一种高成活率的棉花试管苗移栽方法技术

本发明专利技术涉及一种高成活率的棉花试管苗移栽方法，其包括如下步骤：（1）将棉花试管苗从培养基中慢慢取出，防止根系断落；（2）将棉花试管苗直接移栽到温室内的地里或花盆内，温度控制在23℃‑25℃；（3）在距离棉花试管苗8cm以外的四周，缓缓浇水，浇透；（4）取无底的透明塑料瓶，罩在棉花试管苗上，瓶口用封口膜封上；（5）每3天浇一次水，保持土壤湿润即可。（6）生长3周后，去掉封口膜；（7）再过1周后，撤掉透明塑料瓶，可将移栽植株移栽到大田正常生长。本发明专利技术操作简便、缓苗时间短、移栽成活率高。

A method of transplanting cotton test tube seedlings with high survival rate

The present invention relates to a high survival rate of cotton test tube seedling transplanting method, which includes the following steps: (1) taking the cotton test tube seedlings from the medium slowly to prevent the root from falling; (2) the cotton test tube seedlings are transplanted directly into the ground or flowerpot in the greenhouse, the temperature is controlled at 25 degrees C at 23, and (3) is at the distance from the cotton test tube. 8cm outside the seedlings, slowly watering, pouring; (4) take the bottomless transparent plastic bottles, covered in the cotton test tube seedlings, the bottle mouth sealed with sealing membrane; (5) every 3 days poured water, keep the soil moist. (6) after 3 weeks of growth, remove the sealing film; (7) remove the transparent plastic bottle after 1 weeks, and transplant the transplanted plants to normal growth in the field. The invention has the advantages of simple operation, short seedling stopping time and high transplanting survival rate.

【技术实现步骤摘要】
一种高成活率的棉花试管苗移栽方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种高成活率的棉花试管苗移栽方法。
技术介绍
棉花幼胚培养，组织培养技术与转基因技术是棉花育种改良的重要手段，但通过组织培养与转基因育种获得的棉花试管苗移栽成活困难，一直是限制棉花组培育种与转基因育种技术发展的一个重要技术瓶颈。棉花属于阔叶植物，蒸腾量大，试管苗移栽很容易萎蔫死亡。目前对于棉花试管苗移栽的研究主要从控制植株蒸发与增加植株对水分的吸收两方面进行。国内有报道采用叶面涂抹抗蒸腾剂，根部加入促生根剂来解决组培苗移栽成活困难的问题。之后国内外许多研究者陆续报道采用嫁接技术将组织培养再生植株嫁接到棉花砧木上。涂抹抗蒸腾剂与促生根的方法需要20天激素水培促生根，并在移栽后对植株涂抹抗蒸腾剂，该方法虽然获得较高移栽成活率，但其未对移栽环境进行严格控制，存在操作繁琐，移栽成活与缓苗时间受环境影响较大的问题。申请号为200510012491.2的国家专利技术专利《棉花试管苗直接移栽的基质及方法》，其主要解决问题的思路仍是从促进植株根系吸收和防止植株地上部蒸腾两方面进行，其描述的棉花试管苗直接移栽成活率低的主要原因是移栽环境通气不良，导致根部发霉。采用的方法是将试管苗移栽到消毒基质中防止烂根和加入促生根剂促生根，而没有认识到保护原有根系不受损对于维持移栽后棉花试管苗吸收平衡的重要性，也没有认识到保持移栽前后温度，光照，湿度条件不变的即保持试管苗代谢平衡的重要性，尤其是罩在试管苗上的不透气的一次性塑料杯，虽然可以避免染菌和防止植株地上部蒸腾，但打破了移栽前植株的生理代谢平衡。前10天湿度过大，易导致试管苗发育迟缓，缓苗时间长。10天后逐渐放苗，塑料杯开口的大小不易掌握，湿度不易控制，易出现缓苗时间长和试管苗脱水萎蔫死亡的可能。该移栽方法不能实现全苗移栽成活，对于棉花稀缺遗传材料试管苗的保存具有一定风险。而目前广泛采用的嫁接的方法，需要保持砧木和接穗部位直径一致性和砧木和接穗苗龄的一致性，并对操作者的嫁接技术要求较高，同时该类研究也未对嫁接环境进行严格控制，同样存在操作繁琐，移栽与缓苗受环境影响的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种操作简便、缓苗时间短、移栽成活率高的棉花试管苗的移栽方法。本专利技术采用如下技术方案：一种高成活率的棉花试管苗移栽方法，其包括如下步骤：（1）将棉花试管苗从培养基中慢慢取出，防止根系断落；（2）将棉花试管苗直接移栽到温室内的地里或花盆内，温度控制在23℃-25℃；（3）在离棉花试管苗8cm以外的四周，缓缓浇水，浇透；（4）取无底的透明瓶，将棉花试管苗罩在瓶内，瓶口用封口膜封上；（5）每3天浇一次水，保持土壤湿润即可；（6）生长3周后，去掉封口膜；（7）再过1周后，撤掉透明瓶，可将移栽植株放到大田正常生长。进一步的，所述试管苗为棉花幼胚苗或棉花组培再生苗。进一步的，所述棉花幼胚苗为胚龄20天以上，且长度达到7mm以上的幼胚培养发育的棉花幼胚苗，棉花幼胚苗具有完整的根系，两片子叶可以打开。进一步的，所述棉花组培再生苗为苗龄达到3叶1心以上的、有完整的根系的棉花组培再生苗。进一步的，所述温室为日光温室或光照培养室。进一步的，所述温室的光照强度为2000-5000LX。进一步的，所述透明瓶为2.5L的圆形或方形的去底透明塑料瓶。进一步的，所述封口膜为组培用封口膜。本专利技术的有益效果在于：1、移栽前，试管苗需要有完整的叶片和根系，如幼胚苗需要2片子叶能够正常展开，组培再生苗需要达到3叶一心，试管苗在试管中能够维持正常的生理代谢平衡。2、从培养基中小心取出试管苗，保持了试管苗原有根系完整性。3、通过控制环境温度，在试管苗上罩透明塑料瓶保持光照，在瓶口上封具有透气功能的封口膜来控制湿度，保持试管苗移栽前后环境条件不改变，维持试管苗正常的生理代谢平衡。该方法的移栽成活率达到100%，具有操作简便，缓苗时间短等优点。适用于已生根的棉花体细胞培养再生植株，幼胚培养再生植株，依赖于组织培养转基因再生植株，以及远缘杂交和遗传作图群体等资源材料组培再生植株移栽成活和保存。附图说明图1棉花幼胚苗的控温见光保湿处理图。图2棉花幼胚苗移栽后生长效果图。图3棉花茎尖组培再生苗的控温见光保湿处理图。图4棉花茎尖组培再生苗移栽后生长效果图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的高成活率的棉花试管苗移栽方法，进行进一步详细说明。实施例1供试材料：以陆地棉常规品种快育66，冀棉958，冀棉298的幼胚苗作为供试材料。方法与步骤：如图1和图2所示，将2片子叶展开有根系的棉花幼胚苗从培养基中缓慢取出，注意一定不要伤到根系，放入日光温室或光照培养室里挖好的土坑中，一手轻轻捏住棉茎，使棉苗直立起来，另一只手在根上轻轻覆土，浇适量自来水。将去底的2.5L的透明塑料瓶直接罩在棉花幼胚苗上，瓶口用封口膜封住。将环境温度控制在23-25℃之间，光照强度为2000-5000LX。待棉花幼胚苗长至5叶一心（约三周后），撤去封口膜，7天后，撤去2.5L的透明塑料瓶，棉花幼胚苗全部移栽成活，成活率达100%。实施例2供试材料：以陆地棉常规品系13N66的茎尖组织再生苗作为供试材料。方法与步骤：如图3和图4所示，将3叶1心且有根系的棉花茎尖组织再生苗从培养基中缓慢取出，注意一定不要伤到根系，放入日光温室或光照培养室里挖好的土坑中，将环境温度控制在23-25℃之间，光照强度为2000-5000LX。一手轻轻捏住棉茎，使棉苗直立起来，另一只手在根上轻轻覆土，浇适量自来水。将去底的2.5L的透明塑料瓶直接罩在棉花茎尖组织再生苗上，瓶口用封口膜封住。待棉花茎尖组织再生苗长至7叶一心（约三周后），撤去封口膜，7天后，撤去2.5L的透明塑料瓶，棉花茎尖组织再生苗全部移栽成活，成活率达100%。对比例1以快育66，冀棉958，冀棉298的棉花幼胚苗为实验材料比较遮荫保湿处理、见光保湿处理及控温见光保湿处理的移栽效果，方法步骤如下：1、遮荫保湿处理：将棉花幼胚苗从培养基中缓慢取出，注意一定不要伤到根系，放入挖好的土坑中，一手轻轻捏住棉茎，使棉苗直立起来，另一只手在根上轻轻覆土，浇适量自来水。将黑色遮阴网折叠成双层，以20cm的竹签作为支撑，用遮阴网遮住胚苗。每天白天分两次向遮阴网喷水，保持胚苗湿润，相对湿度维持在90%以上，环境温度保持在20℃-35℃之间。三批次试验，观察移栽成活情况。2、见光保湿处理：将棉花幼胚苗直接移栽到土中，操作步骤同遮荫保湿处理移栽入土步骤，将去底的2.5L的透明塑料瓶直接罩在棉花幼胚苗上，瓶口用封口膜封住。环境温度保持在20℃-35℃之间。三批次试验，观察移栽成活情况。3、控温见光保湿处理：在见光保湿处理的操作步骤基础上，将环境温度控制在23-25℃之间，3周后去掉封口膜，再过一周，去掉塑料瓶。三批次试验，观察移栽成活情况。试验结果见表1。表1不同温光湿处理方法对棉花幼胚苗移栽成活的影响。结果表明，控温见光保湿处理在上述品种棉花幼胚苗的移栽比较试验中效果最好，移栽成活率达到100%，缓苗时间小于1天；展开子叶的棉花幼胚苗，12小时后就可观察到长出的新芽，基本不存在缓苗时间。遮荫保湿处理，棉花幼胚苗存活了7天，由于见光少，幼胚苗从绿色逐渐变为浅黄色，生长停滞，第8天出现本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高成活率的棉花试管苗移栽方法，其特征在于，其包括如下步骤：（1）将棉花试管苗从培养基中慢慢取出，防止根系断落；（2）将棉花试管苗直接移栽到温室内的地里或花盆内，温度控制在23℃‑25℃；（3）在距离棉花试管苗8cm以外的四周，缓缓浇水，浇透；（4）取无底的透明瓶，将棉花试管苗罩在瓶内，瓶口用封口膜封上；（5）每3天浇一次水，保持土壤湿润即可；（6）生长3周后，去掉封口膜；（7）再过1周后，撤掉透明瓶，可将移栽植株移到大田正常生长。

【技术特征摘要】
1.一种高成活率的棉花试管苗移栽方法，其特征在于，其包括如下步骤：（1）将棉花试管苗从培养基中慢慢取出，防止根系断落；（2）将棉花试管苗直接移栽到温室内的地里或花盆内，温度控制在23℃-25℃；（3）在距离棉花试管苗8cm以外的四周，缓缓浇水，浇透；（4）取无底的透明瓶，将棉花试管苗罩在瓶内，瓶口用封口膜封上；（5）每3天浇一次水，保持土壤湿润即可；（6）生长3周后，去掉封口膜；（7）再过1周后，撤掉透明瓶，可将移栽植株移到大田正常生长。2.根据权利要求1所述的移栽方法，其特征在于，所述试管苗为棉花幼胚苗或棉花组培再生苗。3.根据权利要求2所述的移栽方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨帆，王海波，徐显，孙果忠，周硕，赵和，柴建芳，董福双，吕孟雨，刘永伟，
申请(专利权)人：河北省农林科学院遗传生理研究所，
类型：发明
国别省市：河北,13