葡聚糖的生产制造技术

本发明专利技术涉及产葡聚糖的细菌菌株，涉及葡聚糖的生产方法，涉及含一种与葡聚糖生物合成有关酶的添加剂的生产方法，并涉及在食品或化妆品组合物生产中使用所述葡聚糖，所述酶和／或产生该葡聚糖以及该酶的菌株。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生产葡聚糖的菌株，葡聚糖生产的方法，含与葡聚糖生物合成有关的酶的添加剂的生产方法，和涉及在食品或化妆品组合物生产中应用此类葡聚糖，此类酶和/或产该葡聚糖和该酶的菌株。
技术介绍
葡聚糖是由葡萄糖单元形成的多糖，其链的加长由葡聚糖蔗糖酶催化。在许多细菌中，特别是在链球菌突变子，肠膜明串珠菌肠膜亚种和肠膜明串珠菌葡聚糖亚种中葡聚糖的生物合成已得到证明。肠膜明串珠菌产生葡聚糖蔗糖酶并在蔗糖存在时分泌该酶进入培养基中。然后该酶即葡聚糖蔗糖酶从蔗糖底物合成葡聚糖。葡聚糖在几个领域中有应用。特别是在生物化学中，它被用做交联葡聚糖型凝胶的层析过滤用支持物。此外，在医疗方面，它被用做血浆代用品(Biochimie generale(普通化学)-J.H.WEIL-Masson，1990年第六版171页)。而且，由肠膜明串珠菌葡聚糖亚种菌株合成的葡聚糖被用于食品工业，构成食品如酸奶酪，奶油糕点，乳质饮料和色拉调料的质地。因此，EP 0363633证明通过肠膜明串珠菌葡聚糖亚种菌株并特别是通过菌株肠膜明串珠菌葡聚糖亚种NRRL-B-18242合成葡聚糖。所述文献特别描述了含细菌合成的葡聚糖的组合物并描述了该组合物在食品领域的应用。而且，肠膜明串珠菌属的细菌菌株的分类已被修订数次。因此，Garvie等(国际分类细菌学杂志，118-119，1983)描述了根据脱氧核糖核酸(DNA)的同源性标准建立的肠膜明串珠菌属的细菌菌株分类。先前该细菌分类成为肠膜明串珠菌，葡聚糖明串珠菌和乳脂明串珠菌，虽然它们有不同的表型，就其DNA而言，它们有很高的同源性。因此，根据此分类，这些细菌是肠膜明串珠菌的亚种并且分别被称为肠膜明串珠菌肠膜亚种，肠膜明串珠菌葡聚糖亚种和肠膜明串珠菌乳脂亚种。此外，J.B.Milliere等(应用细菌学杂志，67卷，529-542页，1989年)描述了肠膜明串珠菌属的81个菌株进行的分类分析，其中包括肠膜明串珠菌乳脂亚种的11个菌株。该分析基于Garvie等建立的分类学并特别以下述标准为基础这些菌株发酵各种糖的能力，这些菌株利用柠檬酸的能力和这些菌株产生葡聚糖的能力。所述文件记录了这样的事实即肠膜明串珠菌乳脂亚种不合成葡聚糖。还根据它不发酵戊糖的事实对这类菌株作了鉴定和定义。尚未分离到能合成葡聚糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株。目前，肠膜明串珠菌乳脂亚种在乳制品，例如酸奶酪类发酵制品或奶油生产中有较大价值。因此，使用能合成宜人质地和味道的葡聚糖，特别是对构成此类食品的质地是很有价值的。本专利技术的目的是满足这个需要。专利技术概述为此目的，本专利技术涉及生产葡聚糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种的菌株，特别是肠膜明串珠菌乳脂亚种CNCM I-1692和CNCM I-1693。本专利技术进一步涉及使用肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株生产食品或化妆品组合物的方法。本专利技术进一步涉及从肠膜明串珠菌乳脂亚种生产葡聚糖的方法。本专利技术进一步涉及一种食品或化妆品组合物，通过进行所述方法得到的葡聚糖在该组合物制备期间被掺入其中。本专利技术进一步涉及生产含肠膜明串珠菌乳脂亚种的活性葡聚糖蔗糖酶的添加物的方法。本专利技术最终涉及一种食品或化妆品组合物，含肠膜明串珠菌乳脂亚种的活性葡聚糖蔗糖酶的添加物在该组合物制备期间被掺入其中。专利技术详述因此本专利技术涉及产生葡聚糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株。曾有可能分离产葡聚糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株。因此，所有的产葡聚糖肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株都被本专利技术所包含。肠膜明串珠菌乳脂亚种的一个菌株具体分离自Swiss奶油并且意外的发现它有合成宜人质地和味道的葡聚糖的显著特性。该菌株按照布达佩斯条约于1996年4月18日保藏在巴黎CEDEX15 rue duDocteur Roux，F-75724的巴斯德研究所的微生物培养物国家保藏所，该菌株在那里的保藏号是CNCM I-1692。而且，通过CNCM I-1692菌株的自然选择分离到一种亦有合成宜人质地和味道之葡聚糖的显著特性的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株。该菌株按照布达佩斯条约于1996年4月18日保藏在巴黎CEDEX15 ruedu Docteur Roux，F-75724的巴斯德研究所的微生物培养物国家保藏所，该菌株在那里的保藏号是CNCM I-1693。特别关于它们的形态学，糖发酵和其他方面的详细资料被给出如下。形态学-革兰氏阳性微生物，-过氧化氢酶阴性，-兼性需氧微生物，-球菌。糖发酵-从戊糖，D-和L-阿拉伯糖，D-和L-木糖和D-和L-核糖不产乳酸，-通过CNCM I-1692菌株从乳糖产乳酸，-通过CNCM I-1693菌株从乳糖不产乳酸。其他方面-合成葡聚糖，一种有显著构成质地性质之多糖的菌株。因此，根据本专利技术还可能分离一种不发酵乳糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株，一个实例是CNCM I-1693。一个本专利技术的优选菌株产生与CNCM I-1692菌株或CNCM I-1693菌株相同的葡聚糖。本专利技术进一步涉及生产葡聚糖的方法，其中用根据本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种的一个菌株之预培养物接种含蔗糖的培养基，使该培养物在25-35℃发酵10-20小时并且随后降低所得的培养物的pH到5-5.5，然后在0-10℃储存16-48小时。可用本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种的一个菌株的预培养物接种含至少2％蔗糖的培养基，例如为使产生葡聚糖蔗糖酶和在该培养基合成葡聚糖。例如可用0.2-3％的符合本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种的一个菌株，特别是CNCM I-1692菌株或CNCM I-1693菌株的预培养物接种以0.05-0.2％的酵母膏和至少2％的蔗糖补充的含5-12％MSK培养基(脱脂牛乳)的培养基。例如可使该培养基在25-35℃发酵10-20小时，pH保持在6-7.3。然后当发酵终止时，例如可通过加入乳酸使所得的培养物pH降低到5-5.5。然后在0-10℃该培养物被储存16-48小时。例如还可以用0.2-3％的符合本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种的一个菌株，特别是CNCM I-1692菌株或CNCM I-1693菌株的预培养物接种含0.05-0.2％的酵母膏和至少2％的蔗糖的培养基。例如可使该培养基在25-35℃发酵10-20小时，pH保持在6-7.3。当发酵终止时，该培养物可与等体积的20％MSK培养基混合以在发酵期间避免由例如MSK培养基中所含的乳糖对产生葡聚糖蔗糖酶的抑制。然后通过加入例如乳酸可使所得的培养物pH降低到5-5.5。然后该培养物被储存在0-10℃16-48小时。然后该培养物可被干燥以产生例如葡聚糖粉。通过例如冷冻干燥或喷雾干燥该培养物可被干燥。本专利技术进一步涉及包含肠膜明串珠菌乳脂亚种的葡聚糖的食品或化妆品组合物，该葡聚糖可通过进行上述方法得到。为制备这种产物或组合物，例如在其生产过程中，这种方法中得到的葡聚糖可被掺入食品或化妆品，如奶粉，酸奶酪，番茄酱，蛋黄酱或表皮奶油(skin cream)。本专利技术进一步涉及生产含活性葡聚糖蔗糖酶添加剂的方法，其中用本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株的预培养物接种含蔗糖培养基，然后使其在25-35℃发酵10-20小时。例如，可用符合本专利技术的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株的预培养物接种含至少2％蔗糖的培养基以使在该培养基中产生葡聚糖蔗糖酶。例如，本文档来自技高网...

【技术保护点】
产葡聚糖的肠膜明串珠菌乳脂亚种菌株。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D施米德，J埃比谢，N德阿米科，D德马勒普拉德，K埃耶尔，R雷尼罗，
申请(专利权)人：雀巢制品公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]