一种液体酶制剂组合物的保存方法技术

本发明专利技术属于酶制剂应用技术领域，具体提供了一种液体酶制剂组合物的保存方法。将按重量百分比10％～30％的酸性纤维素酶、5％～20％的酸性甘露聚糖酶、20％～50％的酸性木聚糖酶，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；将按重量百分比50％～80％的酸性蛋白酶、10％～40％的甘油，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；将酶制剂组合物混合液Ⅰ和酶制剂组合物混合液Ⅱ按重量比为2：3进行混匀，立即在50～60r/min转速下搅拌10～20min，得到终产品液体酶制剂组合物。本发明专利技术提供的方法，可以使非淀粉多糖酶和酸性蛋白酶的液体复合酶在长期储存时或者同时使用时各自的酶活力不受影响，降低成本。

【技术实现步骤摘要】
一种液体酶制剂组合物的保存方法
本专利技术属于酶制剂应用领域，具体涉及一种液体酶制剂组合物的保存方法。
技术介绍
酸性蛋白酶是一种催化蛋白质中肽键水解的酶类，而酸性纤维素酶、酸性木聚糖酶、酸性果胶酶和酸性蛋白酶本质上均为蛋白质，所以将其他酶和酸性蛋白酶复合在一起时，酸性蛋白酶本身会发生自溶现象，同时酸性蛋白酶也会降解其他酸性酶，造成其他酸性酶和酸性蛋白酶的酶活力急速下降。酸性纤维素酶、酸性甘露聚糖酶、酸性木聚糖酶和酸性蛋白酶的复合酶在25℃下保存7天，即可造成酸性纤维素酶、酸性甘露聚糖酶、酸性木聚糖酶和酸性蛋白酶的平均酶活力损失在90％以上。另外，酸性蛋白酶降解蛋白质这一特性也造成了其使用过程中不能和其他酸性酶同时使用，否则会很大程度上降低其他酸性酶和酸性蛋白酶本身的应用效果。为了保证在使用过程中的应用效果，现行办法是将酸性蛋白酶与其他酸性酶分开储存和使用，这就造成了储存和运输成本的增加，而且二者分开使用也造成了使用成本的增加。
技术实现思路
基于此，本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种液体酶制剂组合物的保存方法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：本专利技术一种液体酶制剂组合物的保存方法，包括以下步骤：(1)将按重量百分比10％～30％的酸性纤维素酶、5％～20％的酸性甘露聚糖酶、20％～50％的酸性木聚糖酶、0.1％～0.5％的壳聚糖与0.1％～0.5％的黄原胶在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～20％的麦芽糖、5％～20％的葡萄糖继续在50-60r/min转速下搅拌5～20min，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；(2)将按重量百分比50％～80％的酸性蛋白酶、10％～40％的甘油在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～10％氨基酸和1％～5％的丙酸钙继续在50-60r/min转速下搅拌5～20min，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；(3)将步骤(1)所得酶制剂组合物Ⅰ和步骤(2)所得酶制剂组合物Ⅱ按重量比为2：3进行混匀，立即在50～60r/min转速下搅拌10～20min，得到终产品液体酶制剂组合物。优选地，在步骤(1)中，所述壳聚糖为脱乙酰度85％的壳聚糖。优选地，在步骤(1)中，所述酶制剂组合物混合液Ⅰ的pH值在4.6～4.8。优选地，在步骤(2)中，所述氨基酸为丙氨酸和丝氨酸按照1:1的重量比的混合物。优选地，在步骤(2)中，所述酶制剂组合物混合液Ⅱ的pH值在4.6～4.8。优选地，在步骤(3)中，所述终产品酶制剂组合物的密度为1.1～1.2g/mL。本专利技术所达到的有益效果是：酶参与催化降解作用的主要方式是通过酶分子的活性部位完成的，酶分子的活性部位被覆盖包裹后，酶就会掩蔽其催化降解的能力。酸性蛋白酶水解蛋白质后的主要产物是多肽和氨基酸，当在酶液中多肽或氨基酸的含量达到一定限度时，酸性蛋白酶会发生钝化，酶分子的活性部位即受到了抑制，酸性蛋白酶的活性部位就会被完全覆盖包裹，从而使酸性蛋白酶暂时性失去催化降解作用。使用过程中当溶液中多肽或氨基酸的含量降低时，从而释放出酸性蛋白酶的活性部位。这样即达到了限制酸性蛋白酶的自溶和降解复合酶中其他酶的作用，又不会影响到使用效果。酶的活性功能决定于其分子结构的完整性和严格的构象，温度升高会导致酶的空间结构破坏，从而丧失其原有的生物活性，黄原胶大分子具有网状结构可产生筛孔效应，对较小的酶蛋白分子进行空间限位，减少了酶分子之间的相互碰撞，一定程度上提高了酶分子的热稳定性；亲水性黄原胶大分子的加入使得水的自由度变小，加强了酶蛋白分子的疏水作用；黄原胶大分子上一些疏水集团与酶分子表面的疏水区域或孔发生疏水相互作用，使酶吸附于大分子介质上，增加了酶分子表面的亲水性，也就提高了酶的稳定性。甘油对酶稳定性的作用，可能是羟基集团和酶分子的相互作用或是醇类减少了介质的介电常数，加强了酶分子的疏水作用。壳聚糖具有较好的抗菌活性，能抑制一些真菌、细菌、和病毒的生长繁殖。其作用机制有三：一是由于壳聚糖的多聚阳离子，易于真菌细胞表面带负电荷的基团作用，从而改变病原菌细胞膜的流动性和通透性；二是干扰DNA的复制与转录；三是阻断病原菌代谢。一方面加入壳聚糖后防止酶制剂组合物受到微生物污染，而缩短保质期；另一方面，加入壳聚糖后使酶制剂组合物的液体粘度变大，酶分子的活动空间相对减少，也可以间接延长酶制剂组合物的保质期。麦芽糖和葡萄糖对酶制剂组合物的保护，一方面是增大了溶液的粘度，另一方面，葡萄糖是纤维素酶的最终产物，可以起到底物抑制反应的正向发生作用。在我们的研究过程中惊奇的发现，加入麦芽糖和葡萄糖后，酶活的保存率可以显著提高50％以上，可能糖对酶活有一定钝化作用，是酶的天然保护剂。丙酸钙在水溶液中可以水解为钙离子和丙酸根，钙离子也是生物酶的高效保护剂，丙酸钙是酸性食品防腐剂，在酸性条件下，产生游离丙酸，具有抗菌作用。其抑菌作用受环境pH值的影响，在pH值5.0时霉菌的抑制作用最佳；pH值6.0时抑菌能力明显降低，最小抑菌浓度为0.01％。在酸性介质(淀粉、含蛋白质和油脂物质)中对各类霉菌、革兰氏阴性杆菌或好氧芽孢杆菌有较强的抑制作用，还可以抑制黄曲霉素的产生，对人畜无害，无毒副作用。是食品、酿造、饲料、中药制剂诸方面的一种新型、安全、高效的食品与饲料用防霉剂。本专利技术配方中的麦芽糖、葡萄糖、丙酸钙、壳聚糖、黄原胶、甘油在整个酶制剂组合物中的稳定性贡献是相辅相成，不可分割的，而且用量是经过了大量的实验摸索证实，添加量多或者少都会起到反作用。具体实施方式以下对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1本专利技术一种液体酶制剂组合物的保存方法，包括以下步骤：(1)将按重量百分比30％的酸性纤维素酶、20％的酸性甘露聚糖酶、20％的酸性木聚糖酶、0.5％的壳聚糖与0.5％的黄原胶在50r/min转速下搅拌5min，然后再加入20％的麦芽糖、9％的葡萄糖继续在50r/min转速下搅拌20min，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；(2)将按重量百分比50％的酸性蛋白酶、40％的甘油在50r/min转速下搅拌10min，然后再加入5％氨基酸和5％的丙酸钙继续在60r/min转速下搅拌5min，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；(3)将步骤(1)所得酶制剂组合物Ⅰ和步骤(2)所得酶制剂组合物Ⅱ按重量比为2：3进行混匀，立即在50r/min转速下搅拌20min，得到终产品液体酶制剂组合物。实施例2本专利技术一种液体酶制剂组合物的保存方法，包括以下步骤：(1)将按重量百分比10％的酸性纤维素酶、20％的酸性甘露聚糖酶、50％的酸性木聚糖酶、0.1％的壳聚糖与0.1％的黄原胶在60r/min转速下搅拌10min，然后再加入5％的麦芽糖、14.8％的葡萄糖继续在50r/min转速下搅拌20min，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；(2)将按重量百分比80％的酸性蛋白酶、10％的甘油在60r/min转速下搅拌10min，然后再加入5％氨基酸和5％的丙酸钙继续在60r/min转速下搅拌20min，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；(3)将步骤(1)所得酶制剂组合物Ⅰ和步骤(2)所得酶制剂组合物Ⅱ按重量比为2：3进行混匀本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液体酶制剂组合物的保存方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将按重量百分比10％～30％的酸性纤维素酶、5％～20％的酸性甘露聚糖酶、20％～50％的酸性木聚糖酶、0.1％～0.5％的壳聚糖、0.1％～0.5％的黄原胶在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～20％麦芽糖、5％～20％葡萄糖继续在50‑60r/min转速下搅拌5～20min，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；(2)将按重量百分比50％～80％的酸性蛋白酶、10％～40％的甘油在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～10％的氨基酸和1％～5％的丙酸钙继续在50‑60r/min转速下搅拌5～20min，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；(3)将步骤(1)所得酶制剂组合物Ⅰ和步骤(2)所得酶制剂组合物Ⅱ按重量比为2：3进行混匀，立即在50～60r/min转速下搅拌10～20min，得到终产品液体酶制剂组合物。

【技术特征摘要】
1.一种液体酶制剂组合物的保存方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将按重量百分比10％～30％的酸性纤维素酶、5％～20％的酸性甘露聚糖酶、20％～50％的酸性木聚糖酶、0.1％～0.5％的壳聚糖、0.1％～0.5％的黄原胶在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～20％麦芽糖、5％～20％葡萄糖继续在50-60r/min转速下搅拌5～20min，得到酶制剂组合物混合液Ⅰ；(2)将按重量百分比50％～80％的酸性蛋白酶、10％～40％的甘油在50～60r/min转速下搅拌5～10min，然后再加入5％～10％的氨基酸和1％～5％的丙酸钙继续在50-60r/min转速下搅拌5～20min，得酶制剂组合物混合液Ⅱ；(3)将步骤(1)所得酶制剂组合物Ⅰ和步骤(2)所得酶制剂组合物Ⅱ按重量比为2：3进行混匀，立即在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王双平，苏二正，陈龙，
申请(专利权)人：宁夏乙征生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏,64