一种雪上一枝蒿多糖及提取方法以及应用技术

本发明专利技术公开了一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用乙醇回流脱脂，加入水提取，将所得提取液浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱或大孔吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。本发明专利技术的优点是：提取方法简单，效率高，能有效从雪上一枝蒿中提取得到多糖，并实现了雪上一枝蒿多糖在制备的促进脾淋巴细胞增殖和细胞因子产生作用，开拓了雪上一枝蒿新的药用价值，具有良好的经济和社会效益。

【技术实现步骤摘要】
一种雪上一枝蒿多糖及提取方法以及应用
本专利技术属于生物医药
，特别涉及一种雪上一枝蒿多糖及提取方法以及应用。
技术介绍
雪上一枝蒿(短柄乌头，Aconitumbrachypodum)系毛茛科乌头属植物短柄乌头的干燥块根，主要分布在云南东北部、西北部及四川西南部，野生于海拔3100-4100米的高山草地、多石山坡。其性温，味苦、辛，有大毒，具祛风除湿、通利关节、消肿止痛之功。乌头属植物在我国传统医药中占有重要地位，目前已经有40余种乌头属植物当作药物使用；2015年版《中华人民共和国药典》收载的乌头属药物有草乌、川乌和附子等6种。雪上一枝蒿中的化学成分，主要研究的是生物碱类成分，其具有活血、镇痛、抗炎等作用。从乌头属中开发了草乌甲素(BulleyaconitineA)等疗效确切的药物应用于临床；但乌头属植物的临床应用和一些药理作用不能完全被二萜生物碱成分解释，有学者推测另一类生物活性成分多糖很可能也在乌头属植物的临床治疗及药物应用中发挥了重要的作用；乌头属多糖的研究始于1986年，Konno等报道从日本乌头的根茎中分离得到四个具有降血糖活性的多糖。之后，相续开展了一些乌头属植物(主要是药用乌头)多糖成分的提取分离、结构鉴定、含量测定、生物活性等研究工作；但至今未见乌头属药物雪上一枝蒿多糖的相关研究报道，因此，开展雪上一枝蒿多糖的提取方法及生物学功能研究，有利于充分发掘雪上一枝蒿的药用价值。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的是提供一种雪上一枝蒿多糖及提取方法以及应用。为实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用乙醇回流脱脂，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，将所得提取液浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱或大孔吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。优选的，所述步骤(1)中乙醇的质量百分比浓度为70％～95％；回流脱脂的次数为2次。优选的，所述步骤(1)中加入水的质量为所述滤渣质量的4～8倍；加入水提取的次数为1～5次，每次水提取的时间为20～150分钟；提取的方式采用煎煮的方式来进行。优选的，所述步骤(1)中静置醇沉的时间为12～36小时。优选的，所述步骤(2)中溶解液与Sevag试剂的体积比为4～6:1。优选的，所述步骤(3)中洗脱剂包含甲醇和水，所述甲醇与水的体积比为1:0.5～2。本专利技术还提供了一种所述的提取方法得到的雪上一枝蒿多糖。本专利技术还提供了一种所述的雪上一枝蒿多糖在制备的促进脾淋巴细胞增殖类药物中的应用。本专利技术还提供了一种所述的雪上一枝蒿多糖在制备的诱导脾淋巴细胞中IFN-γ或IL-6产生水平药物中的应用。本专利技术中，雪上一枝蒿多糖为简述方便，也可称为多糖。本专利技术具有以下有益效果：雪上一枝蒿多糖采用乙醇回流脱脂，水提醇沉，脱蛋白后，再上样于凝胶柱或大孔吸附树脂，提取方法简单，效率高，能有效从雪上一枝蒿中提取得到多糖，并实现了雪上一枝蒿多糖在制备的促进脾淋巴细胞增殖类药物中的应用，开拓了雪上一枝蒿新的药用价值，具有良好的经济和社会效益。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本专利技术，但并不构成对本专利技术的限定。此外，下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。实施例1一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用质量百分比浓度为90％乙醇回流脱脂2次，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，其中加入水的质量为所述滤渣质量的6倍；加入水提取的次数为3次，每次水提取的时间为30分钟；提取的方式采用煎煮的方式来进行。将所得提取液合并浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉24小时，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝5:1，V/V)，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；其中溶解液与Sevag试剂的体积比为5:1。(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱，用洗脱剂进行洗脱，其中洗脱剂包含甲醇和水，所述甲醇与水的体积比为1:1。收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。经检测，1千克雪上一枝蒿原药材，得到125克雪上一枝蒿多糖。实施例2一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用质量百分比浓度为95％乙醇回流脱脂2次，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，其中加入水的质量为所述滤渣质量的8倍；加入水提取的次数为5次，每次水提取的时间为20分钟；提取的方式采用煎煮的方式来进行。将所得提取液合并浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉36小时，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝5:1，V/V)，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；其中溶解液与Sevag试剂的体积比为6:1。(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱，用洗脱剂进行洗脱，其中洗脱剂包含甲醇和水，所述甲醇与水的体积比为1:2。收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。经检测，1千克雪上一枝蒿原药材，得到123克雪上一枝蒿多糖。实施例3一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用质量百分比浓度为70％乙醇回流脱脂2次，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，其中加入水的质量为所述滤渣质量的4倍；加入水提取的次数为1次，水提取的时间为150分钟；提取的方式采用煎煮的方式来进行。将所得提取液合并浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉12小时，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝5:1，V/V)，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；其中溶解液与Sevag试剂的体积比为4:1。(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱，用洗脱剂进行洗脱，其中洗脱剂包含甲醇和水，所述甲醇与水的体积比为1:0.5。收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。经检测，1千克雪上一枝蒿原药材，得到122克雪上一枝蒿多糖。实施例4一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用质量百分比浓度为85％乙醇回流脱脂2次，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，其中加入水的质量为所述滤渣质量的6倍；加入水提取的次数为3次，每次水提取的时间为30分钟；提取的方式采用煎煮的方式来进行。将所得提取液合并浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉24小时，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝5:1，V/V)，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；其中溶解液与Sevag试剂的体积比为5:1。(3)精制；取所述多糖溶液上样于D-101大孔吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，其中洗脱剂包含甲醇和水，所述甲醇与水的体积比为1:1。收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。经检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用乙醇回流脱脂，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，将所得提取液浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱或大孔吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。

【技术特征摘要】
1.一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)粗提；取雪上一枝蒿，用乙醇回流脱脂，过滤，得滤渣；向所述滤渣中加入水提取，将所得提取液浓缩，加入无水乙醇，混匀，静置醇沉，收集沉淀，干燥，得雪上一枝蒿粗提物；(2)将所述雪上一枝蒿粗提物用水溶解，向溶解液中加入Sevag试剂，混合，静置，得脱蛋白的多糖溶液；(3)精制；取所述多糖溶液上样于凝胶柱或大孔吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，干燥，得雪上一枝蒿多糖。2.根据权利要求1所述的一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中乙醇的质量百分比浓度为70％～95％；回流脱脂的次数为2次。3.根据权利要求1所述的一种雪上一枝蒿多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中加入水的质量为所述滤渣质量的4～8倍；加入水提取的次数...

【专利技术属性】
技术研发人员：左爱学，万春平，张建英，郑喜，
申请(专利权)人：云南中医学院，云南省中医医院，
类型：发明
国别省市：云南,53