一种泰万菌素的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种泰万菌素的纯化方法，其特征在于：步骤包括：(1)将泰万菌素粗品使用溶剂溶解后加入石油醚进行结晶，过滤干燥得到泰万菌素结晶；其中溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种或几种；(2)将步骤(1)所得泰万菌素结晶加入异丙醇溶解，滴加石油醚进行再结晶，过滤干燥后得到高纯度的泰万菌素。本发明专利技术简单易操作，条件温和，产率较高，以结晶方式代替过柱，大大节约时间和洗脱剂，所得泰万菌素的纯度可达到95％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种泰万菌素的纯化方法
本专利技术涉及抗生素纯化
，具体涉及一种泰万菌素的纯化方法。
技术介绍
泰万菌素，化学名为3-O-乙酰-4”-O-异戊酰泰乐菌素，是泰乐菌素经耐热链霉菌生物转化而来的。泰万菌素在药效上大大高于泰乐菌素，在药物残留方面比泰乐菌素表现出很大的优势。泰万菌素对支原体、螺旋体、大部分格兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎球菌等)和部分格兰氏阴性菌有较强的抗菌活性。目前国内的泰万菌素生产企业多采用酸提碱沉的方法提取泰万菌素，但在提取过程中产生较多杂质，结晶效果差，纯度一般仅有85％左右。中国专利文件CN104610403A公开了一种硅胶层析纯化泰万菌素的方法，虽然该方法得到的泰万菌素纯度可以达到97％，但是柱层析的时间较长，使用试剂量较大，工艺繁琐，成本较高。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种高效结晶提纯泰万菌素的方法，以克服现有泰万菌素精制工艺复杂、成本较高的问题。本专利技术提供了一种泰万菌素的纯化方法，步骤包括：(1)将泰万菌素粗品使用溶剂溶解后加入石油醚进行结晶，过滤干燥得到泰万菌素结晶；其中溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种或几种；(2)将步骤(1)所得泰万菌素结晶加入异丙醇溶解，滴加石油醚进行再结晶，过滤干燥后得到高纯度的泰万菌素。本专利技术的有益效果是：1、为了解决现有技术中高纯度泰万菌素产品的工业生产难题，本专利技术提出了一种新的泰万菌素结晶提纯的方法，本方法所得酒石酸泰万菌素产品HPLC检测含量可达95％以上，适于配制高端制剂。2、本专利技术的精制方法采用了较为简单的工艺，相对于过硅胶柱纯化方法成本大大降低，且能够方便地进行大规模工业化生产。工艺重复性好，所得产品质量稳定。附图说明图1是实施例1所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图2是实施例2所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图3是实施例3所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图4是实施例4所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图5是实施例5所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图6是实施例6所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图7是实施例7所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图8是实施例8所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图9是实施例9所得泰万菌素产品的液相检测图谱；图10是实施例10所得泰万菌素产品的液相检测图谱；具体实施方式本专利技术提供了一种泰万菌素的纯化方法，步骤包括：(1)将泰万菌素粗品使用溶剂溶解后加入石油醚进行结晶，过滤干燥得到泰万菌素结晶；其中溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种或几种；(2)将步骤(1)所得泰万菌素结晶加入异丙醇溶解，滴加石油醚进行再结晶，过滤干燥后得到高纯度的泰万菌素。优选的，步骤(1)中，所述泰万菌素粗品与溶剂的质量体积比为1:1～1:6，所述溶剂与石油醚的体积比为1:0.2～1:1.5。；优选的，步骤(2)中，所述泰万菌素结晶与异丙醇的质量比为1:2～1:5，所述异丙醇与石油醚的体积比为1:0.5～1:2.5。在泰万菌素的重结晶过程中，溶剂比例对于提纯效果具有较大的影响，因此本专利技术中使用的溶剂比例是有一定的要求的，不在给定的溶剂比例下结晶得到的纯度达不到很好的效果。优选的，步骤(1)中，溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种。优选的，步骤(1)中，所述溶解温度为20～60℃，结晶温度为20～40℃。优选的，步骤(2)中，所述溶解温度为40～60℃，所述结晶温度为20～55℃。下面将结合具体实施例对本专利技术提供的一种泰万菌素的纯化方法予以进一步说明。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料如无特殊说明，均为市场购买得到。所用到的泰万菌素粗品是由泰乐菌素经耐热链霉菌对其3位乙酰化，4”位异戊酰化得到的，纯度为83～84％。实施例一(1)将发酵得到的100g粗泰万菌素加600ml乙酸乙酯于温度20℃完全溶解后，滴加石油醚895ml至液体有少量混浊现象出现后停止滴加开始析出晶体，继续搅拌至有大量晶体后，抽滤分离得到一次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到一次结晶样74g。将得到的一次结晶样用300ml异丙醇40℃完全溶解后，降温至20℃，滴加石油醚580ml至液体有少量混浊后停止滴加开始结晶，至有大量晶体后，抽滤得到二次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到二次结晶样泰万菌素，经高效液相色谱检测纯度达到95.1％，对应的液相检测结果如附图1所示，附图1中各峰对应的保留时间及相对峰面积如表1所示。表1附图1中各峰对应的保留时间及相对峰面积实施例二(2)将发酵得到的100g粗泰万菌素加400ml乙酸乙酯于温度60℃完全溶解后，搅拌降温至40℃，滴加石油醚605ml至液体有少量混浊现象出现后停止滴加开始析出晶体，继续搅拌至有大量晶体后，抽滤分离得到一次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到一次结晶样70g。将得到的一次结晶样用280ml异丙醇45℃完全溶解后，降温至20℃，滴加石油醚315ml至液体有少量混浊后停止滴加开始结晶，至有大量晶体后，抽滤得到二次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到二次结晶样泰万菌素，经高效液相色谱检测纯度达到95.3％，对应的液相检测结果如附图2所示，附图2中各峰对应的保留时间及相对峰面积如表2所示。表2附图2中各峰对应的保留时间及相对峰面积实施例三(3)将发酵得到的100g粗泰万菌素加200ml乙酸乙酯于温度60℃完全溶解后，搅拌降温至40℃，滴加石油醚95ml至液体有少量混浊现象出现后停止滴加开始析出晶体，继续搅拌至有大量晶体后，抽滤分离得到一次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到一次结晶样78g。将得到的一次结晶样用310ml异丙醇60℃完全溶解后，降温至40℃，滴加石油醚605ml至液体有少量混浊后停止滴加开始结晶，至有大量晶体后，抽滤得到二次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到二次结晶样泰万菌素，经高效液相色谱检测纯度达到95.4％，对应的液相检测结果如附图3所示，附图3中各峰对应的保留时间及相对峰面积如表3所示。表3附图3中各峰对应的保留时间及相对峰面积实施例四(4)将发酵得到的100g粗泰万菌素加400ml四氢呋喃于温度60℃完全溶解后，搅拌降温至20℃，滴加石油醚580ml至液体有少量混浊现象出现后停止滴加开始析出晶体，继续搅拌至有大量晶体后，抽滤分离得到一次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到一次结晶样71g。将得到的一次结晶样用150ml异丙醇60℃完全溶解后，降温至40℃，滴加石油醚73ml至液体有少量混浊后停止滴加开始结晶，至有大量晶体后，抽滤得到二次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到二次结晶样泰万菌素，经高效液相色谱检测纯度达到95.1％，对应的液相检测结果如附图4所示，附图4中各峰对应的保留时间及相对峰面积如表4所示。表4附图4中各峰对应的保留时间及相对峰面积实施例五(5)将发酵得到的100g粗泰万菌素加400ml乙酸乙酯于温度40℃完全溶解后，45℃真空旋转浓缩至原有体积的1/4，搅拌降温至20℃后，滴加石油醚22ml至液体有少量混浊后开始析出晶体，继续搅拌至有大量晶体后，抽滤分离得到一次结晶湿粉，40℃真空干燥2h后得到一次结晶样70g。将得到的一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种泰万菌素的纯化方法，其特征在于：步骤包括：(1)将泰万菌素粗品使用溶剂溶解后加入石油醚进行结晶，过滤干燥得到泰万菌素结晶；其中溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种或几种；(2)将步骤(1)所得泰万菌素结晶加入异丙醇溶解，滴加石油醚进行再结晶，过滤干燥后得到高纯度的泰万菌素。

【技术特征摘要】
1.一种泰万菌素的纯化方法，其特征在于：步骤包括：(1)将泰万菌素粗品使用溶剂溶解后加入石油醚进行结晶，过滤干燥得到泰万菌素结晶；其中溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、四氢呋喃中的一种或几种；(2)将步骤(1)所得泰万菌素结晶加入异丙醇溶解，滴加石油醚进行再结晶，过滤干燥后得到高纯度的泰万菌素。2.如权利要求1所述的泰万菌素的纯化方法，其特征在于：步骤(1)中，所述泰万菌素粗品质量与溶剂体积之比为1:1～1:6g/mL，所述溶剂与石油醚的体积比为1:0.2～1:1.5。3.如权利要求1所述的泰万菌素...

【专利技术属性】
技术研发人员：康远军，余建飞，高经纬，戴军，李应林，李亮，
申请(专利权)人：湖北回盛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42