一种蛋白多肽的制备方法及获得的蛋白多肽技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种蛋白多肽的制备方法及获得的蛋白多肽。本发明专利技术提供的蛋白多肽的制备方法是采用电流进行细胞和蛋白质降解，接着加入弹性蛋白进行酶解，可以制得分子量低于1000Da的蛋白多肽。本发明专利技术提供的蛋白多肽的制备方法具有工艺简单，易于控制，制备周期短，制备得到的蛋白多肽收率高，纯度高的优点。而且本发明专利技术制备得到的分子量低于1000Da的蛋白多肽对男性性功能具有显著的改善作用，为广大男性同胞带来福音。

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白多肽的制备方法及获得的蛋白多肽
本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种蛋白多肽的制备方法及获得的蛋白多肽。
技术介绍
牡蛎，又称蚝、蛎黄、海蛎子，是一种双壳类软体动物，属软体动物门，瓣鳃纲，牡蛎科。牡蛎是全球的第一大养殖贝类，主要分布在温带和热带的各大洋沿岸，同时也是我国四大养殖贝类之一。《本草拾遗》记载牡多具有“煮食，主虚损于姜醋中生食之，主丹毒，酒后烦热，止渴”的功效。但由于牡蛎的生产季节强，且有较强的鱼腥味，限制其应用领域。蚂蟥也称水蛭，作为一味传统中药，历史悠久，中医认为水蛭有破血、逐淤、通经等功效。自从二十世纪五十年代从医用水蛭中分离出具有抗凝作用的物质一水蛭素后，国内外已对其进行了广泛而深入的药理学研究。传統中药的服用也是用水煮分解并提取(干品)水蛭中的多肽物质，只是用水煮方式得到的水蛭多肽物质非常有限。鹿血为鹿科动物梅花鹿和马鹿的血液，系名贵中药。鹿血在民间也广为流传，视为中药之上品。明代李时珍则对鹿血的医疗作用做了较为详细的研究，在《本草纲目》中记载为大补虚损，益精血，解痘毒、药毒等。近代，通过动物实验和临床研究证明了鹿血确实具有养颜容、治疗贫血，调节免疫，延缓衰老，改善记忆，抗疲劳，改善性功能等多项治疗保健作用。牡蛎、水蛭和鹿血都是十分珍贵的药用原料，目前制成的保健品存在大量的大分子蛋白，不利于人体的吸收和利用，大大的降低了药效。为了使药物更易于人体吸收，一般会采用用酸、碱或者酶来进行大分子蛋白质的水解，用酸碱水解比较彻底，速度快，但水解程度不能控制，而且会对某些氨基酸造成破坏。虽然酶解不会破幻氨基酸，但是目前的复合蛋白水解时间较长，水解后的寡肽含量较低，还不能满足现代社会的需求。因此，研究和开发出一种工艺简单，水解后寡肽分子含量多的蛋白多肽的制备工艺仍是当前研究的热点。
技术实现思路
为了解决现有技术中在制备蛋白多肽的过程中存在的缺陷，本专利技术的目的是提供一种蛋白多肽的制备方法及获得的蛋白多肽，制备得到的蛋白多肽的分子量小于1000Da，易于人体吸收。本专利技术提供了一种蛋白多肽的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将牡蛎、鹿血、水蛭和水研磨得到混合浆液；步骤2、往步骤1得到的混合浆液中通入交流电流，处理4～8min，切断电源，接着通入恒压反向电流处理10～20min后，通入恒压正向电流处理8～16min，得混合液I；步骤3、将步骤1得到的混合液I置于室温搅拌20～30min，然后加入弹性蛋白酶，在中性温室条件下酶解1～2h后，升温至75～95℃灭酶，离心，取上清，获得酶解粗液；步骤4、将步骤3得到的酶解粗液用陶瓷膜过滤，获得多肽精制液；步骤5、将步骤4得到的多肽精制液浓缩、冷冻干燥，即得。进一步地，所述步骤1中的原料重量份数为：牡蛎10～20份、鹿血15份、水蛭5～10份和水30～40份。进一步地，所述步骤2中交流电流的频率为8200～9500Hz，电压为2000～3000V。进一步地，所述步骤2中的恒压反向电流和恒压正向电流的电压为500～600V。进一步地，所述步骤3中弹性蛋白酶的添加量是混合液I总重量的0.1～0.9‰。进一步地，所述步骤3中的离心条件为：在转速为9000～10000rpm的条件下离心8～12min。进一步地，所述步骤4中的陶瓷膜的孔径为20～50μm。进一步地，所述步骤5中的冷冻干燥的条件为：在温度为-60℃～-70℃，真空度为15～20pa条件下冷冻2～4h，接着在温度为40～50℃干燥10～12h。进一步地，所述步骤5中制备得到的蛋白多肽的分子量小于1000Da。此外，本专利技术还提供了所述的蛋白多肽的制备方法制备得到的蛋白多肽。目前，对于蛋白多肽的水解一般采用由内切酶与外切酶复配精制而成的复合蛋白酶进行酶切反应，但是酶解后的目标肽得率较低，副产物较多，而且复合酶的最适条件难以控制。本专利技术提供的蛋白多肽的制备方法是采用电流进行细胞和蛋白质的降解，接着加入弹性蛋白进行酶解，可以制得分子量低于1000Da的蛋白多肽，而且还具有产率高，纯度高的优点，是一种较为理想的蛋白多肽的制备方法。细胞的基本结构是细胞膜、细胞质和细胞核。细胞膜是包围在细胞质外周的一层界膜，它将细胞质与外环境分隔开，使细胞形成一个相对独立而稳定的内环境。根据细胞的特性，专利技术人经大量的摸索试验发现，采用交流电流可以高效的分解细胞膜和蛋白质，在经交流电流处理后再通入恒压反向电流处理，接着通入恒压正向电流处理可以进一步的分解大分子蛋白质，得到含羧基的大分子多肽，最后加入弹性蛋白酶，进一步分解得到分子量小于1000Da的蛋白多肽。究其原因是，细胞膜的两表面带有极性相反的自由电荷，蛋白质是两性物质，交流电流可以高效的分解细胞膜和蛋白质，接着先通入恒压反向电流处理再通入恒压正向电流可以破坏细胞膜和蛋白质的极性，形成含羧基的多肽键的大分子多肽，加入弹性蛋白酶内切酶，可以得到分子量小于1000Da的蛋白多肽。另外，专利技术人还发现，将牡蛎、鹿血与水蛭按一定的比例混合制成的分子量小于1000Da的蛋白多肽粉对男性性功能具有显著的治疗作用。本专利技术还提供了将制备得到的蛋白多肽粉应用在辅助治疗提高男性性功能的保健品、食品以及药品中。与现有技术相比，本专利技术提供的蛋白多肽的制备方法有益效果为：(1)本专利技术提供的蛋白多肽的制备方法具有工艺简单，易于控制，制备时间短的优点，有利于工业化生产；(2)本专利技术提供的蛋白多肽的制备方法制备得到的蛋白多肽分子量小，纯度高，无腥味、口感好，可作为蛋白营养补充剂直接食用，也可作为临床营养品、保健食品以及其他功能配料应用；(3)本专利技术提供的蛋白多肽的制备方法制备得到的蛋白多肽在提高男性性功能方面具有显著的效果，为广大男性同胞带来福音。具体实施方式：以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，对于本领域的技术人员来说，本专利技术可以有各种更改和变化。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。实施例1、一种蛋白多肽的制备步骤1、将牡蛎10份、鹿血15份、水蛭6份和水30份研磨得到混合浆液；步骤2、往步骤1得到的混合液中通入交流电流，所述交流电流的频率为8200Hz，电压为2000V，处理8min，切断电源，接着通过恒压反向电流处理20min后，所述恒压反向电流的电压为500V，通入恒压正向电流处理16min，所述恒压正向电流的电压为500V，得混合液I；步骤3、将步骤1得到的混合液I置于室温搅拌20min，然后加入弹性蛋白酶，所述弹性蛋白酶的添加量是混合液I总重量的0.3‰，在中性温室条件下1h后，升温至75℃灭酶，在转速为9000rpm的条件下离心12min，取上清，获得酶解粗液；步骤4、将步骤3得到的酶解粗液用孔径为30μm的陶瓷膜过滤，获得多肽精制液；步骤5、将步骤4得到的多肽精制液浓缩，在温度为-60℃，真空度为15pa条件下冷冻2h，接着在温度为40℃干燥10h，得分子量小于1000Da的蛋白多肽。实施例2、一种蛋白多肽的制备步骤1、将牡蛎16份、鹿血15份、水蛭8份和水35份研磨得到混合浆液；步骤2、往步骤1得到的混合液中通入交流电流，所述交流电流的频率为9000Hz，电压为2500V，处理6min，切断电源，接着通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将牡蛎、鹿血、水蛭和水研磨得到混合浆液；步骤2、往步骤1得到的混合浆液中通入交流电流，处理4～8min，切断电源，接着通入恒压反向电流处理10～20min后，通入恒压正向电流处理8～16min，得混合液I；步骤3、将步骤2得到的混合液I置于室温搅拌20～30min，然后加入弹性蛋白酶，在中性温室条件下酶解1～2h后，升温至75～95℃灭酶，离心，取上清，得酶解粗液；步骤4、将步骤3得到的酶解粗液用陶瓷膜过滤，得多肽精制液；步骤5、将步骤4得到的多肽精制液浓缩、冷冻干燥，即得。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将牡蛎、鹿血、水蛭和水研磨得到混合浆液；步骤2、往步骤1得到的混合浆液中通入交流电流，处理4～8min，切断电源，接着通入恒压反向电流处理10～20min后，通入恒压正向电流处理8～16min，得混合液I；步骤3、将步骤2得到的混合液I置于室温搅拌20～30min，然后加入弹性蛋白酶，在中性温室条件下酶解1～2h后，升温至75～95℃灭酶，离心，取上清，得酶解粗液；步骤4、将步骤3得到的酶解粗液用陶瓷膜过滤，得多肽精制液；步骤5、将步骤4得到的多肽精制液浓缩、冷冻干燥，即得。2.根据权利要求1所述的蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的原料重量份数为：牡蛎10～20份、鹿血15份、水蛭5～10份和水30～40份。3.根据权利要求1所述的蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的交流电流的频率为8200～9500Hz，电压为2000～3000V。4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：江小元，
申请(专利权)人：广东正当年生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44