The present invention relates to a recombinant subunit vaccine of alpha toxin of Clostridium Clostridium and its production method. The invention of the wild-type Clostridium septicum alpha toxin mature toxin fifty-fourth cysteine mutation of leucine, 264th ASN mutated to alanine, histidine 269th mutated to alanine, 310th tryptophan mutated to alanine, obtained for alpha toxin of animal body non-toxic mutants, and mutations in the protein C end plus 6 histidine tag, used as a vaccine antigen. At the same time, the recombinant expression vector and the recombinant host cell containing the nontoxic mutant encoding gene of Clostridium Clostridium alpha toxin are also disclosed. The recombinant subunit vaccine of Clostridium Clostridium alpha toxin prepared by the invention is much more effective than the existing vaccine, and greatly reduces the biological safety risk in the process of vaccine production. In addition, with the advantage of high concentration of the semi finished protein of the vaccine, the vaccine can be prepared without increasing the dosage of the combined vaccine.
【技术实现步骤摘要】
一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法
本专利技术涉及一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。属于兽用生物制品领域。
技术介绍
腐败梭菌(Clostridiumseptium)是一种革兰氏阳性厌氧杆菌,可引起动物和人的恶性水肿病、肌肉坏死、气性坏疽病以及坏死性肠炎等疾病,羊经由消化道感染该菌,引起的羊快疫(Braxy)是一种常见、多发、非接触、急性和致死性传染病。该菌可分泌α、β、γ和δ等多种外毒素,其中α毒素是其主要的致病性毒力因子和免疫保护性抗原,该毒素具有溶血、致死和坏死三种生物活性,能使消化道粘膜(尤其是真胃粘膜)发生炎症和坏死,同时经血液循环进入体内,会刺激中枢神经系统,引起动物急性休克而迅速死亡。腐败梭菌广泛分布于土壤、粪便、灰尘、沼泽及动物的消化道中,易通过被芽孢污染的饲料、饮水和周围环境等途径,经伤口或消化道引起羊、马、牛、猪、犬、猫、鸡、鹿等动物和人的恶性水肿病、肌肉坏死、气性坏疽以及坏死性肠炎等疾病,发病与动物的年龄、性别及品种无关。其传染途径一般有两种,一种是由于外伤如去势、断尾、分娩、外科手术、注射等没有严格消毒,致使腐败梭菌芽孢污染而引起感染,这种情况多为散发;另外一种经消化道感染,此时多呈地方流行,多发于秋、冬和初春气候骤变,阴雨连绵的季节。实验动物小鼠、豚鼠以及家兔均易感。此外,鸽也可感染,发病传播过程具有传播快、发病急、病程短、死亡率高的特点。绵羊对羊快疫最为易感,发病羊的营养多在中等以上,对畜禽养殖业的危害较大。因此,对该菌的研究具有十分重要的病原学和公共卫生学意义。由腐败梭菌引起的疾病如快疫,一般病程极为短促 ...
【技术保护点】
一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗,其特征在于所述疫苗含有采用大肠杆菌表达的重组腐败梭菌α毒素蛋白;制苗用菌种为重组表达产气荚膜梭菌α毒素蛋白的大肠埃希氏菌被命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21/mCSA株,该菌株已于2017年09月21日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCC No.14650。
【技术特征摘要】
1.一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗,其特征在于所述疫苗含有采用大肠杆菌表达的重组腐败梭菌α毒素蛋白;制苗用菌种为重组表达产气荚膜梭菌α毒素蛋白的大肠埃希氏菌被命名为大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)BL21/mCSA株,该菌株已于2017年09月21日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCCNo.14650。2.如权利要求1所述腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗,其特征在于所述重组腐败梭菌α毒素蛋白,与野生型腐败梭菌α毒素成熟毒素相比,含有4个氨基酸突变,分别为第54位半胱氨酸突变为亮氨酸,第264位天冬酰胺突变为丙氨酸,第269位组氨酸突变为丙氨酸,第310位色氨酸突变为丙氨酸。同时,在突...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈小云,杜吉革,薛麒,朱真,王磊,印春生,李启红,康凯,姚文生,
申请(专利权)人:中国兽医药品监察所,
类型:发明
国别省市:北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。