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一种湖南野艾蒿的组织培养方法技术

技术编号:17748921 阅读:135 留言:0更新日期:2018-04-21 09:37
本发明专利技术涉及植物组织培养领域,公开了一种湖南野艾蒿的组织培养方法。包括1)叶片形成愈伤组织:将野外采摘的湖南野艾蒿叶片经过消毒处理后,切去叶脉和叶缘,切成约5mm×5mm的小块,接种至愈伤组织诱导培养基上,常规培养至形成愈伤组织;2)愈伤组织分化不定芽:将步骤1)中形成的愈伤组织切成约5mm×5mm的小块,接种至分化芽的诱导培养基上,常规培养至愈伤组织上形成不定芽;3)不定芽生根:将步骤2)中形成的大小约3‑5cm的不定芽切下,接种至生根诱导培养基中,常规培养至根形成,获得野艾蒿组培苗。本发明专利技术的方法即可在47d之内获得大量优良的野艾蒿组培苗为实现对艾蒿野生资源的保护、栽培对种苗的需求以及基因库的建立奠定技术基础。

A method of tissue culture of Artemisia Artemisia in Hunan

The invention relates to the field of plant tissue culture, and discloses a tissue culture method for Artemisia argyi in Hunan. Including 1) leaves formation of callus: the leaves of the wild Artemisia Artemisia in the field were sterilizing, cut off the veins and leaf edges, cut into the small pieces of 5mm * 5mm, inoculated to the callus induction medium, and were routinely cultured to form callus; 2) the callus differentiated from the callus formed in step 1. The small pieces of 5mm * 5mm were inoculated to the inducible medium of differentiated bud, and the adventitious buds were formed on the callus by routine cultivation; 3) the adventitious bud rooting: the adventitious buds formed in step 2) were cut down by the adventitious buds of about 3 5cm, and inoculated into the rooting induction medium for routine cultivation to the root formation, and the tissue culture seedlings of Artemisia Artemisia were obtained. In this method, a large number of fine wild Artemisia Artemisia tissue culture seedlings can be obtained in 47D to lay a technical foundation for the protection of the wild Artemisia Artemisia, the demand for planting and the establishment of the gene bank.

【技术实现步骤摘要】
一种湖南野艾蒿的组织培养方法
本专利技术涉及植物组织培养领域,具体地说,涉及一种湖南野艾蒿的组织培养方法。
技术介绍
野艾蒿(ArtemisialavandulaefoliaDC.)是菊科蒿属的多年生草本,有时为半灌木状,植株有香气;主根稍明显,侧根多;根状茎稍粗,直径4-6mm,常匍地,有细而短的营养枝;茎少数,成小丛,稀少单生,高50-120cm;叶纸质,上面绿色,具密集白色腺点及小凹点;头状花序极多数,椭圆形或长圆形,直径2-2.5mm;瘦果长卵形或倒卵形;花果期8-10月。产黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山西、陕西、甘肃、山东、江苏、安徽、江西、河南、湖北、湖南、广东(北部)、广西(北部)、四川、贵州、云南等省区;多生于低或中海拔地区的路旁、林缘、山坡、草地、山谷、灌丛及河湖滨草地等。野艾蒿是一种集药用价值及食用价值于一身的天然中草药,入药,作“艾”(家艾)的代用品,有散寒、祛湿、温经、止血作用;嫩苗作菜蔬或腌制酱菜食用;鲜草作饲料用。目前大多的文献报道都集中在野艾蒿的成分和药用价值分析上,有关野艾蒿组织培养的文献报道非常少,国内有杨莹等的野生艾蒿的组织培养(杨莹等,2017)、王艳等的艾蒿生长点及试管苗培养的研究(王艳等,2012)等关于野艾蒿的报道,未见野艾蒿组织培养相关的专利。由于长期大量采集野艾蒿药用以及每年端午前的过度采拔,导致野生艾蒿迅速减少,乃至濒危灭绝,为保护野生资源、满足人们的需求,本专利技术选择优良的湖南野艾蒿品种,应用组织培养技术进行快速大量繁殖,并保持母本的优良品质,为野艾蒿的应用提供大量优良的原材料,为实现对艾蒿野生资源的保护、栽培对种苗的需求,以及基因库的建立奠定了技术基础。
技术实现思路
为解决长期大量野艾蒿的过度采拔,导致野生艾蒿迅速减少,乃至濒危灭绝的问题,以及保护野艾蒿野生资源、满足人们的需求,选择优良的湖南野艾蒿品种,应用组织培养技术进行快速大量繁殖,并保持母本的优良品质,为野艾蒿的应用提供大量优良的原材料,为实现对艾蒿野生资源的保护、栽培对种苗的需求,以及基因库的建立奠定技术基础。本专利技术提供的一种湖南野艾蒿的组织培养方法,包括如下步骤:1)叶片形成愈伤组织:将野外采摘的湖南野艾蒿叶片经过消毒处理后,切去叶脉和叶缘,切成约5mm×5mm的小块,接种至愈伤组织诱导培养基上,常规培养至形成愈伤组织;2)愈伤组织分化不定芽:将步骤1)中形成的愈伤组织切成约5mm×5mm的小块,接种至分化芽的诱导培养基上,常规培养至愈伤组织上形成不定芽;3)不定芽生根:将步骤2)中形成的大小约3-5cm的不定芽切下,接种至生根诱导培养基中,常规培养至根形成,获得野艾蒿组培苗。其中,所述叶片形成愈伤组织的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/L萘乙酸的MS培养基。其中,所述愈伤组织分化出不定芽的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/L萘乙酸的MS培养基。其中,所述不定芽生根的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和1mg/L萘乙酸的MS培养基。其中,所述MS培养基中含蔗糖浓度为30g/L,琼脂粉浓度为9g/L。其中,所述常规培养的培养条件为pH值为6.0,光照强度2000lx、光照时间16h/d,恒温培养箱温度为20-25℃。其中,所述的叶片形成愈伤组织的时间是20d。其中,所述的愈伤组织分化出不定芽的时间是15d。其中,所述的不定芽生根的时间是12d。本专利技术的有益效果在于:1)本专利技术的方法在47d之内可获得大量优良的野艾蒿组培苗,可快速、大量和优质的为野艾蒿的应用提供大量优良的原材料。2)本专利技术的方法在艾蒿野生资源的保护、栽培对种苗的需求,以及基因库的建立等方面具有重要意义。附图说明图1:是本专利技术实施例中培育20d后野艾蒿叶片形成愈伤组织的情况(野艾蒿来源于野外采摘,下同)。图2:是本专利技术实施例中野艾蒿的愈伤组织培养15d后分化出不定芽的情况。图3:是本专利技术实施例中野艾蒿不定芽培养12d后的生根情况。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的,并不是用于对本专利技术的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本专利技术的宗旨和精神的情况下,可以对本专利技术进行各种修改和替换。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。下述实施例中所使用的植物生长调节剂6-苄氨基嘌呤和萘乙酸与已报道的关于野艾蒿组织培养所使用的不同。实施例1一种湖南野艾蒿的组织培养方法,包括如下步骤:1)叶片形成愈伤组织:将野外采摘的野艾蒿叶片经过消毒处理后,切去叶脉和叶缘,切成约5mm×5mm的小块,接种至愈伤组织诱导培养基上,常规培养至形成愈伤组织。所述叶片形成愈伤组织的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/L萘乙酸的MS培养基;所述的叶片形成愈伤组织的时间是20d;所述MS培养基中含蔗糖浓度为30g/L,琼脂粉浓度为9g/L;所述常规培养的培养条件为pH值为6.0,光照强度2000lx、光照时间16h/d,恒温培养箱温度为20-25℃。2)愈伤组织分化不定芽:将步骤1)中形成的愈伤组织切成约5mm×5mm的小块,接种至分化芽的诱导培养基上,常规培养至愈伤组织上形成不定芽。所述愈伤组织分化出不定芽的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/L萘乙酸的MS培养基;所述的愈伤组织分化出不定芽的时间是15d;所述MS培养基和所述常规培养的培养条件同步骤1)。3)不定芽生根:将步骤2)中形成的大小约3-5cm的不定芽切下,接种至生根诱导培养基中,常规培养至根形成,获得野艾蒿组培苗。所述不定芽生根的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和1mg/L萘乙酸的MS培养基;所述的不定芽生根的时间是12d;所述MS培养基和所述常规培养的培养条件同步骤1)。结果表明,本专利技术的方法即可在47d之内获得大量优良的野艾蒿组培苗,为野艾蒿的应用提供大量优良的原材料,为实现对艾蒿野生资源的保护、栽培对种苗的需求,以及基因库的建立奠定技术基础,市场应用前景广阔。虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本专利技术作了详尽的描述,但在本专利技术基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本专利技术精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本专利技术要求保护的范围。本文档来自技高网
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一种湖南野艾蒿的组织培养方法

【技术保护点】
一种湖南野艾蒿的组织培养方法,包括如下步骤:1)叶片形成愈伤组织:将野外采摘的湖南野艾蒿叶片经过消毒处理后,切去叶脉和叶缘,切成约5mm×5mm的小块,接种至愈伤组织诱导培养基上,常规培养至形成愈伤组织;2)愈伤组织分化不定芽:将步骤1)中形成的愈伤组织切成约5mm×5mm的小块,接种至分化芽的诱导培养基上,常规培养至愈伤组织上形成不定芽;3)不定芽生根:将步骤2)中形成的大小约3‑5cm的不定芽切下,接种至生根诱导培养基中,常规培养至根形成,获得野艾蒿组培苗。

【技术特征摘要】
1.一种湖南野艾蒿的组织培养方法,包括如下步骤:1)叶片形成愈伤组织:将野外采摘的湖南野艾蒿叶片经过消毒处理后,切去叶脉和叶缘,切成约5mm×5mm的小块,接种至愈伤组织诱导培养基上,常规培养至形成愈伤组织;2)愈伤组织分化不定芽:将步骤1)中形成的愈伤组织切成约5mm×5mm的小块,接种至分化芽的诱导培养基上,常规培养至愈伤组织上形成不定芽;3)不定芽生根:将步骤2)中形成的大小约3-5cm的不定芽切下,接种至生根诱导培养基中,常规培养至根形成,获得野艾蒿组培苗。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述叶片形成愈伤组织的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/L萘乙酸的MS培养基。3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤组织分化出不定芽的诱导培养基为包含0.5mg/L6-苄氨基嘌呤和0.1mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈建荣刘芳唐映红唐伟卓
申请(专利权)人:长沙学院
类型:发明
国别省市:湖南,43

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