一种白子菜培育方法技术

本发明专利技术公开了一种白子菜培育方法。配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6‑BA，0.1mg/L的NAA，PH值为5.5‑6.5。本发明专利技术提供的一种白子菜的黄酮提取方法，先采用石油醚进行提取获得粉末，然后采用水浴回流并过滤获得粉末，分别用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl处理20‑25分钟，并用蒸馏水清洗至PH为5.5‑6.5之间；采用梯度乙醇进行洗脱，并别收集洗脱液进行合并浓缩，可以使得白子菜的总黄酮含量提高了6％‑10％。

A breeding method of white cabbage

The invention discloses a method for cultivating white cabbage. The improved MS inducible medium was formulated: 6 1.5mg/L BA, 0.1mg/L NAA and pH 5.5 6.5. The present invention provides a method for extracting flavonoids from white cabbage. First, petroleum ether is used to extract powder, and then the powder is obtained by water bath reflux and filtration. The powder is treated with 0.3mol/L NaOH and 0.3mol/L HCl for 20 minutes respectively, and cleaned with distilled water to 5.5 PH 6.5; and the gradient ethanol is used for elution and difference. The concentration of total flavonoids in the seeds of Chinese cabbage increased by 6%. 10% by collecting eluent.

【技术实现步骤摘要】
一种白子菜培育方法
本专利技术涉及白子菜侧芽培育领域，特别涉及一种白子菜的培育方法和该白子菜的黄酮提取方法。
技术介绍
白子菜别名接骨丹、茹童菜、大绿叶、土田七、散血姜、白子菜、鸡菜、大肥牛、叉花土三七、白背三七、百子菜、富贵菜、菊三七、鸡菜、白背菜、又闻又清。菊科菊三七属植物，以全草入药。夏秋采集，洗净切片，鲜用或晒干。味甘、淡，寒。可用于清热解毒，舒筋接骨，凉血止血。用于支气管肺炎，小儿高热，百日咳，目赤肿痛，风湿关节痛，崩漏；外用治跌打损伤，骨折，外伤出血，乳腺炎，疮疡疔肿，烧烫伤。现有技术中，通过对白子菜的侧芽进行培养基培养，然后采用瓶接种外植体进行丛生芽形成和培养然后进行生根培养，再进行移植，在这个过程中，侧芽茎段需要经过多次的生存环境转移而且需要采用瓶进行培养，会造成茎段的损伤，实际应用中白子菜的侧芽成活率只有85％-92％左右，因此不利于实际生产时白子菜侧芽的培养使用，必须进行成活率的提高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种白子菜的培育方法，通过对侧芽培养基的培养和增值栽培后的栽种方法改进，提高了白子菜的成活率。为实现上述目的，本专利技术提供以下的技术方案，一种白子菜培育方法,所述方法包括如下步骤：(1)培养基配制：配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6-BA，0.1mg/L的NAA，PH值为5.5-6.5；(2)侧芽培养：取幼嫩白子菜幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成0.8cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5-6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行2天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：4.5g/L、24g/L、15mg/L之间，温度为23℃，在通过强度为2100lx-2500lx的光照条件下培养22d。增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为86mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.05mg/L，培养时间为5d；栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼2天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％-80％之间、温度在23摄氏度之间，并进行50％-60％的遮阴，20d后移除薄膜，侧芽成活率为96％，4-6个月后进行收割。另外，清洗茎段后置于空气温度为20-22℃的空气中锻炼2-3天，并保持90％的空气湿度。本专利技术还公开了一种白子菜的黄酮提取方法,其特征在于，包括如步骤：将白子菜全株自然风干，研碎成粉末，加入温度为42-70℃的石油醚，分别按照粉末和石油醚质量比为1:2.5-4和1:5-7进行提取，每次提取的时间为1.5-2H，获得提取粉末；在提取粉末中加入提取溶液，并采用60℃-70℃的水浴回流并过滤，获得过滤后粉末；对过滤后粉末采用蒸馏水对提取物进行浸泡，分别用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl处理20-25分钟，并用蒸馏水清洗至PH为5.5-6.5之间；采用梯度乙醇进行洗脱，并别收集洗脱液进行合并浓缩。最为上述方案的进一步优化，梯度乙醇的浓度分别为：35％乙醇、55％乙醇、75％乙醇、95％乙醇和无水乙醇，分别获得各个浓度的乙醇洗脱液进行合并浓缩后，采用30％乙醇进行定容。最为上述方案的进一步优化，所述提取溶液分别为60％乙醇、60％甲醇和蒸馏水。最为上述方案的进一步优化，将合并浓缩后的洗脱液一起放置于循环回流装置中进行回流提取，60-70℃条件下，回流提取3-4次，每次30-40min。本专利技术提供的提高白子菜侧芽成活率的方法，具有如下有益效果：1.应用本专利技术提供的一种白子菜培育方法，通过对白子菜的侧芽培养基中添加蔗糖、琼脂和维生素并保持在一定得浓度范围之间且过程为暗培养，然后进行增值培养和栽种，通过多次试验均可以提高侧芽的成活率。2.应用本专利技术提供的一种白子菜的黄酮提取方法，先采用石油醚进行提取获得粉末，然后采用水浴回流并过滤获得粉末，分别用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl处理20-25分钟，并用蒸馏水清洗至PH为5.5-6.5之间；采用梯度乙醇进行洗脱，并别收集洗脱液进行合并浓缩，可以使得白子菜的总黄酮含量提高了6％-10％。3.应用本专利技术提供的一种白子菜培育方法，清洗茎段后置于空气温度为20-22℃的空气中锻炼2-3天，并保持90％的空气湿度，比以往直接将茎段置于空气中更能够锻炼茎段的生存。具体实施方式为使专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面通过实施例，对本专利技术技术方案进行进一步详细说明。但是应该理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术技术方案，并不用于限制本专利技术技术方案的范围。实施例1：本优选实施例提供的一种白子菜培育方法，包括如下步骤：(1)培养基配制：配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6-BA，0.1mg/L的NAA，PH值为5.5-6.5；(2)侧芽培养：取幼嫩白子菜幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成0.8cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5-6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行2天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：4.5g/L、24g/L、15mg/L之间，温度为23℃，在通过强度为2100lx-2500lx的光照条件下培养22d。增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为86mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.05mg/L，培养时间为5d；栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼2天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％-80％之间、温度在23摄氏度之间，并进行50％-60％的遮阴，20d后移除薄膜，侧芽成活率为96％，4-6个月后进行收割。另外，清洗茎段后置于空气温度为20-22℃的空气中锻炼2-3天，并保持90％的空气湿度。实施例2：本优选实施例提供的一种白子菜培育方法，包括如下步骤：(1)培养基配制：配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6-BA，0.1mg/L的NAA，PH值为6.0-6.5；侧芽培养：取幼嫩白子菜幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成1.2cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5-6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行3天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：6.5g/L、32g/L、21mg/L之间，温度为23-26℃，在通过强度为3000lx的光照条件下培养30d；增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为110mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.15mg/L，培养时间为7d；栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼3天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％-80％之间、温度在26摄氏度之间，并进行50％-60％的遮阴，20d后移除薄膜，侧芽成活率为96％，4-6个月后进行收割。(2)组织培养：清洗茎段后置于空气中锻炼2-3天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白子菜培育方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤：(1)培养基配制：配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6‑BA，0.1mg/L的NAA，PH值为5.5‑6.5；(2)侧芽培养：取幼嫩白子菜幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成0.8cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5‑6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行2天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：4.5g/L、24g/L、15mg/L之间，温度为23℃，在通过强度为2100lx‑2500lx的光照条件下培养22d。增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为86mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.05mg/L，培养时间为5d；栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼2天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％‑80％之间、温度在23摄氏度之间，并进行50％‑60％的遮阴，20d后移除薄膜，侧芽成活率为96％，4‑6个月后进行收割。另外，清洗茎段后置于空气温度为20‑22℃的空气中锻炼2‑3天，并保持90％的空气湿度。...

【技术特征摘要】
1.一种白子菜培育方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤：(1)培养基配制：配制改良MS诱导培养基：添加1.5mg/L的6-BA，0.1mg/L的NAA，PH值为5.5-6.5；(2)侧芽培养：取幼嫩白子菜幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成0.8cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5-6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行2天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：4.5g/L、24g/L、15mg/L之间，温度为23℃，在通过强度为2100lx-2500lx的光照条件下培养22d。增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为86mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.05mg/L，培养时间为5d；栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼2天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％-80％之间、温度在23摄氏度之间，并进行50％-60％的遮阴，20d后移除薄膜，侧芽成活率为96％，4-6个月后进行收割。另外，清洗茎段后置于空气温度为20-22℃的空气中锻炼2-3天，并保持90％...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾永冠，韦玲，李真真，
申请(专利权)人：安徽华米生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34