抽滤、萃取、真空干燥处理后得到聚乙二醇-去氧胆酸。一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)称取二硫代二丙酸酐0.5~2.5mmol置于装有25mL二氯甲烷的三颈瓶中,氮气保护下搅拌处理,直至二硫代二丙酸酐全部溶解,称取0.1~0.5mmol聚乙二醇-去氧胆酸和0.5mmolDMAP溶于二氯甲烷中得到混合液,将混合液逐滴滴加到三颈瓶中,然后加入三乙胺,反应处理,反应处理后得到中间产物;(2)称取中间产物0.1~0.5mmol,DMAP0.2~1.0mmol于100mL的茄型瓶中,加入5~50mL的无水二氯甲烷溶解,N2保护下搅拌均匀,然后加入0.05~0.5mmol疏水性聚氨基酸类化合物、生物相容性聚合物或难溶性抗癌药物和0.3~1.2mmolDCC,反应24~72h,反应结束后,抽滤,浓缩,乙醚沉淀,抽滤,真空干燥,得到聚乙二醇-去氧胆酸衍生物。优选地,所述步骤(1)中反应处理温度为25~60℃,反应处理时间为12~48h。优选地,所述步骤(2)中真空干燥温度为20~55℃。一种聚乙二醇-去氧胆酸应用于抗肿瘤多药耐药领域。一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物应用于抗肿瘤多药耐药领域。与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:本专利技术提供的聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物拥有很好的生物相容性,经过溶血实验、覆盖实验、动态凝血时间实验证明该观点。本专利技术提供的聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物拥有良好的抗多药耐药性,通过体外肿瘤细胞实验验证其抗多药耐药效应,表明其在抗多药耐药研究中具有良好的应用前景。附图说明图1为聚乙二醇-去氧胆酸的核磁图谱。图2为聚乙二醇-去氧胆酸的红外图谱。图3为聚乙二醇-去氧胆酸衍生物1的核磁图谱。图4为聚乙二醇-去氧胆酸衍生物1的红外图谱。图5为聚乙二醇-去氧胆酸衍生物2的核磁图谱。图6为聚乙二醇-去氧胆酸衍生物2的红外图谱。图7为聚乙二醇-去氧胆酸的动态凝血时间曲线图。图8为MTT法检测聚乙二醇-去氧胆酸与抗癌药联用的细胞死亡率图。具体实施方式下面通过具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本专利技术,而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件按照说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。实施例1称取去氧胆酸1mmol、DMAP1.5mmol于100mL的茄型瓶中,再加入40mL的无水二氯甲烷(CH2Cl2)常温搅拌30min,转速600r/min,再称取1.1mmol聚乙二醇溶于5mL的二氯甲烷中,然后将其逐滴滴加到反应瓶中,然后加入1.6mmol的DCC(二环己基碳二亚胺),常温下搅拌24h,反应结束后,抽滤,用0.5mol/L的盐酸萃取一次,再用饱和的食盐水萃取两次,有机层用无水硫酸镁(MgSO4)干燥,抽滤,旋蒸浓缩溶剂,无水乙醚进行沉淀,放置一夜,抽滤,于37℃真空干燥,得到聚乙二醇-去氧胆酸(PEG-DCA)。所得聚乙二醇-去氧胆酸的红外与1H核磁图分别见图1和图2,其化学结构如下:实施例21.3,3’-二硫代二丙酸酐的合成称取3,3’-二硫代二丙酸5g置于真空干燥箱中30℃干燥,另量取50mL乙酰氯于75℃下重新蒸出,蒸馏装置全程密封置于通风橱内,取出真空干燥后的3,3’-二硫代二丙酸,加入上述新蒸乙酰氯,70℃下回流2h,回流结束后减压蒸出多余的乙酰氯,剩余物加过量冰无水乙醚沉淀,置于冰箱下层-20℃冷冻过夜,次日抽滤,取沉淀物于真空干燥箱中45℃干燥10h。得浅黄至灰黄色片状固体,产率约60%。2.称取上述合成的3,3’-二硫代二丙酸酐1.07g(5.6mmol),置于100mL的圆底三颈烧瓶中,加入40mL无水DMF,室温下N2保护搅拌至完全溶解后,加入实施例1合成的PEG-DCA1.5922g(0.7mmol),完全溶解后再加入DMAP0.171g(1.4mmol),另用滴管吸取三乙胺约0.5mL加入其中,室温下继续反应8h,反应完毕后减压旋去溶剂,加入50mL的乙酸乙酯将其溶解完全,用0.5mol/L的稀盐酸洗2遍,饱和氯化钠溶液洗2遍,加无水硫酸镁干燥,密封放置2h使其完全干燥,抽滤除去无水硫酸镁,滤液浓缩后加冰无水乙醚沉淀,置冰箱下层冷冻过夜,抽滤,取沉淀物置真空干燥箱40℃下干燥12h以上,即得深棕色粉末状产物,产率约65%。3.正丙胺-聚天冬氨酸苄酯(nPBLA)的合成称取BLA-NCA2.本文档来自技高网...
一种聚乙二醇-去氧胆酸及其衍生物的制备方法和应用

【技术保护点】
一种聚乙二醇‑去氧胆酸,其特征在于,具有如下分子结构式:

【技术特征摘要】
1.一种聚乙二醇-去氧胆酸,其特征在于,具有如下分子结构式:2.权利要求1所述的一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物,其特征在于,母核为聚乙二醇-去氧胆酸,连接键是氧化还原敏感键、pH敏感键或酶易水解键,配体为疏水性聚氨基酸类化合物、生物相容性聚合物或难溶性抗癌药物。3.根据权利要求2所述的一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物,其特征在于,所述氧化还原敏感键为二硫键和单硫键;所述pH敏感键为腙键或亚胺键;所述酶易水解键为酯键、酰胺键或短肽链;所述疏水性聚氨基酸类化合物为聚天冬氨酸苄酯、聚谷氨酸苄酯或聚丙氨酸;所述生物相容性聚合物为聚乳酸或聚己内酯;所述难溶性抗癌药物为紫杉醇、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素、柔红霉素、长春新碱、喜树碱类或多西他赛。4.权利要求3所述的一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物,其特征在于,所述二硫键为3,3’-二硫代二丙羧基。5.权利要求1所述的一种聚乙二醇-去氧胆酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将去氧胆酸和4-二甲氨基吡啶溶于无水二氯甲烷中得到去氧胆酸溶液,再取聚乙二醇溶于二氯甲烷中得到聚乙二醇溶液,然后将去氧胆酸溶液和聚乙二醇溶液逐滴滴加到反应瓶中,加入催化剂,反应后经过抽滤、萃取、真空干燥处理后得到聚乙二醇-去氧胆酸。6.权利要求2所述的一种聚乙二醇-去氧胆酸衍生物的制备方法,其...

【专利技术属性】
技术研发人员:蒲晓辉宗兰兰尹丽王海彦李蒙蒙李建业徐天宏
申请(专利权)人:南京拉克森生物医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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