一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法技术

本发明专利技术公开了一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法。该方法通过采集不同种类果汁的高效液相色谱指纹图谱、确定每种果汁的对照指纹图谱、相似度分析等实现鉴别果汁种类及掺假等目的。采用本方法进行果汁鉴伪，无须确认掺假物质，通过指纹图谱的相似度分析即可实现掺假鉴定，适用范围广，既可用于不同种类果汁的鉴别与区分，避免果汁以次充好、以假乱真，又可用于掺入廉价果汁、外源糖酸等掺假果汁的鉴别，尤其适合于复杂掺假行为的鉴别。

【技术实现步骤摘要】
一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法
本专利技术涉及一种果汁鉴伪方法，特别涉及一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法。
技术介绍
果汁作为健康饮品，不但能解渴，而且营养丰富，同时具有新鲜水果的原汁原味，因此深受消费者的厚爱。近年来，世界果汁贸易额迅速增长，果汁消费市场不断扩大。然而，由于纯果汁产品的高价格、高需求量，以及水果收获季节短、生产短缺等各种因素，加之一些不法厂商为牟取暴利，使得果汁掺假现象极为常见。据统计，国际市场上有50-80％的果汁在不同程度上被掺假，国内市场尤其严重。掺假果汁的大量存在，严重损害了消费者的利益和健康，不利于社会的安定与和谐。同时由于缺乏必要的鉴定方法和监管措施，正规生产企业的产品由于价格较高而在市场竞争中处于不利地位，迫使部分企业不得不涉入掺假的行列，形成恶性循环，严重扰乱了果汁饮料正常生产秩序，挫伤了消费者和生产者的信心，对果汁行业健康、快速发展产生了严重的阻碍作用。当前的果汁掺假手段主要有加水、甜味剂(蔗糖、各种糖浆、人工合成甜味剂等)、酸味剂(柠檬酸、苹果酸等)、加果渣提取液、价格高的果汁中添加价格低的果汁等。此外，在果汁和果汁饮料中，虚假标注原果汁含量、假冒果汁种类等也都称为掺假果汁或果汁饮料。针对果汁中的各种掺假手段，国内外科研人员研究提出了多种鉴别方法，如：单纯加水可以利用折光计检测样品的可溶性固形物而加以判断；果汁加糖的主要鉴别方法有检测样品的糖构成谱、同位素分析、寡糖峰测定等；根皮素葡萄糖苷和根皮素木糖葡萄糖苷是苹果汁的典型化合物，而异鼠李素葡萄糖苷仅在梨汁中存在，因此用HPLC测定苹果和梨中的酚酸和类黄酮可以分辨掺入了苹果汁的梨汁和掺入了梨汁的苹果汁；通过检测样品中的花色苷组成可以鉴别红色果汁的掺假。这些基于果汁特征成分分析的鉴伪方法虽然在一定条件下都可以实现对外源添加物的识别，需要事先预测掺假的方式、确定掺入的物质才可使用，应用范围有限。随着科技的发展，果汁的掺假使假手段日益复杂隐蔽，已经发展到根据各种果汁的组成而进行非常精细的添加，通过工艺处理规避果汁中特征性成分的检测，甚至将食品鉴伪专家建立的果汁组成数据库作为掺假的“配方”，令果汁的鉴伪检测变得越来越困难。因此，针对愈来愈复杂的高科技掺假行为，建立简单易行、适用性广泛、结果可靠的非靶向果汁鉴伪方法显得尤为迫切。指纹图谱是随着现代分析技术发展而诞生的一种从整体上研究复杂物质体系的非靶向化学分析方法，具有整体性和模糊性的特点。相对于传统检测方法，指纹图谱技术由于只需要选定特征峰或者特征图谱，而无须确定具体成分，因此可以获得更多、更广泛的特征信息，较好地体现食品成分的复杂性和相关性，从而在食品质量评价方面具有更加广阔的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法，采用高效液相色谱(HPLC)建立不同树种果汁的HPLC指纹图谱并通过相似性评价来鉴别掺假果汁。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：(1)按现有工艺，将不同种类水果原料去核/去梗、打浆、灭酶、澄清、离心、过滤，得到不同树种的果汁。或者直接从果汁生产企业收集纯果汁样品。(2)采用高效液相色谱(HPLC)，分析每个树种的所有果汁样品，采集样品图谱并比较分析确定共有峰，将样品色谱图导入国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，通过设置参照图谱、标定共有峰、全峰匹配、生成对照四个步骤，得到该种果汁的对照指纹图谱(即标准指纹图谱)。(3)运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对果汁样品的指纹图谱与该树种果汁的对照指纹图谱进行相似度分析，确定每种果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值。(4)将待测果汁样品的指纹图谱与该果汁的对照指纹图谱的相似度进行分析，通过对该果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值比较进行鉴伪，如果样品与对照指纹图谱的相似度低于阈值即可判定为伪品或有掺假行为。步骤(1)不同树种的果汁包括樱桃汁、杏汁、蓝莓汁、草莓汁、桃汁、葡萄汁、苹果汁、梨汁。高效液相色谱指纹图谱包括可溶性糖指纹图谱和有机酸指纹图谱。通过色谱分离条件优化和精密度、稳定性和重复性试验，获得最佳HPLC条件，优选为：可溶性糖：色谱柱：WatersSugar-pak1；流动相：50mg/LEDTA二钠钙溶液；流速：0.5mL/min；柱温：80℃；样品池温度：30℃；进样体积：10μL；示差折光检测器检测。有机酸：色谱柱：AQ-C18，5μm；流动相：0.02mol/L(NH4)2HPO4溶液，磷酸调pH值为2.4；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样体积10μL；紫外检测波长：210nm。本专利技术的有益效果：1、采用本专利技术构建的8种果汁的可溶性糖指纹图谱和有机酸HPLC指纹图谱，通过相似度分析可实现全部8种果汁的鉴别与区分，对防止果汁以次充好、假冒果汁行为具有积极的意义。2、利用本专利技术所提供的方法，也可对珍稀果汁中添加廉价果汁以及果汁中添加外源糖、酸等掺假行为进行鉴别，因此可用于监督果汁质量，防止果汁掺假，从而规范果汁市场秩序，保护消费者利益和身体健康，具有明显的经济效益和社会效益。附图说明图1为樱桃汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，YT1-YT42为42个樱桃汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为樱桃汁可溶性糖的对照指纹图谱。图2为杏汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，X1-X27为27个杏汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为杏汁可溶性糖的对照指纹图谱。图3为蓝莓汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，LM1-LM10为10个蓝莓汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为蓝莓汁可溶性糖的对照指纹图谱。图4为草莓汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，CM1-CM10为10个草莓汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为草莓汁可溶性糖的对照指纹图谱。图5为桃汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，T1-T28为28个桃汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为桃汁可溶性糖的对照指纹图谱。图6为葡萄汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，PT1-PT51为51个葡萄汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为葡萄汁可溶性糖的对照指纹图谱。图7为苹果汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，PG1-PG33为33个苹果汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为苹果汁可溶性糖的对照指纹图谱。图8为梨汁可溶性糖的HPLC指纹图谱。图中，L1-L18为18个梨汁样品的可溶性糖的HPLC指纹图谱；R为梨汁可溶性糖的对照指纹图谱。图9为樱桃汁有机酸的HPLC指纹图谱。图中，YT1-YT42为42个樱桃汁样品的有机酸的HPLC指纹图谱；R为樱桃汁有机酸的对照指纹图谱。图10为杏汁有机酸的HPLC指纹图谱。图中，X1-X27为27个杏汁样品的有机酸的HPLC指纹图谱；R为杏汁有机酸的对照指纹图谱。图11为蓝莓汁有机酸的HPLC指纹图谱。图中，LM1-LM10为10个蓝莓汁样品的有机酸的HPLC指纹图谱；R为蓝莓汁有机酸的对照指纹图谱。图12为草莓汁有机酸的HPLC指纹图谱。图中，CM1-CM10为10个草莓汁样品的有机酸的HPLC指纹图谱；R为草莓汁有机酸的对照指纹图谱。图13为桃汁有机酸的HPLC指纹图谱。图中，T1-T28为28个桃汁样品的有机酸的HPLC指纹图谱；R为桃本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按现有工艺制备或采集不同树种的果汁样品；(2)采用高效液相色谱法构建不同树种果汁的高效液相色谱对照指纹图谱；(3)通过相似度分析确定每种果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值；(4)将待测果汁样品的指纹图谱与该果汁的对照指纹图谱进行相似度分析，通过对该果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值比较进行果汁鉴伪。

【技术特征摘要】
1.一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按现有工艺制备或采集不同树种的果汁样品；(2)采用高效液相色谱法构建不同树种果汁的高效液相色谱对照指纹图谱；(3)通过相似度分析确定每种果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值；(4)将待测果汁样品的指纹图谱与该果汁的对照指纹图谱进行相似度分析，通过对该果汁与其对照指纹图谱的相似度阈值比较进行果汁鉴伪。2.根据权利要求1所述的利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法，其特征在于，所述的不同树种的果汁包括樱桃汁、杏汁、蓝莓汁、草莓汁、桃汁、葡萄汁、苹果汁、梨汁。3.根据权利要求1所述的利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法，其特征在于，所述的高效液相色谱指纹图谱包括可溶性糖指...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦中高，李佳秀，张春岭，刘杰超，刘慧，陈大磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院郑州果树研究所，
类型：发明
国别省市：河南,41