【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种对猪血中的超氧化物歧化酶进行提取的方法。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案是，按以下步骤进行1)、分离血球取新鲜猪血250ml，随即加入1g柠檬酸三钠(抗凝剂)，搅拌均匀，在0-4℃条件下，3000转/分离心15分钟，得血球；2)、洗涤血球加入同体积的0.9％生理盐水洗涤血球，并以上述同样条件离心，重复三次；3)、溶解破裂血球把洗涤后的血球收集于烧杯内，然后加入与血球同体积的双蒸水，在冰水浴中搅拌溶血30分钟，并在0-4℃的冰箱中放置；4)、去血红蛋白将溶血中加入0.25倍体积的预冷的95％乙醇和0.15倍体积的预冷氯仿，搅拌15分钟，静置30分钟，5600转/分离心10分钟，取上清液，并再次离心，得粗酶液；其特征是将粗酶液在60-65℃条件下加热20分钟，得到高纯度的超氧化物歧化酶。本专利技术将粗酶液在60-65℃条件下加热20分钟，可得到杂蛋白质含量少、酶的比活性大的高纯度超氧化物歧化酶。该方法简单，成本少，效率高，极大地提高了酶的纯度。具体实施例方式，按以下步骤进行1)、分离血球取新鲜猪血250ml，随即加入1g柠檬酸三钠(抗凝剂)，搅拌均匀，在0-4℃条件下，3000转/分离心15分钟，得血球；2)、洗涤血球加入同体积的0.9％生理盐水洗涤血球，并以上述同样条件离心，重复三次；3)、溶解破裂血球把洗涤后的血球收集于烧杯内，然后加入与血球同体积的双蒸水，在冰水浴中搅拌溶血30分钟，并在0-4℃的冰箱中放置；4)、去血红蛋白将溶血中加入0.25倍体积的预冷的95％乙醇和0.15倍体积的预冷氯仿，搅拌15分钟，静置30分钟，5...
【技术保护点】
超氧化物歧化酶的制备方法，按以下步骤进行：１）、分离血球：取新鲜猪血２５０ｍｌ，随即加入１ｇ柠檬酸三钠，搅拌均匀，在０－４℃条件下，３０００转／分离心１５分钟，得血球：２）、洗涤血球：加入同体积的０．９％生理盐水洗涤血球，并以上述同样条件离心，重复三次；３）、溶解破裂血球：把洗涤后的血球收集于烧杯内，然后加入与血球同体积的双蒸水，在冰水浴中搅拌溶血３０分钟，并在０－４℃的冰箱中放置；４）、去血红蛋白：将溶血中加入０．２５倍体积的预冷的９５％乙醇和０．１５倍体积的预冷氯仿，搅拌１５分钟，静置３０分钟，５６００转／分离心１０分钟，取上清液，并再次离心，得粗酶液：其特征是将粗酶液在６０－６５℃条件下加热２０分钟，得到高纯度的超氧化物歧化酶。
【技术特征摘要】
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。