一种野油菜黄单胞菌变种及其杀虫培育使用方法技术

本发明专利技术涉及一种可以导致多种农作物害虫生病死亡的黄单胞菌及其杀虫培育使用方法。本发明专利技术的虫瘟菌于２００２年１２月１３日在武汉的中国典型微生物保藏中心（ＣＣＴＣＣ）保藏，保藏编号为：ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０２０４６，拉丁学名为ＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＧＸＷ１５－４。实验证明，ＸＣ－ＧＸＷ１５－４能够有效杀灭多种农作物害虫，并且使用安全，对动植物无毒害作用，不污染环境，可以作为新一代的生物杀虫剂。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种细菌，尤其是一种可以导致多种农作物害虫生病死亡的黄单胞菌及其杀虫培育使用方法，属于微生物
本专利技术的虫瘟菌于2002年12月13日在武汉的中国典型微生物保藏中心(CCTCC)的保藏，保藏编号为CCTCC NOM 202046，拉丁学名为Xanthomonas campestris GXW 15-4(下文简称为XC-GXW15-4)。其个体形态特征为革兰氏阴性，短杆状，两端钝圆，培养时间稍长则更短，近似球状，菌体大小为1-1.2微米×4.8-5微米；运动，具有鞭毛，但鞭毛的数量较少。生理生化特性为能利用多种碳水化合物，包括葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露糖、七叶灵、淀粉、阿拉伯糖、半乳糖、海藻糖、纤维二糖和果糖，但不能利用鼠李糖；能利用多种有机酸和有机醇，如甘露糖、水杨苷；能利用苹果酸盐、丙酸盐、乙酸盐以及琥珀酸盐，但不能利用乙醇生成乙酸，也不能利用苯甲酸盐、草酸盐或酒石酸盐，不能利用阿东醇、肌醇、卫矛醇，不还原硝酸盐，能水解明胶，接融媒为阴性。本专利技术虫瘟菌(XC-GXW15-4)的培育使用方法为A、将分离纯化的菌株用试管LB斜面培养，温度24～30℃，光照度3000～5000lx，时间24～36小时，PH值7-7.2；B、选出LB斜面上生活率高的优良菌株；C、将筛选出的优良菌株接种扩大培养，条件与步骤A相同；D、脱水烘干，温度45～50℃，使含水量小于5％，含菌量为100～150亿个/克，采收后保存备用；在24～28℃条件下保存期可达90天；E、使用时，将保存的菌剂稀释后喷洒到农作物叶面。施药后发现，菌体相互传染，农作物害虫在1～2天内纷纷死亡。其形态特征均为头部水肿、向下，腹部腐烂，溢出淡黄色液体，并有臭味。分析证明，XC-GXW15-4的胞子可以破坏昆虫体内蛋白质的组成，因此具有直接杀虫作用，对害虫杀灭效果极为显著，而对其他动、植物无任何影响，因此可以作为具有理想效果的新一代生物杀虫剂。专家认为，虫瘟菌是野油菜黄单胞菌中唯一的昆虫病原细菌，其学名为XC-GXW15-4。根据伯杰手册(第八册)1970年植病学家已先后鉴定并以黄单胞菌属命名了124个种植病细菌，5个基因种；最近Vanterin(1995)进一步比较了Xanthomonas183成员DNA-NDA杂交和DNA-rRNA杂交的同源性，区分为20种(组)，除了已明确的四个种(x.aibilineansh，x.fragariaee，x.oryzae和x.populi)之外，又新设立了16个种，新的x.camlpestis种以下的致病变种都是侵染十字花科的细菌类群。而虫瘟菌(XC-GXW15-4)菌株是昆虫病原细菌，是黄单胞菌属首先发现和研究出昆虫致病菌株，再加之XC-GXW15-4个体形态、运动特点、革兰氏反应、LB培养特征、虫培养特征、生理生化反应特性以及对鳞翅目害虫有别现有的生物致病效果和独特之处，值得进行加快开发推广运用。对鳞翅目菜粉蝶科、夜蛾科和螟蛾科2～3龄期幼虫致病死亡率试验结果为(24-28℃)施药后菜粉蝶幼虫 夜蛾科幼虫 螟蛾科幼虫24小时90～100％90％以上 90～95％36小时95～100％95％以上 90～95％48小时95～100％95％以上 90～100％2002年10月23日，为了解XC-GXW15-4对天敌种类和数量影响，在花菜田喷施浓度为XC-GXW15-4菌剂0.6亿个/ml，调查面积为1m2/尺，结果如下处理 调查种类 调查时间(头)24h48h 72hGXW15-4 寄生蝇2.12.2 2.1菌剂寄生峰2.32.6 2.50.6亿/ml草蛉 0.4 0.5蚂蚁 4.34.6 4.7敌杀死 寄生峰1.10.8 1.43000倍液寄生蝇0.2加甲胺磷草蛉1000倍液蚂蚁 3.22.1 2.4这说明XC-GXW15-4对天敌昆虫无不良影响。由此可见，对害虫的杀灭效果十分理想。对其他动、植物试验表明无任何影响。因此证明，XC-GXW15-4能够有效杀灭多种害虫，并且使用安全，对动植物无毒害作用，不污染环境，可以作为新一代的生物杀虫剂。权利要求1.虫瘟菌，于2002年12月13日在武汉的中国典型微生物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏编号为CCTCC NOM 202046，拉丁学名为Xanthomonas campestris GXW 15-4。2.根据权利要求1所述虫瘟菌的杀虫培育使用方法，其步骤为A、将分离纯化的菌株用试管LB斜面培养，温度24～30℃，光照度3000～5000lx，时间24～36小时，PH值7-7.2；B、选出LB斜面上生活率高的优良菌株；C、将筛选出的优良菌株接种于培养基扩大培养，条件与步骤A相同；D、脱水烘干，温度45～50℃，使含水量小于5％，含菌量为100～150亿个/克，采收后保存备用；E、将保存菌种稀释后喷洒到农作物叶面。3.根据权利要求2所述虫瘟菌杀虫培育使用方法，其特征在于所述虫瘟菌的扩大培养基用鲜蚕蛹烘干灭菌后粉碎制成。4.根据权利要求2或3所述虫瘟菌杀虫培育使用方法，其特征在于所述虫瘟菌采收粉碎后保存，条件为含水量小于5％，温度15～25℃，间歇光照3000～5000lx，真空。5.根据权利要求4所述虫瘟菌杀虫培育使用方法，其特征在于所述稀释倍数为含菌量0.6亿个/毫升～1.2亿个/毫升。6.根据权利要求1所述虫瘟菌作为生物杀虫剂的应用。全文摘要本专利技术涉及一种可以导致多种农作物害虫生病死亡的黄单胞菌及其杀虫培育使用方法。本专利技术的虫瘟菌于2002年12月13日在武汉的中国典型微生物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏编号为CCTCCNOM 202046，拉丁学名为Xanthomonas campestris GXW15－4。实验证明，XC－GXW15－4能够有效杀灭多种农作物害虫，并且使用安全，对动植物无毒害作用，不污染环境，可以作为新一代的生物杀虫剂。文档编号C12N1/20GK1431296SQ03112780公开日2003年7月23日 申请日期2003年1月28日 优先权日2003年1月28日专利技术者高小文, 高燕 申请人:高小文本文档来自技高网...

【技术保护点】
虫瘟菌，于２００２年１２月１３日在武汉的中国典型微生物保藏中心（ＣＣＴＣＣ）保藏，保藏编号为：ＣＣＴＣＣ ＮＯ：Ｍ２０２０４６，拉丁学名为Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ ＧＸＷ １５－４。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高小文，高燕，
申请(专利权)人：高小文，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]