芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用。本发明专利技术表明芹菜素处理能够以剂量依赖的方式降低高血压脑出血模型小鼠死亡率。芹菜素通过调节脑血管平滑肌细胞的基因表达来降低高血压脑出血的发病风险。

Application of apigenin in the preparation of drugs to prevent and treat hemorrhagic cerebrovascular diseases and ischemic cerebrovascular diseases caused by hypertension

The invention provides the application of apigenin in the preparation of drugs for preventing and treating hemorrhagic cerebrovascular disease and ischemic cerebrovascular disease caused by hypertension. The present invention shows that apigenin treatment can reduce the mortality of hypertensive intracerebral hemorrhage model mice in a dose dependent manner. Apigenin can reduce the risk of hypertensive intracerebral hemorrhage by regulating the gene expression of cerebral vascular smooth muscle cells.

【技术实现步骤摘要】
芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用
本专利技术属于医药领域，具体涉及天然药物芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药药物中的应用。
技术介绍
高血压疾病会引诸多脏器的继发损害，其中高血压引起的脑血管疾病是最为严重的一类并发症，已成为人类重大健康负担。根据《中国心血管病报告2016》，中国至少有卒中患者700万，推测至少20％为出血性卒中(即出血性脑血管病，脑出血)，即至少140万，其余为缺血性卒中(即缺血性脑血管病)。《中国脑卒中防治报告(2015)》指出，脑卒中在中国为第一位死亡原因，给中国造成的经济负担每年高达400亿元。据2017年刚刚发表在心血管领域权威期刊Circulation上的一项来自天坛医院的研究显示，国人脑出血发生率占卒中比例的23.8％，远高于其它国家5％～10％的脑出血比例。而且脑出血患者的预后极差，1个月内死亡率高达40％，1年内生活能够自理的患者仅占约12-39％。我国已逐步入老龄化社会，如果再有大量的中年人因脑出血早死或致残而不加以控制，我国第一个出现“井喷”甚至“海啸”的慢病就可能是脑出血。由此看来，尽快明确高血压脑出血发病机制以及干预中年人脑出血风险已刻不容缓。但目前针对高血压脑出血相关发病机制的研究还很不成熟，并且没有针对预防脑出血的药物投入临床应用。高血压、糖尿病、吸烟等为其公认的危险因素。但课题组研究发现高血压患者随访12年，仅0.5％患者出现脑出血。且高血压患者给予降压治疗后仍然有部分患者出现脑出血。这提示以降低血压为靶点的药物可能并不是预防高血压脑出血的首选策略，我们急需找到高血压脑出血的特异性干预药物。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提出可用于制备预防和治疗高血压引起的脑血管类疾病的药物的应用。为了实现上述目的，本专利技术提供芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用。其中，所述出血性脑血管病包括脑出血和蛛网膜下腔出血。优选地，所述脑出血为由壳核、基底节区出血，脑桥出血，小脑出血，脑叶皮质下出血，丘脑出血，皮质下出血，脑室内出血。优选地，所述蛛网膜下腔出血为由颅内动脉瘤或血管畸形破裂后血液直接流入蛛网膜下腔所致出血。优选地，所述缺血性脑血管病为短暂性脑缺血发作、脑梗死和腔隙性脑梗死。本专利技术还提供芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病造成的炎症的药物中的应用。本专利技术还提供另提供芹菜素在制备促进脑血管平滑肌增殖药物中的应用。其中，所述药物还包括药学上可接受的载体。优选地，所述药学可接受的载体包括稀释剂、赋形剂、崩解剂、填充剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂、表面活化剂、稳定剂中的任何一种或多种组合。其中，所述药物的剂型为注射剂、针剂、片剂、冲剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂中的任一种。芹菜素(5，7，4’三羟基黄酮，Apigenin)，又称芹黄素，是一种天然的广泛存在于多种水果、蔬菜、豆类和茶叶中的黄酮类化合物，在芹菜中含量最高。其在5，7，4’位置上的3个羟基和C2C3双键决定了其独特的药理学效应和生物学特性。目前芹菜素在预防和治疗癌症、治疗阿尔茨海默病、神经损伤修复、调节机体氧化应激水平等方面均发挥了不同程度的作用。但其在高血压靶器官损害特别是高血压脑血管病变和损伤的保护预防作用尚无明确报道。我们通过“颅内外血管差异表达基因数据库筛选以及网络药理学预测”途径发现，芹菜素很可能通过逆转脑出血易感基因的表达模式从而预防高血压脑出血的发生，并进行了详细的动物实验进行验证及高通量分子机制探讨。现有研究发现芹菜素能够引起血管舒张，但该研究并未构建任何心脑血管疾病的疾病模型，不能阐明芹菜素是否可能预防或逆转疾病发生。此外血管舒张受限也并非所有心脑血管疾病的共同发病机制，高血压脑出血时出血部位的血管往往发生显著扩张而并非收缩或狭窄。另有研究显示芹菜素能够保护缺血性疾病发生后的神经损伤修复，但该研究属于芹菜素对其的治疗范畴，并非对该疾病的预防保护作用。本专利技术提供的芹菜素能够以剂量依赖的方式抑制小鼠高血压脑出血疾病的发生。进一步脑血管转录组测序证实芹菜素通过抑制脑血管炎症反应、促进脑血管平滑肌细胞增殖、增强转录活性等方面发挥了关键的调控作用。附图说明图1为表达谱芯片数据处理及差异基因筛选流程图。图2为本专利技术实施例1中颅内外血管平滑肌差异表达基因的热图聚类分析；横坐标为颅内外平滑肌细胞样本，纵坐标为差异表达基因。图3为本专利技术实施例1中通过网络药理学方法筛选对高血压脑出血具有保护作用的药物。图4为本专利技术实施例2中高血压脑出血模型组及给予芹菜素干预组的生存曲线。图5为本专利技术实施例2中通过小动物颅脑MRI评价出血灶各组的典型图片，红色箭头指示出血灶。图6为本专利技术所用RNA建库及转录组测序流程图。图7为本专利技术所用转录组测序数据分析流程图。图8为本专利技术实施例3中芹菜素逆转脑出血变化基因的热图聚类分析。图9为本专利技术实施例3中芹菜素逆转脑出血变化基因的维恩图图10为本专利技术实施例3中芹菜素逆转脑出血变化基因的网络相互作用(ppi)图。图11为本专利技术实施例3中芹菜素逆转脑出血变化基因的基因本体学(GO)分析图。图12为本专利技术实施例4中通过MST微量热涌动法验证芹菜素与COX-2直接结合的统计图；上图为不同芹菜素浓度时荧光信号的衰减曲线，下图为芹菜素与COX-2结合的剂量依赖曲线。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件实施。实施例1：联合应用颅内外血管表达谱数据库和网络药理学研究方法筛选出芹菜素可能具有预防和治疗高血压脑出血的作用1.材料和仪器本环节应用生物信息学方法进行药物预测，不涉及实验材料和仪器。2.方法2.1选取颅内外血管差异表达数据库表1颅内外血管差异表达数据库2.2数据处理流程及差异基因筛选如图1所示为表达谱芯片数据处理及差异基因筛选流程。从GEO数据库下载CEL数据(后缀名为CEL的数据文件)，使用R语言处理Oligo数据包分析基因水平的表达，数据整理去除假阳性数据，使用R语言处理Limma数据包进行差异表达分析，依据差异表达倍数和p值筛选差异基因，对上调基因或下调进行信号通路分析。2.3差异基因热图分析将差异基因对应的校正后表达值导入一文本编辑软件中(如UltraEdit软件，下载地址https://www.ultraedit.com/)，用Cluster聚类软件(下载地址http://bioservices.capitalbio.com/xzzq/rj/3885.shtml)打开后，根据特征集计算样本之间的相似性，构建相似性矩阵，然后根据一定的原则进行聚类，聚类结果生成.cdt文件，该文件用treeview软件(下载地址：http://bonsai.hgc.jp/～mdehoon/software/cluster/manual/TreeView.html)打开后即可得到聚类热图。2.4基于网络药理学方法预测基于系统生物学理论，对颅内外血管差异表达基因进行网络分析，选取特定信号节点(Nodes)进行多靶点药物分子设计。本实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】
芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.芹菜素在制备预防和治疗高血压引起的出血性脑血管病和缺血性脑血管疾病药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述出血性脑血管病包括脑出血和蛛网膜下腔出血。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述脑出血包括壳核、基底节区出血，脑桥出血，小脑出血，脑叶皮质下出血，丘脑出血，皮质下出血或脑室内出血。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述蛛网膜下腔出血为由颅内动脉瘤或血管畸形破裂后血液直接流入蛛网膜下腔所致出血。5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺血性脑血管病为短暂性脑缺血发作、脑梗死和...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈敬洲，崔庆华，李昊，孙莹莹，张银辉，宋莉，陶瑾，刘天龙，肖宁，徐昊晨，
申请(专利权)人：中国医学科学院阜外医院，
类型：发明
国别省市：北京,11