一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用制造技术

本发明专利技术公开了一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。所述病原真菌为产黄青霉菌、绿色木霉菌、杂色曲霉菌、木霉菌或黑曲霉菌。本发明专利技术安全无毒，抑制病原菌的效果好，利用天然植物提取物中含有抑制病原微生物、抗菌、抗炎、抗癌等生物活性成分的结构，可以达到不使用化学保鲜剂而延长果蔬货架寿命的效果。

Application of a group of aryl derivatives containing pyrazole coumarin skeleton in inhibiting pathogenic fungi of edible fungi

The invention discloses a class of derivatives containing aryl pyrazole coumarin skeleton in inhibiting the application of pathogenic fungi of edible fungi. The pathogenic fungi were Penicillium chrysanthemum, Trichoderma viride, Aspergillus versicolor, Trichoderma or Aspergillus niger. The invention is safe and non-toxic, and the effect of inhibiting the pathogenic bacteria is good. The use of natural plant extract contains the structure of inhibiting the biological active ingredients such as pathogenic microorganism, antibacterial, anti-inflammatory and anticancer, and can achieve the effect of prolonging the shelf life of fruit and vegetable without using chemical preservative agent.

【技术实现步骤摘要】
一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用
本专利技术涉及生化药学
，尤其涉及一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。
技术介绍
食用菌由于其营养价值丰富、味道鲜美及口味独特成为人们喜爱的重要食材之一。随着食用菌产量的增长，对高效安全的保鲜技术要求亦日益提高。目前控制食用菌采摘后病害的最有效手段是冷藏结合化学杀菌防腐剂处理，它们虽然能够杀死病原菌，达到防腐保鲜的目的，但是很多化学合成保鲜剂对人体健康却有一定的不利影响，甚至出现致癌、致畸、致突变等情况，因此越来越多的呼声要求开发安全、无毒、天然的食用菌保鲜剂。目前，缺乏一类植物源的含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是改善现有化学合成保鲜剂的不足，提供一类植物源的含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。本专利技术为实现上述目的，采用以下技术方案：本专利技术的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。进一步地，所述病原真菌为产黄青霉菌、绿色木霉菌、杂色曲霉菌、木霉菌或黑曲霉菌。更进一步地，所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅰ)所示：其中，R选自：-H、-F、-Cl、-CH3、-OCH3、-OH、-NO2、-CF3、-OCH2CH3。进一步地，所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅱ)所示：进一步地，所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅲ)所示：更进一步地，所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅳ)所示：有益效果：本专利技术的安全无毒，抑制病原菌的效果好，天然植物提取物中含有抑制病原微生物、抗菌、抗炎、抗癌等生物活性成分，可以达到不使用化学保鲜剂而延长果蔬货架寿命的效果。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：(1)本专利技术就旨在通过利用前人设计合成的一系列含芳基吡唑香豆素骨架的化合物，分析其结构，筛选出新型的具有高效抑菌作用的，具有经济、社会、环境效益的安全、无毒的绿色化学防腐保鲜剂，继而通过安全高效的防腐保鲜技术在生产上的推广和应用，大大降低食用菌物流过程中由病害而造成的损失，同时降低目前化学杀菌剂的大量使用，促进我国食用菌产业的可持续发展。(2)吡唑类衍生物因其具备良好的抗菌活性，一直是新型抗菌剂的研究热点。最近诸多报道芳基化吡唑环衍生物有显著的抑菌活性，多系列吡唑类高效抗菌药物骨架从而也被相继设计合成。另外香豆素是自然界一种苯并α－吡喃酮的天然有机化合物，广泛存在于豆类、甘草、肉桂、茄科等植物中，具有消炎杀菌等多种药理活性。附图说明图1为本专利技术的抑菌剂对5种霉菌的抑制效果的图谱；图2为本专利技术的化合物5，化合物10，化合物17对绿色木霉的抑制效果存在明显的量效关系。具体实施方式以下实施例仅处于说明性目的，而不是想要限制本专利技术的范围。实施例1本专利技术的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在食用菌保鲜技术中的应用。本专利技术的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。所述病原真菌为产黄青霉菌、绿色木霉菌、杂色曲霉菌、木霉菌或黑曲霉菌。所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅰ)所示：其中，R选自：-H、-F、-Cl、-CH3、-OCH3、-OH、-NO2、-CF3、-OCH2CH3。所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅱ)所示：所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅲ)所示：所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅳ)所示：实施例2上述含芳基吡唑香豆素骨架的抗菌化合物的生物活性评价方法主要为平板实验分析，并根据初筛结果，测定效果较好的抑菌剂对病原菌的量效关系。具体说明如下：食用菌常见病原菌：产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)、木霉(Trichodermasp.)、黑曲霉(Aspergillusniger)、绿色木霉(T.viride)、杂色曲霉(A.versicolor)。病原真菌孢子混悬液制备培养基的配制：PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g、KH2PO41g、MgSO40.5g溶于1000mL的蒸馏水中，121℃，灭菌20min备用。五种病原真菌的活化：从实验室冻存库中取各病原菌分别接种到适量的上述培养基中，在28℃培养箱中培养过夜。五种病原真菌的培养：将活化的菌株接种到适量的上述培养基中，28℃下培养7d。使用接种针于长有病原菌的试管内刮取病原菌菌丝及孢子，并转入到1.5mL离心管内，加入1％浓度的吐温80溶液，使用血球计数板观测菌液的浓度，并调整浓度至2*106CFU/mL。实施例3抗真菌活性研究供筛选抑菌剂存储液配制：20个含芳基吡唑香豆素骨架的衍生化合物。称取1mg的化合物，先用0.5mL乙醇助溶，再用蒸馏水定容至10mL，放在-20℃冰箱中保存备用。PDA平板，将化合物与无菌水制备为0.1mg/mL的抑菌剂溶液，采取无菌水作为阴性对照组。将配置好的抑菌剂使用移液枪加入PDA平板内，每个平板加入0.5mL，使用玻璃涂布棒将其涂布均匀，进行风干。将经灭菌的直径为5mm大小的滤纸片，加到含病原真菌孢子的混悬液内，使其充分沾上病原菌的孢子和菌丝。将带孢子的滤纸片接种于含样平板上，20℃下培养5-7d，测定各菌落直径大小，以蒸馏水为阴性对照，计算抑制率。平行实验三组。抑菌剂对5种霉菌的抑制效果如图1所示。从上述实验可知：本专利技术对产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)、木霉(Trichodermasp.)、黑曲霉(Aspergillusniger)、绿色木霉(T.viride)、杂色曲霉(A.versicolor)有很好的抑制作用，尤其是对木霉，化合物5，10，17的抑制率都在20％以上，最高的化合物10抑制率为26.19％。因此本专利技术的含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物可以应用于制备新型绿色化学防腐保鲜剂。实施例4量效关系分析选取平板试验中筛选所得的对病原菌抑制效果良好的化合物5，化合物10，化合物17配制成梯度浓度(0.01mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL)，采取无菌水作为阴性对照组。余下操作依实施例3进行。本专利技术的化合物5，化合物10，化合物17对绿色木霉的抑制效果存在明显的量效关系，随着浓度的增大，抑菌率亦随之提高(图2)。化合物5(如式Ⅱ所示)，化合物5的化学名称为4-(3-(2-((4-氯-2-氧-2氢-色满-3-基)亚甲基)肼-1-羰基)-5-(3，4-二甲基苯基)-1氢-吡唑-1-基)苯磺酰胺，化合物10(如式Ⅲ所示)，化合物10的化学名称为4-(3-(2-((4-氯-2-氧-2氢-色满-3-基)亚甲基)肼-1-羰基)-5-(4-乙氧基苯基)-1氢-吡唑-1-基)苯磺酰胺，化合物17(如式Ⅳ所示)，化合物17的化学名称为4-(3-(2-((4-氯-2-氧-2氢-色满-3-基)亚甲基)肼-1-羰基)-5-(4-硝基苯基)-1氢-吡唑-1-基)苯磺酰胺。从上述实验可知：本专利技术对食用菌贮藏和运输过程中的主要病原真菌表现出了相当的抑制作用，可以成为开发食用菌专用型保鲜剂的理想原料，用以开发高效安全的绿色产品，满足食用菌市场的需求。该本文档来自技高网...

【技术保护点】
一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在食用菌保鲜技术中的应用。

【技术特征摘要】
1.一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在食用菌保鲜技术中的应用。2.权利要求1所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物在抑制食用菌病原真菌上的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述食用菌病原真菌为产黄青霉菌、绿色木霉菌、杂色曲霉菌、木霉菌或黑曲霉菌。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的一类含芳基吡唑香豆素骨架的衍生物，其结构如式(Ⅰ)所示：其中，R选自：-H、-F、-C...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵晨雯，石宝俊，林群英，朱海亮，
申请(专利权)人：中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所，
类型：发明
国别省市：江苏,32