半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及医药学领域，特别是涉及一种半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和用途。本发明专利技术的半枝莲均一多糖提取物由如下方法制得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。本发明专利技术的半枝莲均一多糖提取物可用于制备抑制人结肠癌细胞转移的药物。

【技术实现步骤摘要】
半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用
本专利技术涉及医药领域，特别是涉及一种半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
半枝莲(ScutellariabarbataD.Don)又称并头草、韩信草、赶山鞭、牙刷草，为唇形科黄芩属植物的干燥全草，全草可入药，在我国有较为广泛的分布，资源丰富。迄今为止对半枝莲的成分及药理作用有较为深入的研究，重点主要集中在黄酮类和生物碱类化合物，研究发现半枝莲提取物具有调节免疫系统、抗菌抑瘤、清热解毒、化瘀利尿、抗癌抗衰老等一系列功效，在临床实践上发挥了极大地作用。另外，多糖也是半枝莲的主要成分之一，半枝莲均一多糖能够剂量依赖性的抑制小鼠组织匀浆的自氧化以及体外脂质过氧化，增加巨噬细胞的吞噬能力以及血清溶血素抗体生成能力，此外半枝莲均一多糖可明显抑制肿瘤细胞的增殖同时增加机体免疫功能。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用。具体地说，本专利技术的第一方面是提供了一种半枝莲均一多糖提取物，所述半枝莲均一多糖提取物由如下方法制得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。本专利技术的第二方面是提供了一种半枝莲均一多糖提取物的制备方法，所述方法包括：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。本专利技术还提供了所述半枝莲提取物在制备抑制人结肠癌细胞转移的药物中的应用。本专利技术各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本专利技术的特点、目的和优势将更为明显。附图说明图1半枝莲均一多糖HPLC图，单一对称峰表明多糖为均一多糖图2半枝莲均一多糖对HT-29细胞的毒性检测，无毒性抑制作用图3半枝莲均一多糖对TGF-β1诱导的HT-29细胞转移能力的影响，显著抑制肿瘤细胞的转移图4半枝莲均一多糖对TGF-β1诱导的HT-29细胞侵袭能力的影响，显著抑制肿瘤细胞的侵袭图5半枝莲均一多糖对肿瘤细胞转移标志性蛋白的调控作用，显著促进上皮标志性蛋白的表达，抑制间质细胞标志性蛋白的表达图6半枝莲均一多糖对裸鼠体内肿瘤肝转移的影响，可显著抑制肿瘤细胞的肝转移能力具体实施方式本专利技术的问世部分是基于这样一个意外发现：用本专利技术的工艺提取获得的半枝莲均一多糖可以有效抑制肿瘤细胞转移。因此，该植物提取物可有望开发成为一种抗肿瘤转移的药物。具体而言，本专利技术的半枝莲均一多糖提取物可通过本专利技术的如下工艺从半枝莲中提取获得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。本专利技术的半枝莲均一多糖提取物可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本专利技术的半枝莲提取物及可药用载体。较佳地，本专利技术的药物组合物含有0.1～99.9％重量百分比的作为活性成分的本专利技术的半枝莲均一多糖提取物。“可药用载体”不会破坏本专利技术的半枝莲均一多糖提取物的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。所述可药用载体包括但不限于：软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸部分甘油酯混合物等。其他常用的药物辅料如粘合剂(如微晶纤维素)、填充剂(如淀粉、葡萄糖、无水乳糖和乳糖珠粒)、崩解剂(如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁)以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释剂、润湿剂等。本专利技术的半枝莲均一多糖提取物以及其药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服制剂包括胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等；非肠道给药制剂包括注射液等；局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。优选为口服制剂。本专利技术的半枝莲均一多糖提取物以及其药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉等。除了制成药剂之外，亦可在本专利技术的半枝莲均一多糖提取物中加入抗氧化剂、色素、酶制剂等各种食品添加剂，按本领域的常规方法制成保健食品。下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本专利技术方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。本专利技术提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。实施例一半枝莲均一多糖的提取及纯度分析1.材料与方法1.1材料半枝莲(ScutellariabarbataD.Don，产地：浙江，批号：140409)生药饮品购自上海康桥中药饮片有限公司。由上海中医药大学可燕教授鉴定为药典品种；95％乙醇，氯化钠(国药集团化学试剂有限公司)；多功能提取浓缩机组(上海达程实验设备有限公司)；FD-15冷冻干燥机(金西蒙仪器有限公司)；EYELA旋转蒸发仪(东京理化公司)；BS-100A自动部分收集仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)；Aglient1100型高效液相(安捷伦科技有限公司)；DEAE色谱柱(上海业力生物科技有限公司)；Superdex凝胶(Pharmacia科技有限公司)。1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种半枝莲均一多糖提取物，其特征在于，所述半枝莲均一多糖提取物由如下方法制得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。

【技术特征摘要】
1.一种半枝莲均一多糖提取物，其特征在于，所述半枝莲均一多糖提取物由如下方法制得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。2.如权利要求1所述的半枝莲均一多糖提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：可燕，李汉清，蒋嘉烨，干仲元，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：上海,31