甾体类化合物在制备抗补体药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于中药制药领域，涉及甾体类化合物及其在制备抗补体药物中的用途。本发明专利技术从一种源自堇菜科植物天山堇菜(

Use of steroid compounds in the preparation of anti complement drugs

The invention belongs to the field of traditional Chinese medicine pharmaceuticals, and relates to steroid compounds and their use in the preparation of anti complement drugs. The present invention from Violaceae Tianshanjincai from a (

【技术实现步骤摘要】
甾体类化合物在制备抗补体药物中的用途
本专利技术属中药制药领域，涉及一种源自堇菜科植物天山堇菜(ViolatianshanicaMaxim.)的维吾尔药材天山堇菜中分离得到甾体类化合物及其在制备抗补体药物中的新用途。
技术介绍
现有技术公开了补体系统的过度激活会引发系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫综合征等多种重大疾病。抗补体药物研究多年来一直是世界药学研究的热点和重点。然而目前对此类疾病尚缺乏较为理想的治疗药物，因此临床上急需高效、低毒、专一的新型补体抑制剂。从天然产物中研究开发补体抑制剂是近年来一个受到越来越多关注的重要研究领域，其具有成本低、毒性低等特点。国内外学者已从包括海洋生物等在内的多种天然产物中分离得到大量具有补体系统抑制作用的单体化合物，为抗补体药物的研究与开发提供了广阔的前景。天山堇菜(维药名比乃非谢吉)为堇菜科植物天山堇菜（ViolatianshanicaMaxim.）和双花堇菜（ViolabifloraL.）的全草，是新疆特色药物中清热解毒药材的著名代表之一。主要用于轻泻异常胆液质，调节血液热性过盛，生津止渴，发汗退烧。临床用于热性感冒，发烧，头痛，咽痛，肢肿，小儿惊厥，也可外用于疔疮肿痛等症。早期对天山堇菜的化学成分有粗略的报道，从其大极性部分主要分离得到山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素3-O-葡萄糖苷、山柰酚、槲皮素、烟花苷和七叶内酯等黄酮类和香豆素类化合物；药理实验表明天山堇菜的水煎剂和挥发油分别显示出抗菌和抗氧化等生物活性。在2003年我国SARS(非典)爆发期间，维医药将天山堇菜及其复方作为首推的药物对该类重症感染性疾病进行防治，如天山堇菜糖浆、天山堇菜小丸、天山堇菜汤(维药名分别为：谢日比提比乃非谢、艾比比乃非谢、买提布合比乃非谢)等。迄今为止尚未见天山堇菜中甾体类化合物对补体系统具有抑制作用的的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供新的具有抗补体活性的物质，具体涉及从维药天山堇菜中分离得到的甾体类化合物，为豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(1)和24S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮(2)。本专利技术的进一步目的是提供上述维药天山堇菜中甾体类化合物在制备抗补体药物中的用途。本专利技术应用现代药理筛选方法，对分离得到的单体化合物进行抗补体活性评价研究，从维药天山堇菜干燥全草乙醇提取物的石油醚萃取部位分离得到2个甾体类化合物，并证实其对补体系统经典途径有活性。本专利技术的抗补体活性甾体类化合物具有下述结构通式：其中，R1=OH,O；R2=OH,H；R3=H,OH。当R1=OH、R2=OH、R3=H时，双键为△4,5，化合物为豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(1)。当R1=O、R2=H、R3=OH时，双键为△4,5和△28,29，化合物为24S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮(2)。本专利技术所述的甾体类化合物通过下述方法制备：干燥的维药天山堇菜全草，粉碎，用95%乙醇室温冷浸3次，合并提取液并浓缩至无醇味，浸膏加水稀释，依次以等体积（60~90℃）、乙酸乙脂、正丁醇萃取3次，得到石油醚、乙酸乙脂和正丁醇部位。对三个部位进行活性检测，发现石油醚部位活性良好。取石油醚部位，依次以石油醚-丙酮(50:1，30:1，15:1，9:1，7:1，5:1，4:1，3:1，2:1，1:1)梯度洗脱，得9个流份。所得流份近反复硅胶柱色谱、SephadexLH-20和制备色谱，分离得到,2个甾体类化合物豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(1)和24S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮(2)本专利技术中，化合物1（豆甾-4-烯-3β,6β-二醇）：无色晶体；1H-NMR(CDCl3,400MHz)数据：δH0.69(3H,sH-18);0.77~0.86(m,9H,H-26,H-27,H-29);0.90~0.92(3H,d,J=6.5Hz,H-21);1.00(3H,s,H-19);13C-NMR(CDCl3)数据：δC149.3(C-5),119.7(C-4),68.6(C-6),67.9(C-3),56.0(C-17),55.8(C-14),54.2(C-9),45.8(C-24),42.5(C-7),42.1(C-13),39.6(C-12),37.9(C-10),36.2(C-1),35.9(C-20),34.3(C-8),33.8(C-22),29.1(C-2),29.1(C-25),28.1(C-16),26.0(C-23),24.2(C-15),23.0(C-28),21.0(C-19),19.8(C-11),19.7(C-26),19.0(C-21),18.7(C-27),11.9(C-18),11.9(C-29)。化合物2（24S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮）：无色针晶；化合物5无色针状针晶（石油醚-丙酮）；分子式为C29H46O2;1H-NMR(400MHz,CDC13)数据：δH0.70(3H,sH-24);0.87~0.89(d,6H,H-23,H-24);0.95(3H,s,H-25);1.00~1.01(6H,d,J=2.6HzH-26,H-27);1.05(3H,s,H-30);1.18(3H,s,H-29);13C-NMR(CDCl3)数据：δC199.6(C-3),171.6(C-5),142.5(C-28),123.7(C-4),112.9(C-29),77.6(C-5),77.6(C-24),55.8(C-17),55.8(C-14),53.8(C-9),42.4(C-13),39.6(C-12),38.6(C-10),36.1(C-20),36.0(C-25),35.9(C-1),35.7(C-8),35.6(C-23),34.0(C-2),32.9(C-6),32.0(C-7),29.0(C-22),28.1(C-16),24.1(C-15),21.0(C-11),18.7(C-21),18.7(C-26),17.5(C-19),17.4(C-26),16.4(C-27),11.9(C-18)。本专利技术上述的甾体类化合物通过经典途径和旁路途径体外抗补体活性试验测定，结果表明上述甾体化合物对补体系统的经典途径和旁路途径均有抑制作用(如表1所示)。表1.化合物1-2对补体系统经典和旁路途径的抑制作用（Mean±SD，n=3）化合物化合物名称CH50(mg/ml)AP50(mg/ml)1豆甾-4-烯-3β,6β-二醇0.03±0.060.53±0.04224S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮0.05±0.040.61±0.03阳性对照肝素钠0.08±0.020.11±0.04其中，CH50是对经典途径50%抑制溶血所需供试品的浓度；AP50是对旁路途径50%抑制溶血所需供试品的浓度。本专利技术的甾体类化合物可制备抗补体药物。本专利技术的甾体类化合物可进一步制备治疗与补体相关疾病的药物；所述的与补体相关疾病包括系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫综合征等疾病。附图说明:图1.维药天山堇菜醇提物石油醚萃取部位甾体类化合物1和2的提取分离流程图。具体实施方式实施例1制备甾体类化合物取干燥本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构通式的甾体类化合物在制备抗补体药物中的用途，

【技术特征摘要】
1.具有下述结构通式的甾体类化合物在制备抗补体药物中的用途，其中，R1=OH,O；R2=OH,H；R3=H,OH。2.按权利要求1所述的用途，其特征在于，当R1=OH、R2=OH、R3=H时，双键为△4,5，化合物为豆甾-4-烯-3β,6β-二醇。3.按权利要求1所述的用途，其特征在于，当R1=O、R2=H、R3=OH时，双键为△4,5和△28,29，化合物为24S-豆甾-4,28-二烯-24-醇-3-酮(2)。4.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的甾体类化合物通过下述方法制备：干燥的维药天山堇菜全草，粉碎，用95%乙醇室温冷浸3次，合并提取液并浓缩至无...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琪，邵明会，陈道峰，
申请(专利权)人：王琪，
类型：发明
国别省市：新疆,65