一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法技术

技术编号:17777662 阅读:38 留言:0更新日期:2018-04-22 05:12
本发明专利技术公开了一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,将灵芝孢子油用二氯甲烷‑甲醇溶解后,过滤,所得滤液即为供试品溶液;对灵芝孢子油进行近红外光谱检测并通过高效液相色谱测定相应灵芝孢子油的供试品溶液中有效成分的浓度;选择合理的建模近红外光谱数据区域,建立近红外光谱数据与供试品溶液中有效成分的浓度之间的对应关系;利用建立的对应关系,通过对待测灵芝孢子油进行红外光谱检测,实现对待测灵芝孢子油中有效成分的浓度测定。与HPLC法相比较,近红外光谱法操作更为简便、快速,且适合大批量灵芝孢子油样品的含量测定,能够满足工业化生产中对大规模样品信息采集的需求,对制剂最终产品的稳定性可控具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法
本专利技术涉及一种灵芝孢子油检测方法,具体涉及一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法。
技术介绍
近红外光谱分析技术被广泛称为绿色分析技术,其具有如下独特的优势:分析速度快,分析效率高,分析过程简单却环保、无需样品预处理或少处理。近红外光谱分析法是一种通过建立校正模型对未知样品进行定性或定量分析的间接分析方法,其分析过程主要包括:收集样品、近红外光谱的采集和预处理、校正模型的建立和验证、预测未知样品,定量分析时还包括样品标准值的化学分析。在中药质量控制及生产应用领域,近红外光谱作为一种在线检测技术应用于指标成分的测定已有相关专利文献,如专利申请号(200710022408.9,200810050095.2和200410090617.3)等,这些专利报道了近红外光谱在中药检测领域的应用,但并没有将所建模型真应用于灵芝孢子油的质量检测方面。灵芝孢子油,为黄色透明液体,主要成份是灵芝酸、不饱和脂肪酸、灵芝多糖等。为确保药品质量,保证药材的有效性,通过要采用HPLC对灵芝孢子油中有效成分进行检验,HPLC作为一种浓度检测方法,其分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比较长,不能及时在线得出检测结果。
技术实现思路
为了解决现有技术中灵芝孢子油的质量难以控制,不能快速准确得出其有效成分的问题,本专利技术提供一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,可以实时监控灵芝孢子油提取液中有效成分的变化情况,并根据这些情况灵活调整提取方案,从而获得优质的灵芝孢子油提取液。本专利技术的目的将通过以下技术方案实现:一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,包括以下步骤:步骤一,将灵芝孢子油用二氯甲烷-甲醇溶解后,过滤,所得滤液即为供试品溶液;步骤二,对灵芝孢子油进行近红外光谱检测并通过高效液相色谱测定相应灵芝孢子油的供试品溶液中有效成分的浓度;步骤三,选择合理的建模近红外光谱数据区域,建立近红外光谱数据与供试品溶液中有效成分的浓度之间的对应关系;步骤四,利用建立的对应关系,通过对待测灵芝孢子油进行红外光谱检测,实现对待测灵芝孢子油中有效成分的浓度测定。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤一中,称取0.32g灵芝孢子油,加6ml二氯甲烷-甲醇溶液溶解,二氯甲烷-甲醇溶液中二氯甲烷与甲醇溶液体积比为1:1,均匀混合后,过0.45μm的微孔滤膜,即得供试品溶液。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤一中,供试品溶液不止20份,称取灵芝孢子油依次进行近红外光谱检测后,再依次制备供试品溶液用于高效液相色谱检测,所得检测数据用于建立对应关系。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤二中,采用高效液相色谱测定浓度时,流动相为甲醇,洗脱时间15min,流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长282nm,进样量10μl。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤二中,灵芝孢子油进行近红外光谱检测时,以空气为背景,采用漫反射测样方式,波长检测范围为800~1800nm,扫描次数为32次,分辨率为2nm,每个供试品溶液重复扫描3次,得出平均的准确的光谱数据。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤二中,供试品溶液中有效成分为麦角甾醇,通过高效液相色谱检测供试品溶液中麦角甾醇的含量。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤三中,选择建模近红外光谱数据区域之前要进行预处理,预处理方法包括卷积平滑、一阶卷积求导、二阶卷积求导、多元散射校正、标准正态变量变换和归一化法。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤三中,选择建模近红外光谱数据区域的方法包括全波长、相关系数法、迭代优化对近红外光谱进行波长的选择,以偏最小二乘法对近红外光谱数据与其对应的真实含量值做回归拟合计算,建立校正模型,并采用评价指标考察其稳定性和预测精度。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤三中,评价指标包括交互验证标准偏差、主因子数、决定系数,通过交互验证标准偏差和决定系数优选出最佳模型,当决定系数(R2)接近于1,交互验证误差均方根(SECV)小于10%时,说明数学模型具有较好的稳定性和预测精度。优选的,所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,所述步骤四中,所述待测灵芝孢子油通过步骤一中的处理方法后再进行高效液相色谱测定。与现有技术相比,本专利技术的有益效果:本方法建立了近红外光谱法快速测定灵芝孢子油中成分含量的分析方法。在研究中,对近红外原始光谱进行预处理,并优选出合适的建模波段,采用偏最小二乘法建立了各指标成分的含量定量分析校正模型。与HPLC法相比较,近红外光谱法操作更为简便、快速,且适合大批量灵芝孢子油样品的含量测定,能够满足工业化生产中对大规模样品信息采集的需求,对制剂最终产品的稳定性可控具有重要意义。附图说明图1为实施例1中麦角甾醇的标准曲线;图2为实施例1灵芝孢子油中麦角甾醇的真实值与预测值的关系图;图3为实施例1待测灵芝孢子油中麦角甾醇的真实值与预测值的关系图。具体实施方式为更好地理解本专利技术,下面通过以下实施例对本专利技术作进一步具体的阐述,但不可理解为对本专利技术的限定,对于本领域的技术人员根据上述
技术实现思路
所作的一些非本质的改进与调整,也视为落在本专利技术的保护范围内。实施例1实验仪器及试剂:美国戴安高效液相色谱仪ULtiMate3000(包括梯度泵SR-3000、自动进样器WPS-3000、柱恒温系统TCC-3000、紫外检测器DAD-3100、色谱工作站变色龙7.2);XS205DuaLRange型十万分之一分析天平(梅特勒-托利多仪器(上海)。试剂:甲醇(色谱纯,德国默克公司)、纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)及其他试剂。标准品溶液的配制:取适量的麦角甾醇,用甲醇溶解摇匀,制成1ml含有0.0804mg的标准品溶液。供试品溶液的制备:取灵芝孢子油0.32g,加6ml二氯甲烷-甲醇溶液溶解,二氯甲烷-甲醇溶液中二氯甲烷:甲醇=1:1,过0.45μm微孔滤膜,即得供试品溶液。重复以上操作,制备出90份的供试品溶液。标准曲线的绘制:色谱柱HypersilODS(4.6mm×250mm,5μm),流动相为100%甲醇,洗脱时间15min。流速1.0mL/min;柱温25℃;检测波长282nm,进样量10μl。高效液相色谱测试条件保持一致,以不同浓度的标准品进样经HPLC检测,以峰面积为纵坐标,进样质量为横坐标,线性方程为y=18.424x+0.0405,R=0.9998,结果如表1所示,并且整理成图1。表1麦角甾醇的标准曲线对90份灵芝孢子油进行近红外光谱检测,并将其制备的供试品溶液经HPLC检测,根据表1线性拟合方程,计算出对应成分的含量,并得出结果如下表2:表2灵芝孢子油的供试品溶液HPLC含量测定结果光谱预处理方法包括卷积平滑、一阶卷积求导(1D)、二阶卷积求导(2D)、多元散射校正(MSC)、标准正态变量变换(SNV)、归一化法等。采用多种波长选择方法包括全波长、相关系数法、迭代优化等对光谱进行波长的选择。采用偏最小二乘法对样品的光谱数据本文档来自技高网
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一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法

【技术保护点】
一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,将灵芝孢子油用二氯甲烷‑甲醇溶解后,过滤,所得滤液即为供试品溶液;步骤二,对灵芝孢子油进行近红外光谱检测并通过高效液相色谱测定相应灵芝孢子油的供试品溶液中有效成分的浓度;步骤三,选择合理的建模近红外光谱数据区域,建立近红外光谱数据与供试品溶液中有效成分的浓度之间的对应关系;步骤四,利用建立的对应关系,通过对待测灵芝孢子油进行红外光谱检测,实现对待测灵芝孢子油中有效成分的浓度测定。

【技术特征摘要】
1.一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,将灵芝孢子油用二氯甲烷-甲醇溶解后,过滤,所得滤液即为供试品溶液;步骤二,对灵芝孢子油进行近红外光谱检测并通过高效液相色谱测定相应灵芝孢子油的供试品溶液中有效成分的浓度;步骤三,选择合理的建模近红外光谱数据区域,建立近红外光谱数据与供试品溶液中有效成分的浓度之间的对应关系;步骤四,利用建立的对应关系,通过对待测灵芝孢子油进行红外光谱检测,实现对待测灵芝孢子油中有效成分的浓度测定。2.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于:所述步骤一中,称取0.32g灵芝孢子油,加6ml二氯甲烷-甲醇溶液溶解,二氯甲烷-甲醇溶液中二氯甲烷与甲醇溶液体积比为1:1,均匀混合后,过0.45μm的微孔滤膜,即得供试品溶液。3.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于:所述步骤一中,供试品溶液不止20份,称取灵芝孢子油依次进行近红外光谱检测后,再依次制备供试品溶液用于高效液相色谱检测,所得检测数据用于建立对应关系。4.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于:所述步骤二中,采用高效液相色谱测定浓度时,流动相为甲醇,洗脱时间15min,流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长282nm,进样量10μl。5.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子油近红外检测质量含量的方法,其特征在于:所述步骤二中,灵芝孢子油进行近红外光谱检测时,以空气为背景...

【专利技术属性】
技术研发人员:马晋芳张易葛发欢史庆龙李海池
申请(专利权)人:广州中大南沙科技创新产业园有限公司中山大学
类型:发明
国别省市:广东,44

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