尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶的基因序列制造技术

技术编号:1734169 阅读:189 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
从尖吻蝮蛇中分离纯化得到类凝血酶,测定该酶N端15个氨基酸的序列,据此设计简并的上游引物,其中含有翻译起始密码子ATG,以利于该基因的表达。然后根据与其它蝮属蛇毒类凝血酶3’非编码区同源性较高区域设计简并的下游引物。从毒腺中抽提总RNA,用PCR扩增出该基因,克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的cDNA编码699个核苷酸,即233个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。(*该技术在2017年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种编码为尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶的核苷酸序列,其特征在于它具有如下的DNA核苷酸及相应的氨基酸序列:ATGGTCATTGGAGGTGATGAGTGTGACATAAATGAACATCGTTTCCTTGTAGCCTTCTTT 60M V I G G D E C D I N E H R F L V A F FAACACTACTGGATTTTTCTGTGGTGGGACTTTGATCAACCCGGAATGGGTGGTCACTGCT 120N T T G F F C G G T L I N P E W V V T A GCACACTGCGACAGTACAAATTTCCAGATGCAGCTTGGTGTGCATAGCAAAAAGGTACTA 180A H C D S T N F Q M Q L G V H S K K V L AATGAGGATGAGCAGACAAGAAACCCAAAGGAGAAGTTCATTTGTCCCAATAAGAACAAC 240N E D E Q T R N P K E K F I C P N K N N AATGAAGTACTGGACAAGGACATCATGTTGATCAAGCTGGACAAACCTATTAGCAACAGT 300N E V L D K D I M L I K L D K P I S N SAAACACATCGCGC CTCTCAGCTTGCCTTCCAGCCCTCCCAGTGTGGGCTCAGTTTGCCGT 360K H I A P L S L P S S P P S V G S V C RATTATGGGATGGGGATCAATCACACC TGTTAAAGAGACTTTTCCCGATGTCCCTTATTGT 420I M G W G S I T P V K E T F P D V P Y CGCTAACATTAACCTACTTGATCATGCAGTGTGTCAAACA GGTTATCCAAGTTGCTGGCGG 480A N I N L L D H A V C Q T G Y P S C W RAATACAACATTGTGTGCAGGTTTCCTGGAAGGAGGCAAAGATACATGTGGGG GTGACTCT 540N T T L C A G F L E G G K D T C G G D SGGGGGGCCCCTC...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周元聪吴祥甫潘华杜晓燕
申请(专利权)人:中国科学院上海生物化学研究所
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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