一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉制造技术

本发明专利技术公开了一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，涉及甜叶菊提取技术领域，以多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。本发明专利技术以戊二醛作为交联剂，利用戊二醛两端的醛基分别与载体和绿色木霉上的氨基反应形成碳氮双键，使绿色木霉有效地共价交联在载体上，从而利用绿色木霉破坏植物细胞壁，以利于甜叶菊中所含甜菊糖苷的快速浸出，进而提高甜菊糖苷的提取率。

【技术实现步骤摘要】
一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉
：本专利技术涉及甜叶菊提取
，具体涉及一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉。
技术介绍
：甜叶菊，菊科、甜叶菊属多年生草本植物。茎直立，基部梢木质化，上部柔嫩，密生短茸毛，花冠基部浅紫红色或白色，上部白色。瘦果线形，稍扁，褐色，具冠毛。甜叶菊喜在温暖湿润的环境中生长，对光敏感。甜菊糖苷，又称甜菊苷，是从甜叶菊叶子中提取出来的一种糖苷。甜菊糖苷是一种低热量、高甜度的天然甜味剂，是食品及药品工业的原料之一。目前，甜菊糖苷的常规提取方法是通过将甜叶菊干叶浸泡在水中，过滤将液体与叶、茎分离，进一步利用水或食品级酒精等进行提纯。这种水提法虽然对设备要求简单，以水作为提取溶剂，成本低且对环境友好，但提取时间长，并且甜菊糖苷的提取率低，难以满足甜菊糖苷的大规模生产。
技术实现思路
：本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种利用酶解法提高甜菊糖苷提取率的甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉。本专利技术所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，以多聚谷氨酸-氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。所述载体固定化绿色木霉的制备方法为：先将载体多聚谷氨酸-氢化蓖麻油溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入25％戊二醛水溶液和绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油、25％戊二醛水溶液、绿色木霉的质量比为50:5-10:0.5-5。所述缓冲溶液I选自甘氨酸-盐酸缓冲溶液、乙酸-乙酸钠缓冲溶液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中的一种，溶液pH值在3-4。所述缓冲溶液II选自柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液、三羟基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液中的一种，溶液pH值在6-7。所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油的制备步骤为：搅拌下向食品级多聚谷氨酸中滴加45-50℃水直至完全溶解，并利用稀硫酸调节溶液pH值至4-5，再加入氢化蓖麻油，加热至回流状态保温搅拌反应，酯化反应结束后所得混合物减压浓缩制成固含量65-70％的膏体，待膏体自然冷却至室温后送入冷冻干燥机中，干燥所得固体经超微粉碎机制成微粉，即得多聚谷氨酸-氢化蓖麻油。所述食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油的质量比为40:5-10。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术以戊二醛作为交联剂，利用戊二醛两端的醛基分别与载体和绿色木霉上的氨基反应形成碳氮双键，使绿色木霉有效地共价交联在载体上，从而利用绿色木霉破坏植物细胞壁，以利于甜叶菊中所含甜菊糖苷的快速浸出，进而提高甜菊糖苷的提取率；(2)本专利技术以自制多聚谷氨酸-氢化蓖麻油作为载体，属于水溶性载体，利用其特有的水溶性和吸附性使绿色木霉有力附着于甜叶菊上，通过快速破坏甜叶菊的植物细胞壁以进一步加快甜菊糖苷的浸出速度，使甜菊糖苷提取率达到90％以上。具体实施方式：为了使本专利技术实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。实施例1载体固定化绿色木霉的制备：先将50g载体多聚谷氨酸-氢化蓖麻油溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入5g25％戊二醛水溶液和2g绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。缓冲溶液I选自甘氨酸-盐酸缓冲溶液，溶液pH值在3-4；缓冲溶液II选自柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，溶液pH值在6-7。多聚谷氨酸-氢化蓖麻油的制备：搅拌下向40g食品级多聚谷氨酸中滴加45-50℃水直至完全溶解，并利用稀硫酸调节溶液pH值至4-5，再加入5g氢化蓖麻油，加热至回流状态保温搅拌反应，酯化反应结束后所得混合物减压浓缩制成固含量65-70％的膏体，待膏体自然冷却至室温后送入冷冻干燥机中，干燥所得固体经超微粉碎机制成微粉，即得多聚谷氨酸-氢化蓖麻油。实施例2载体固定化绿色木霉的制备：先将50g载体多聚谷氨酸-氢化蓖麻油溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入5g25％戊二醛水溶液和2.5g绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。缓冲溶液I选自甘氨酸-盐酸缓冲溶液，溶液pH值在3-4；缓冲溶液II选自柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，溶液pH值在6-7。多聚谷氨酸-氢化蓖麻油的制备：搅拌下向40g食品级多聚谷氨酸中滴加45-50℃水直至完全溶解，并利用稀硫酸调节溶液pH值至4-5，再加入8g氢化蓖麻油，加热至回流状态保温搅拌反应，酯化反应结束后所得混合物减压浓缩制成固含量65-70％的膏体，待膏体自然冷却至室温后送入冷冻干燥机中，干燥所得固体经超微粉碎机制成微粉，即得多聚谷氨酸-氢化蓖麻油。对照例1以N-琥珀酰壳聚糖替代实施例2中的载体。对照例2载体固定化绿色木霉的制备：先将50g载体多聚谷氨酸溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入5g25％戊二醛水溶液和2.5g绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。缓冲溶液I选自甘氨酸-盐酸缓冲溶液，溶液pH值在3-4；缓冲溶液II选自柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，溶液pH值在6-7。实施例3分别利用实施例1、实施例2、对照例1、对照例2所制5g载体固定化绿色木霉对同批100g甜叶菊进行甜菊糖苷的提取，以500g水作为提取溶剂，水提温度45-50℃、水提时间90min，测定甜菊糖苷提取率，结果如表1所示。同时设置添加与5g载体固定化绿色木霉活力相当的游离绿色木霉作为对照例3、以及不添加载体固定化绿色木霉和游离绿色木霉的空白对照例4。表1本专利技术甜菊糖苷的提取率组别提取率/％实施例193.8实施例294.2对照例188.7对照例279.4对照例375.6对照例458.3以上显示和描述了本专利技术的基本原理和主要特征和本专利技术的优点。本行业的技术人员应该了解，本专利技术不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本专利技术的原理，在不脱离本专利技术精神和范围的前提下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本专利技术范围内。本专利技术要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，其特征在于：以多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。

【技术特征摘要】
1.一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，其特征在于：以多聚谷氨酸-氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。2.根据权利要求1所述的甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，其特征在于，其制备方法为：先将载体多聚谷氨酸-氢化蓖麻油溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入25％戊二醛水溶液和绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。3.根据权利要求2所述的甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，其特征在于：所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油、25％戊二醛水溶液、绿色木霉的质量比为50:5-10:0.5-5。4.根据权利要求2所述的甜叶菊提取甜菊糖苷用载...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢飞，邢伟，刘利，艾来兵，
申请(专利权)人：蚌埠市华东生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34