水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法技术

技术编号:17777568 阅读:41 留言:0更新日期:2018-04-22 05:04
本发明专利技术公开了一种水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法,步骤:(1)测定一水生经济动物从放苗到收获区间,池塘中无机氮盐NaNO3、NaNO2和NH4Cl的浓度变化范围;(2)根据最小、最大N浓度,设计七个N浓度梯度;(3)以不含氮的湛水107‑13培养液为培养液,按设计,分别用NaNO3、NaNO2和NH4Cl配七个N浓度梯度的培养液,再相应加入

【技术实现步骤摘要】
水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法
本专利技术涉及稳定同位素检测
,特别涉及水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法。
技术介绍
长期以来,由于缺乏一个整体技术,氮在水陆生态系统各种流动途径和在食物网中的贡献无法被定量研究。近年来稳定氮同位素应用方面的研究发展迅速,已成为一种有效的示踪手段,在动植物生理生态学和环境科学领域发挥着不可替代的作用。在生态系统试验中添加重稳定同位素(例如13C或15N),能够追踪生源元素的来源、去向,过程并分析其对食物网和生态系统的贡献。通过同位素标记技术获得的信息往往是常规技术不能提供的,有时是全新的。这就扩充了人类对生态系统结构、能量流动、物质循环和对人类干扰响应的认识。为保护和恢复受损害的生态系统提供新的依据。随着我国经济的高速发展和人民生活水平的不断提高,水产养殖业迅速发展,为人民提供大量低脂高蛋白食品。但由于我国水产养殖行业尚没有精细化设定,在放苗、投饵等一系列生产过程中有很大的浪费,并且使得养殖水体富营养化问题严重。在治理水体富营养化的过程中还要兼顾水产品质量,所以只能利用生物治理措施,而利用微藻稳定养殖水体是最好的选择之一,其中氮元素是治理的关键因素之一。因此,对水产养殖过程中常见微藻的氮元素吸收速率的监测能够有效的评估养殖水体的健康状况。因此,有必要开发一种更加快速、准确的水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术存在的养殖水体富营养化治理时氮元素测定耗时长,人力物力消耗大的问题,提供一种水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法。本专利技术的技术方案概述如下:水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法,包括如下步骤:(1)测定一水生经济动物从放苗到收获区间,池塘中无机氮盐NaNO3、NaNO2和NH4Cl的浓度变化范围;(2)根据步骤(1)获得的最小N浓度和最大N浓度,设计七个N浓度梯度;(3)以不含氮的湛水107-13培养液为基础培养液,按照步骤(2)的设计,分别以NaNO3、NaNO2和NH4Cl为氮源,配置七个N浓度梯度的培养液,再向各个含NaNO3培养液中加入15N-NaNO3,使15N添加量为含NaNO3培养液中N质量的10%,向各个含NaNO2培养液中加入15N-NaNO2,使15N添加量为含NaNO2培养液中N质量的10%,向各个含NH4Cl培养液中加入15N-NH4Cl,使15N添加量为含NH4Cl培养液中N质量的10%,设置三个平行,再分别加入相同浓度的实验藻;(4)在光照培养箱中培养步骤(3)获得的样品,培养体积为50mL,培养温度为28℃,光照强度为39μmol.m-2.s-1,培养时间为4h;(5)用干燥恒重的玻璃纤维滤膜GF/C,分别抽滤步骤(4)获得的藻液,加入10mL去离子水冲洗,取出附有微藻的玻璃纤维滤膜GF/C,对折,60℃烘干、恒重、研磨后用锡纸包裹、冷冻保存,干燥恒重的玻璃纤维滤膜GF/C的重量为重量1;烘干恒重的附有微藻的玻璃纤维滤膜GF/C的重量为重量2,重量2与重量1之差即为所得微藻重量,采用EA-IRMS系统测定δ15N和微藻中N元素的重量百分含量;(6)由以下公式计算出微藻对无机氮的吸收速率:式①中:V为吸收速率,其单位为:ug·g-1·h-1;15Ns为培养后藻类样品的15N丰度;15Nn为藻样15N的天然丰度,为0.00365;15Nenr为加入示踪剂后培养介质初始的15N丰度,为0.98;T为培养时间,其单位为h;PON为微藻所含的总氮,其单位为ug·g-1。(公式①来源:R.C.Dugdale,F.P.Wilkerson.Theuseof15Ntomeasurenitrogenuptakeineutrophicoceans;experimentalconsiderations1,2[J].Limnologyandoceanography,1986,31(4):673-689.)本专利技术的优点:全面了解水产品所处的生态环境,包括水体的环境和其他相关的生物。其次,能够准确的了解微藻中氮元素的来源和去向,为水产品生产过程提供依据。附图说明图1为波吉卵囊藻对不同浓度硝酸盐氮的吸收速率。图2为波吉卵囊藻对不同浓度亚硝酸盐氮的吸收速率。图3为波吉卵囊藻对不同浓度氨氮的吸收速率。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术作进一步的说明。本专利技术是以波吉卵囊藻为实验藻,但此藻并不对本专利技术的方法进行限定。还可以采用其它的藻。配制不含氮的湛水107-13培养液;K2HPO48mg;FeC6H5O7(1%溶液)0.2mg;维生素B1200μg;维生素B120.5~1.5μg;NaHCO31g;海水1000mL。实施例1.水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法,包括如下步骤:(1)测定一水生经济动物(以南美白对虾为例)从放苗到收获区间(约4个月),池塘中无机氮盐NaNO3、NaNO2和NH4Cl的浓度变化范围;(2)根据步骤(1)获得的最小N浓度和最大N浓度(三个无机氮盐中N浓度最小值和N浓度最大值),设计七个N浓度梯度,分别为3.000mg·L-1、6.000mg·L-1、13.000mg·L-1、19.000mg·L-1、29.000mg·L-1、44.000mg·L-1、88.000mg·L-1;(3)以不含氮的湛水107-13培养液为基础培养液,按照步骤(2)的设计,分别以NaNO3、NaNO2和NH4Cl为氮源,配置七个N浓度梯度的培养液,再向各个含NaNO3培养液中加入15N-NaNO3,使15N添加量为含NaNO3培养液中N质量的10%,向各个含NaNO2培养液中加入15N-NaNO2,使15N添加量为含NaNO2培养液中N质量的10%,向各个含NH4Cl培养液中加入15N-NH4Cl,使15N添加量为含NH4Cl培养液中N质量的10%,设置三个平行,再分别加入相同浓度(2.288×108cell·L-1)的实验藻波吉卵囊藻;(4)在光照培养箱中培养步骤(3)获得的样品,培养体积为50mL,培养温度为28℃,光照强度为39μmol.m-2.s-1,培养时间为4h;(5)用干燥恒重的玻璃纤维滤膜GF/C,分别抽滤步骤(4)获得的藻液,加入10mL去离子水冲洗,取出附有微藻的玻璃纤维滤膜GF/C,对折,60℃烘干、恒重、研磨后用锡纸包裹、冷冻保存,干燥恒重的玻璃纤维滤膜GF/C的重量为重量1;烘干恒重的附有微藻的玻璃纤维滤膜GF/C的重量为重量2,重量2与重量1之差即为所得微藻重量,采用EA-IRMS系统测定δ15N和微藻中N元素的重量百分含量;(6)由以下公式可计算出微藻对无机氮的吸收速率:其中:V为吸收速率,其单位为:ug·g-1·h-1;15Ns为培养后藻类样品的15N丰度;15Nn为藻样15N的天然丰度,为0.00365;15Nenr为加入示踪剂后培养介质初始的15N丰度,为0.98;T为培养时间,其单位为h,为4h;PON为微藻所含的总氮,其单位为ug·g-1。(公式①来源:R.C.Dugdale,F.P.Wilkerson.Theuseof15Ntomeasurenitrogenuptakeineutrophi本文档来自技高网...
水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法

【技术保护点】
水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法,其特征是包括如下步骤:(1)测定一水生经济动物从放苗到收获区间,池塘中无机氮盐NaNO3、NaNO2和NH4Cl的浓度变化范围;(2)根据步骤(1)获得的最小N浓度和最大N浓度,设计七个N浓度梯度;(3)以不含氮的湛水107‑13培养液为基础培养液,按照步骤(2)的设计,分别以NaNO3、NaNO2和NH4Cl为氮源,配置七个N浓度梯度的培养液,再向各个含NaNO3培养液中加入

【技术特征摘要】
1.水产养殖池塘中常见微藻的无机氮吸收速率的检测方法,其特征是包括如下步骤:(1)测定一水生经济动物从放苗到收获区间,池塘中无机氮盐NaNO3、NaNO2和NH4Cl的浓度变化范围;(2)根据步骤(1)获得的最小N浓度和最大N浓度,设计七个N浓度梯度;(3)以不含氮的湛水107-13培养液为基础培养液,按照步骤(2)的设计,分别以NaNO3、NaNO2和NH4Cl为氮源,配置七个N浓度梯度的培养液,再向各个含NaNO3培养液中加入15N-NaNO3,使15N添加量为含NaNO3培养液中N质量的10%,向各个含NaNO2培养液中加入15N-NaNO2,使15N添加量为含NaNO2培养液中N质量的10%,向各个含NH4Cl培养液中加入15N-NH4Cl,使15N添加量为含NH4Cl培养液中N质量的10%,设置三个平行,再分别加入相同浓度的实验藻;(4)在光照培养箱中培养步骤(3)获得的样品,培养...

【专利技术属性】
技术研发人员:王雅琼李军乔马晓东黄翔鹄
申请(专利权)人:青海民族大学
类型:发明
国别省市:青海,63

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