【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是。生物学常识告诉我们,所有的真核生物都至少有两套遗传的机构核基因组和线粒体基因组。前者携带的基因是通过孟德尔方式遗传的,后者则是通过母系遗传的,即通过卵传递给后代。现有的制备转基因小鼠的方法所转移的目的基因都是核基因。本专利技术的目的在于提出,原则上它也可以用来制备带有转线粒体基因组的其他动物。这种品系的动物在理论研究和实际应用方面都有广阔的前景,如用于研究人类线粒体基因缺陷的遗传病、研究线粒体对动物胚胎发育的影响、培育具有高生产性能的核-质杂种牲畜、以及克隆珍稀和濒临灭绝的动物,等等。本专利技术的方法步骤如下一、将带有核遗传标记(如控制毛色遗传的标记)的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的线粒体去除,代之以异源的线粒体。具体操作如下1.将小鼠ES细胞和异种动物的细胞分别培养在适当的基片上。2.将培养的两种细胞分别用细胞松弛素处理。3.将处理的两种细胞分别离心,获得相应的核体和胞质体。4.取样检测上述核体和胞质体的处理效果,调整处理方法,使(1)小鼠ES细胞的核体中不含有或几乎不含有线粒体;(2)异种细胞的胞质体中不残留有任何的细胞核。5.将达到上述(1)与(2)要求的两种成分用PEG(聚乙二醇)或电击的方法融合。6.将上述的融合细胞在适当条件下培养一段时间。二、将经过上述处理的ES细胞注射到带有不同的核遗传标记的小鼠品系的早期囊胚中。三、将上述囊胚移植到代孕母鼠的子宫中,饲养到直至产下子鼠。只要移植操作足够多,这些子鼠中总可以发现具有核遗传标记的镶嵌性状(如杂色皮毛)者。四、取上述具有镶嵌性状的雌性小鼠与一般品系的小鼠杂交。对所产后代中的 ...
【技术保护点】
一种制备转基因动物的方法,其特征在于,所转移的是整个线粒体基因组,其操作步骤包括:将带有核遗传标记的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的线粒体去除,代之以异源的线粒体。
【技术特征摘要】
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