The invention relates to a method of anti browning of tobacco explants based on activated carbon and vitamin C, including steps: step (1), seed disinfection, step (2), seed culture, step (3), tobacco explant culture, step (4), anti browning culture; the invention can not only effectively alleviate explant browning phenomenon. Without other methods of anti browning, the rate of browning is 9.1 and 23.6%. At the same time, the synergistic effect of activated carbon and vitamin C is more effective to stimulate plant cell division and improve oxidation reduction, which effectively promotes the rapid buds of tobacco explants, and the fastest 5D can induce buds.
【技术实现步骤摘要】
一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法
本专利技术涉及一种烟草外植体防褐化方法,具体是一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法,属于植物组织培养领域。
技术介绍
褐化是植物组织培养过程中影响组织培养的重要因素,褐化是植物材料受伤后,体内释放的酚类物质在酚氧化酶的作用下被氧化成褐色的醌类物质的结果,对外植体材料将产生毒害作用,影响其生长和分化,严重时导致死亡。对于引起植物组织褐化的因素已有研究报道,影响褐化的因素主要分为内因和外因,尽管引起褐化现象的因素较多,但选择合适的外植体,筛选合适的培养基和培养条件能有效地防止褐化。通常条件下通过添加抗氧化剂或吸附剂可以有效降低褐化率。众所周知,烟草(Nicotianatabacum)是我国重要经济作物之一。在长期以来的探索中,烟草作为组织培养中一种繁殖力强、抗病毒能力强、生长旺盛的实验品种。但是烟草在组织培养过程中的褐化问题是多发的常见的,几乎不可避免,褐化会导致植株的死亡,也就是培养基中的植物不能继续进行培养,所以防止褐化是在烟草组织培养中要极力解决的问题。针对烟草的特殊性,单一防褐化剂的添加并不能很好的达到防褐化效果,还需要辅助其他防褐化的手段,通过不同的防褐化剂的协同作用,有可能无需辅助其他防褐化的手段,并能产生其他意外的效果,值得探索,对于烟草外植体,使用不同的防褐剂且不需其他防褐化的手段的相关方法未见报道。
技术实现思路
为了解决上述为问题,本专利技术的目的在于提供一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法,无需其他防褐化手段的辅助,即可有效缓解烟草组培过程中出现的褐化问题。本专利技术采用解决 ...
【技术保护点】
一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤(1),种子的消毒;步骤(2),种子培养:将步骤(1)得到的种子接种到MS培养基中培养,种子发芽长成幼苗;种子的培养条件为:在培养温度为25±1℃,光照强度30‑50μmol/(m
【技术特征摘要】
1.一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤(1),种子的消毒;步骤(2),种子培养:将步骤(1)得到的种子接种到MS培养基中培养,种子发芽长成幼苗;种子的培养条件为:在培养温度为25±1℃,光照强度30-50μmol/(m2·s),光照时间为16h/d的条件下培养60d;步骤(3),烟草外植体培养:将步骤(2)中得到的幼苗,利用打孔器进行打孔得到烟草叶盘,将叶盘置于MS分化培养基中培养,培养条件为:28℃光照培养16h/d,光照强度30-50μmol/(m2·s),25℃黑暗培养8h/d,培养5d,得到外植体;步骤(4),防褐化培养:将步骤(3)中得到的外植体置于MS防褐化培养基中,在28℃光照培养16h/d,光照强度30-50μmol/(m2·s),25℃黑暗培养8h/d的条件下培养40d,MS防褐化培养基为MS基本培养基中添加0.3-1.0g/L活性炭、10-50mg维生素C、30g/L蔗糖和4g/L的琼脂,培养基的pH值为5-6。2.根据权利要求1所述的基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法,其特征在于:步骤(1)中,种子消毒的具体步骤为:取饱满的烟草种子,然后移至超净工作台上,用75%酒精将种子浸泡30s,无菌水冲洗...
【专利技术属性】
技术研发人员:许力,邓乐乐,曾婉俐,宋春满,蒋佳芮,张建铎,向海英,张涛,李雪梅,苏杨,贾凌,高军平,夏庆友,陈章玉,
申请(专利权)人:云南中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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