带有棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒基因和P10基因启动子序列的快速供体质粒及构建方法技术

本发明专利技术公开了一种带有棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒基因和Ｐ１０基因启动子序列的快速供体质粒的构建方法，当外源基因插入到Ｐ１０控制下的多克隆位点后，经转位将外源基因和多角体基因同时插入到棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒穿梭表达载体中的转位子插入位点，转染到棉铃虫细胞后，能在光学显微镜下观察细胞内是否形成包涵体，如细胞内形成包涵体，证明转染获得成功，随后收集重组病毒粒子再感染细胞，并可进行外源基因表达水平的检测。本发明专利技术将外源基因快速插入到ＨＺ８表达载体上，仅需７－１４天就能获得重组病毒并能在ＨｚＡｍｌ细胞内表达外源基因；在Ｐ１０强启动子的调解下能高效表达外源基因；能通过多角体表型快速鉴定重组病毒。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

【技术保护点】
一种带有棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒基因和Ｐ１０基因启动子序列的快速供体质粒，ｐＦａｓｔＰｈＰ１０，ＣＣＴＣＣ Ｍ２０１０４７，在带有苜蓿银纹夜蛾多粒包埋核型多角体病毒多角体基因启动子序列和Ｐ１０基因启动子序列的双向供体质粒上用棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的多角体基因和Ｐ１０基因的启动子序列取代苜蓿银纹夜蛾多粒包埋核型多角体病毒多角体基因启动子序列和Ｐ１０基因启动子序列；载体组装于Ｔｎ７转座子的左右臂序列和带有自身启动子的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒多角体基因和棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的Ｐ１０基因的强启动子序列和一个多克隆位点。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：王汉中，陈新文，胡志红，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]